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        核桃不同部位對小鼠記憶力的影響

        2022-08-05 11:35:36苗玥王秋萍譚超彭春秀龔加順
        食品研究與開發(fā) 2022年15期
        關(guān)鍵詞:小鼠劑量

        苗玥,王秋萍*,譚超,彭春秀,龔加順*

        (1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院,云南 昆明 650201;2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院,云南 昆明 650201)

        核桃營養(yǎng)價值豐富,有“萬歲子”、“長壽果”、“養(yǎng)生之寶”的美稱。核桃仁中含有豐富的蛋白質(zhì)[1]、脂肪酸和各種微量元素等多種對人體有益的營養(yǎng)物質(zhì),具有很高的藥用價值和營養(yǎng)價值[2]。近年來,大量研究表明,核桃仁中含有大量的不飽和脂肪酸,是大腦組織細胞的主要結(jié)構(gòu)脂肪,能軟化血管、預(yù)防高血壓和心臟病,具有“動脈清道夫”的美譽[3]。榮瑞芬等[4]對鮮核桃內(nèi)種皮總酚和總黃酮進行了分析測定,研究表明核桃內(nèi)種皮中酚類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)都明顯高于核桃仁中營養(yǎng)物質(zhì),其中酚類物以沒食子酸含量最高;黃酮類物質(zhì)以蘆丁含量最高。阿布力孜等[5]研究發(fā)現(xiàn)核桃分心木中黃酮類物質(zhì)含量最高,遠遠高于核桃仁及核桃內(nèi)種皮含量。黃酮類物質(zhì)在治療疾病和食品添加劑方面有較為廣泛的應(yīng)用,它可以通過促進抗氧化酶和抑制氧化酶的產(chǎn)生從而清除人體內(nèi)的游離自由基,起到延緩衰老、預(yù)防心血管疾病和癌癥等作用[6]。

        21世紀(jì)以來,隨著人類平均預(yù)期壽命的不斷延長,衰老和抗衰老已經(jīng)成為世界生命科學(xué)研究的熱點之一。尋找有效的天然產(chǎn)物作為預(yù)防衰老的藥物是目前的研究熱點。Gorji等[7]研究發(fā)現(xiàn)堅果類食品中富含的常量營養(yǎng)素、微量營養(yǎng)素和植物化學(xué)物質(zhì)是預(yù)防腦萎縮和記憶力衰退的重要物質(zhì)。乙醇會引起星形膠質(zhì)細胞的活化使其過量的表達纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)從而導(dǎo)致神經(jīng)變性或引起記憶力損傷[8]。核桃中富含的多不飽和脂肪酸可以改善動物記憶、認知和神經(jīng)效應(yīng)相關(guān)的氧化應(yīng)激(oxidation stress,OS)反應(yīng)和炎癥(inflammatory factor,INF)[9]。核桃內(nèi)種皮及核桃分心木中所含的黃酮類物質(zhì)具有較強的還原力和DPPH自由基清除活性,可以作為抗氧化成分的新來源[10]。

        當(dāng)前國內(nèi)外采用核桃仁、核桃內(nèi)種皮、核桃分心木對小鼠記憶力影響的對比研究尚未見報道。本實驗采用核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物及40%酒精衰老模型組做對比研究,探索不同部位核桃的抗衰老作用,以期為下一步開發(fā)功能性核桃產(chǎn)品提供理論參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑與儀器

        新鮮核桃:大理白族自治州漾濞彝族自治縣;石油醚、無水碳酸鈉、磷酸、無水葡萄糖、沒食子酸、苯酚:天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;硫酸、鹽酸:重慶川東化工有限公司;考馬斯亮藍G250:上海源葉生物科技有限公司;福林酚:北京索萊寶科技有限公司。以上所用試劑均為分析純。血清總膽固醇試劑盒、血清總甘油三脂試劑盒、血清高密度脂蛋白試劑盒、血清低密度脂蛋白試劑盒:上??迫A生物工程股份有限公司。

        SA 220型自動記錄水迷宮:江蘇賽奧斯生物科技有限公司;曠場實驗箱:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院自制;FD-1 A-50冷凍干燥機:上海比朗儀器制造有限公司;HH-8數(shù)顯電子恒溫水浴鍋:常州國華電器有限公司;JM-L80膠體磨:上海諾尼輕工有限公司;RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器:上海亞榮生化儀器廠;AU-680全自動生化分析儀:美國貝克曼庫爾特公司。

        SPF級雄性昆明種小鼠[實驗動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(滇)k 2015-0002,體重(20±2)g]、基礎(chǔ)飼料:昆明醫(yī)科大學(xué)實驗動物學(xué)部。

        1.2 方法

        1.2.1 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮及核桃分心木水提物樣品的制備

        新鮮的大理漾濞核桃剝殼后,分為去皮核桃仁、核桃內(nèi)種皮及核桃分心木三部分。將去皮核桃仁與水按照料液比1∶2(g/mL)打漿,過膠體磨直至無顆粒狀核桃仁,冷凍干燥得到核桃仁粉。分別將新鮮核桃內(nèi)種皮及分心木置于恒溫干燥箱中干燥,粉碎,水浴浸提[料液比 1 ∶20(g/mL)、85 ℃、1 h],過濾,濾液濃縮后冷凍干燥,分別得到核桃內(nèi)種皮及分心木水提物。

        1.2.2 主要成分測定方法

        1.2.2.1 粗蛋白含量的測定

        分別稱取粉末狀新鮮核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物0.5 g,參照GB 5009.5—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測定》中凱氏定氮法,經(jīng)消化、蒸餾、滴定測定樣品的蛋白質(zhì)含量,計算公式中氮換算為粗蛋白質(zhì)需要乘以6.25,每個樣品重復(fù)測定3次。

        1.2.2.2 脂肪含量的測定

        分別稱取新鮮核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物1 g,參照GB5009.6—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測定》中索氏抽提法,每個樣品重復(fù)測定3次。

        1.2.2.3 總糖含量的測定

        分別稱取粉末狀新鮮核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物2 g,參照管美玉等[11]的苯酚-硫酸比色法,每個樣品重復(fù)測定3次。吸光度A與多糖含量的回歸方程為y=5.858 1x+0.055 1,R2=0.993 8。

        1.2.2.4 氨基酸含量的測定

        參照邵金良等[12]的方法,使用茚三酮比色法,每個樣品重復(fù)測定3次。得到吸光度A與氨基酸含量的回歸方程為 y=2.087 7x+0.029 4,R2=0.989 9。

        1.2.2.5 總多酚、總黃酮的含量測定

        根據(jù)李杰等[13]的福林酚比色法,稱取樣品0.5 g加入蒸餾水10 mL,超聲30 min得到待測液。取待測液0.5 mL加入0.5 mL福林酚和1 mL飽和Na2CO3并定容至10 mL,在暗處放置35 min后在765 nm波長處測定吸光度,重復(fù)測定3次,取平均值。得到多酚含量與吸光度A的回歸方程:y=0.077 1x-0.000 7,R2=0.991 8。

        總黃酮測定:于2 mL離心管中,加入1 mL上述待測液、0.5 mL HCl(濃鹽酸 ∶水=1 ∶4,體積比)、0.5 mL 35%甲醛,暗處放置24 h后,3 000 r/min離心5 min,上清液即為非黃酮含量,將上清液按照上述福林酚比色法測定??傸S酮含量=總多酚含量-非黃酮含量[14]。

        1.2.3 實驗動物的分組與飼喂管理

        1.2.3.1 動物飼喂

        選SPF級昆明種小鼠88只,在空調(diào)動物飼養(yǎng)室中同室單籠飼養(yǎng),自由攝食,自由飲水。每天更換一次墊料、鼠籠,清洗飲水瓶。飼養(yǎng)溫度控制在(24±2)℃,相對濕度(60±10)%,所有小鼠均統(tǒng)一飼喂基礎(chǔ)飼料。

        1.2.3.2 動物組別設(shè)計

        將88只小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,隨機分成11組,每組8只,分別為正常對照組、模型組、核桃仁凍干粉低、中、高劑量組,核桃內(nèi)種皮水提物低、中、高劑量組和核桃分心木水提物低、中、高劑量組,正常對照組灌胃等容量生理鹽水,模型組灌胃等容量40%酒精[15-16],連續(xù)灌胃28 d。每7 d稱體重1次,按體重變化調(diào)整灌胃劑量。

        1.2.3.3 灌胃劑量

        根據(jù)“動物與人體的每公斤體重劑量折算系數(shù)表”來計算小鼠灌胃的劑量,并按照1、2、4倍來選擇低中高劑量,即核桃仁粉低、中、高劑量組灌胃量分別為3.60、7.20、14.40 g/kg·bw;核桃內(nèi)種皮水提物低、中、高劑量組灌胃量分別為 2.45、4.90、9.80 g/kg·bw;核桃分心木水提物低、中、高劑量組灌胃量分別為0.70、1.40、2.80 g/kg·bw。

        1.2.4 曠場實驗

        曠場實驗于灌胃28 d后開始,實驗期間繼續(xù)灌胃小鼠,于灌胃后1 h按灌胃順序進行曠場實驗。將開口的黑色測試箱(60 cm×60 cm×30 cm)箱底等分成25個正方形的方格(12 cm×12 cm),小鼠放進測試箱中適應(yīng)環(huán)境3 min后開始實驗,每只小鼠進行1次測試。參照Lin等[17]的方法,將小鼠放入曠場行為測試箱的中心位置,讓其在曠場中自由探索環(huán)境5 min,記錄小鼠在5 min內(nèi)跨越的方格總數(shù)和后肢直立次數(shù),每一次實驗之后,用75%乙醇及時清理干凈曠場測試箱中糞便及尿液,以避免之前小鼠所留下的氣味對后續(xù)實驗造成影響。

        1.2.5 自動記錄水迷宮實驗

        曠場實驗結(jié)束后第2天開始進行自動記錄水迷宮實驗。實驗連續(xù)進行6 d,前5d為定位航行實驗,第6天為空間測試實驗[18]。定位航行實驗方法:每天訓(xùn)練3次,每次將小鼠從迷宮入口處放入水中,同時開始計時并用鮮艷的綠色棍子引導(dǎo)小鼠尋找迷宮出口,記錄小鼠從入水到找到迷宮出口所需的時間,即逃避潛伏期。如果5 min內(nèi)未成功找到出口,則將小鼠引導(dǎo)上岸,并讓其在岸上休息2 min,此時逃避潛伏期記為不合格??臻g測試實驗方法:第6天撤去引導(dǎo)物,同樣將小鼠從迷宮入口處放入水中,讓小鼠在迷宮中尋找出口,并記錄小鼠到達出口所需時間。

        1.2.6 標(biāo)本采集處理與生化指標(biāo)檢測

        行為學(xué)實驗之后,所有小鼠禁食、禁水12 h,然后稱量體重,摘除眼球取血,取血后,小鼠迅速脫頸處死。所采集血液于4℃、3 000 r/min離心15 min,取上清液分裝,一部分用于小鼠血脂四項的檢測,另一部分凍存于-80℃。

        血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、血清總甘油三脂(total triglycerides,TG)、血清高密度脂蛋白(high density liptein cholesterol,HDL-C)、血清低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量的測定均根據(jù)對應(yīng)試劑盒方法,采用AU-680全自動生化分析儀測定。

        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

        采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計分析,結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)值,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示差異顯著;采用GraphPad 8.0.2繪圖。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物基本營養(yǎng)成分

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物主要成分見表1。

        表1 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物主要成分Table 1 Main components of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm g/100 g

        由表1知,核桃分心木水提物脂肪含量顯著低于核桃仁凍干粉及核桃內(nèi)種皮水提物(P<0.05);核桃仁凍干粉總糖含量、蛋白質(zhì)含量顯著高于核桃內(nèi)種皮及核桃分心木水提物(P<0.05);核桃內(nèi)種皮水提物氨基酸含量顯著低于其他兩組(P<0.05);核桃分心木水提物總多酚、總黃酮含量較為豐富,顯著高于其他兩組。

        2.2 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠體重及攝食量的影響

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠體重及攝食量的影響見表2、表3。

        表2 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠體重的影響(n=8)Table 2 Effects of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm on the body weight of mice(n=8)g

        表3 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠攝食量的影響(n=8)Table 3 Effects of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm the intake of mice(n=8)g/d

        續(xù)表3 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠攝食量的影響(n=8)Continue table 3 Effects of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm the intake of mice(n=8)g/d

        小鼠的體重增長情況及攝食量是反映生長發(fā)育的一個重要指標(biāo)[19]。由表2、表3可以看出,模型組和核桃內(nèi)種皮水提物低、高劑量組體重與正常對照組相比顯著降低(P<0.05);而核桃仁凍干粉低、高劑量組攝食量與正常對照組相比顯著增加(P<0.05),核桃分心木水提物組攝食量與正常對照組相比差異不顯著。說明核桃仁凍干粉、核桃分心木水提物對小鼠的生長發(fā)育無不良影響,且核桃內(nèi)種皮水提物能使小鼠體重降低。其中核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組在灌胃14 d后小鼠死亡一半[LD50>9.80 g/(kg·d)]。張澤生等[20]的研究表明核桃內(nèi)種皮多酚提取物,可減輕小鼠腦部的氧化損傷。其灌胃劑量最高為0.8 g/(kg·d),但本實驗是根據(jù)核桃內(nèi)種皮水提物中黃酮含量來計算灌胃劑量,未考慮到其他活性化合物含量對其的影響。因此說明高劑量或者不合理的用藥均會對小鼠的健康產(chǎn)生不利影響[21]。

        2.3 曠場實驗結(jié)果分析

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠運動探究能力的影響見圖1。

        圖1 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠運動探究能力的影響(n=8)Fig.1 Effect of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm on sports exploring ability of mice(n=8)

        曠場實驗可以用于檢測小鼠在新環(huán)境中的自主探索、運動能力和緊張恐懼的狀態(tài)[22]。由圖1可知,模型組與正常對照組相比,小鼠跨越方格數(shù)和后肢直立次數(shù)均顯著減少(P<0.05),說明40%酒精致衰老小鼠模型的運動探究能力受到嚴(yán)重損害。核桃仁凍干粉高劑量組、核桃分心木水提物高劑量組與正常對照組相比穿越方格數(shù)和后肢直立次數(shù)均顯著增加(P<0.05);核桃仁凍干粉低、中、高劑量組,核桃內(nèi)種皮水提物低、中劑量組和核桃分心木水提物低、中、高劑量組后肢直立次數(shù)均顯著高于模型組(P<0.05),說明核桃仁凍干粉及核桃分心木水提物能減輕致衰老因子的傷害,促進小鼠的自主運動能力。Shabani等[23]的研究表明核桃仁可能對順鉑誘導(dǎo)的運動和認知功能紊亂有保護作用。本研究發(fā)現(xiàn)核桃內(nèi)種皮水提物、核桃仁凍干粉、核桃分心木水提物在一定的劑量條件下能夠在一定程度上提高衰老小鼠的探究能力。

        2.4 自動記錄水迷宮結(jié)果分析

        2.4.1 定位航行實驗

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠在水迷宮中逃避潛伏期的影響見表4。

        表4 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠在水迷宮中逃避潛伏期的影響(n=8)Table 4 Effect of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm on escape latency of mice in water maze tes(tn=8)s

        由表4可知,隨著訓(xùn)練時間的延長,各組小鼠的逃避潛伏期均有所下降,且顯著性差異不大,說明小鼠并不是因為人為訓(xùn)練而產(chǎn)生機械記憶,從而縮短其到達平臺的時間。從訓(xùn)練第1天開始,模型組小鼠的逃避潛伏期顯著長于正常對照組(P<0.05),說明模型組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力衰退嚴(yán)重。核桃仁凍干粉低、中、高劑量組,核桃內(nèi)種皮水提物低、中、高劑量組及核桃分心木水提物低、中、高劑量組的逃避潛伏期與模型組相比顯著降低(P<0.05)。其中到第5天時核桃仁凍干粉高劑量組與其他組相比用時較短,其次為核桃分心木水提物高劑量組。Willis等[24]的研究發(fā)現(xiàn)在Morris水迷宮中,所有劑量的核桃仁都能改善工作記憶,但9%的核桃仁攝食量使大鼠記憶受損,因此適量的核桃膳食補充劑可以改善老年大鼠的認知和運動表現(xiàn)。而本研究發(fā)現(xiàn)核桃仁凍干粉高劑量組對改善學(xué)習(xí)記憶再現(xiàn)障礙效果更優(yōu),其余各給藥組與模型組和正常組相比改善空間學(xué)習(xí)記憶力明顯更優(yōu)。

        2.4.2 空間測試實驗

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠在水迷宮中測試期到達平臺時間的影響見圖2。

        圖2 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠在水迷宮中測試期到達平臺時間的影響(n=8)Fig.2 Effect of walnut kernel powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm time of reaching platform of mice in water maze test(n=8)

        由圖2可以看出,模型組小鼠測試期到達平臺時間較正常對照組顯著延長(P<0.05)。核桃仁凍干粉低、中、高劑量組,核桃內(nèi)種皮水提物低、中、高劑量組及核桃分心木水提物低、中、高劑量組測試期到達平臺時間與模型組相比均顯著下降(P<0.05),而與正常對照組相比核桃仁凍干粉高劑量組、核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組及核桃分心木水提物高劑量組顯著下降(P<0.05)。其中核桃仁凍干粉高劑量組及核桃分心木水提物高劑量組表現(xiàn)最佳。說明一定劑量的核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠記憶力有明顯的改善效果。Zhao等[25]的研究表明核桃油膠囊具有消除自由基、增強抗氧化能力、減輕氧化應(yīng)激損傷的作用,可用于抗衰老食品中。核桃內(nèi)種皮多酚提取物可顯著提高小鼠血清、肝臟和腦組織中超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶活力和總抗氧化能力,并降低丙二醛含量[26]。高莉等[27]研究發(fā)現(xiàn)核桃分心木浸提液中的有效活性成分如黃酮等對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌都有抑菌活性。本研究表明核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物對小鼠的記憶力有一定的影響。

        2.5 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠血脂的影響

        核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠血脂的影響見圖3。

        圖3 核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物及核桃分心木水提物對小鼠血脂的影響(n=8)Fig.3 The content of serum TG,TC,LDL-C and HDL-Con walnut powder,water extract of walnut kernel pellicle and walnut diaphragm in mice(n=8)

        由圖3可以看出,模型組、正常對照組、核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物各劑量組間TG含量無顯著性差異(P>0.05),但核桃仁凍干粉有降低小鼠TC、LDL-C含量的趨勢,核桃分心木水提物組隨著劑量的升高TG含量有下降的趨勢。核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組的TC、LDL-C、HDL-C含量與正常組相比顯著降低(P<0.05)。核桃分心木水提物低、中、高劑量組與正常組相比HDL-C含量顯著升高(P<0.05)。在Guasch-ferré等[28]的研究中將核桃按日常攝入總熱量的10%~24%計算加入到日常飲食中,發(fā)現(xiàn)添加核桃組與對照日糧組相比,吃核桃使總膽固醇和低密度脂蛋白濃度顯著降低,而對高密度脂蛋白和甘油三酯的影響不顯著。Scott等[29]的一項為期一年的研究發(fā)現(xiàn)核桃降低了DM2患者的高密度脂蛋白含量,而另一項為期6個月的研究發(fā)現(xiàn)核桃組與對照相比總膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白的含量都下降了。上述研究結(jié)果與本實驗基本相似。本研究發(fā)現(xiàn)適量食用核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物可以調(diào)節(jié)小鼠血脂。

        3 結(jié)論

        本實驗以灌胃40%酒精建立模型組,通過與正常對照組及模型組的對比,探究核桃仁凍干粉、核桃內(nèi)種皮水提物、核桃分心木水提物對小鼠記憶的影響作用。實驗發(fā)現(xiàn)高劑量的核桃仁凍干粉能促進小鼠的自主運動能力,提高小鼠的探究能力及提高小鼠的記憶能力(P<0.05)。食用核桃仁凍干粉 TG、TC、LDL-C、HDL-C含量無顯著性影響,但有降低小鼠TC、LDL-C含量的趨勢。核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組在曠場實驗中跨越方格數(shù)及后肢直立次數(shù)顯著低于正常組(P<0.05),說明核桃內(nèi)種皮水提物對小鼠的體質(zhì)有一定的影響。但在自動記錄水迷宮實驗中高劑量組與正常對照組相比均顯著下降(P<0.05)。核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組TC含量顯著降低(P<0.05)。但核桃內(nèi)種皮水提物高劑量組灌胃14d后小鼠死亡一半[LD50>9.80g/(kg·d)]。分析原因可能是由于以黃酮含量為灌胃劑量指標(biāo)計算可能會導(dǎo)致核桃內(nèi)種皮中其他活性物質(zhì)含量過高,而導(dǎo)致小鼠自主運動能力和對記憶能力的改善作用降低。高劑量的核桃分心木水提物能促進小鼠的自主運動能力,提高小鼠的探究能力及提高小鼠的記憶能力(P<0.05)。核桃分心木水提物低、中、高劑量組TG、TC、LDL-C含量與正常組相比無顯著性差異,而HDL-C含量顯著升高(P<0.05)。以上結(jié)果表明核桃仁凍干粉、核桃分心木水提物及一定劑量的核桃內(nèi)種皮水提物對小鼠自主運動探究能力、記憶力有明顯的改善作用,且能調(diào)節(jié)小鼠血脂,同時說明不同部位的核桃在記憶力食品開發(fā)的方面具有良好的應(yīng)用前景。

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