鄧希海，黃 進(jìn)，劉 哲

（1.達(dá)州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川達(dá)州 635000；2.達(dá)州水產(chǎn)技術(shù)推廣站，四川達(dá)州 635000；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅蘭州 730070）

大口黑鱸具有適應(yīng)性強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、養(yǎng)殖周期短、肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩等優(yōu)點(diǎn)，深受養(yǎng)殖者和消費(fèi)者歡迎，其在我國(guó)的養(yǎng)殖面積和養(yǎng)殖產(chǎn)量逐年增加，成為當(dāng)前我國(guó)主要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類養(yǎng)殖品種之一（林仕梅等，2022；張奇等，2022；周興梅等，2021）。但隨著規(guī)?；⒓s化養(yǎng)殖的快速發(fā)展，養(yǎng)殖密度大、飼料營(yíng)養(yǎng)不均衡、缺氧等問題導(dǎo)致大口黑鱸免疫力和健康狀況降低，嚴(yán)重降低了大口黑鱸養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。微生態(tài)制劑是一類多種有益微生物復(fù)合而成的生物活菌制劑（李俊等，2019），其作為飼料添加劑具有調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生物菌群平衡，提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能，提高動(dòng)物機(jī)體免疫力等多種功效，且具有純天然、無殘留、無耐藥性、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前最具有開發(fā)前景的抗生素替代品（朱恩恒等，2022；劉天旭等，2021），鑒于此，本研究以大口鱸魚幼魚為研究對(duì)象，探討微生態(tài)制在改善鱸魚生長(zhǎng)性能、生化指標(biāo)、抗氧化能力和免疫力等方面的應(yīng)用效果，為微生態(tài)制劑在鱸魚養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 復(fù)合微生態(tài)制劑復(fù)合微生態(tài)制劑由枯草芽孢桿菌、酵母菌、植物多糖以2∶2∶1比例混合組成，其活菌數(shù)大于1.0×1010CFU/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)將180尾大口鱸魚幼魚（平均體重為17.05±0.27 g）分為3組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾鱸魚。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組分別飼喂含1%、2%復(fù)合微生態(tài)制劑的基礎(chǔ)日糧。每天投喂飼料2次（8點(diǎn)和16點(diǎn)），飽食投喂，每日采用虹吸方式吸走水箱底污物。試驗(yàn)預(yù)試期為7 d，正式期為60 d。

1.3 血清樣品的采集試驗(yàn)結(jié)束禁食24 h后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇10尾魚，利用MS-222麻醉劑（終濃度為40 mg/mL）以浸浴方式對(duì)試驗(yàn)魚進(jìn)行麻醉，使用1.0 mL一次性注射器于試驗(yàn)魚的尾靜脈處采集血液，常規(guī)方法分離血清樣品。

1.4 生長(zhǎng)性能的測(cè)定分別測(cè)定試驗(yàn)鱸魚的初始體重和終末體重，計(jì)算增重率和特定生長(zhǎng)率，計(jì)算公式如下：

增重率/%=（末重-初重）/初重×100；

特定生長(zhǎng)率 /（%/d）=[ln末重（g）-ln初重（g）]/飼養(yǎng)天數(shù)×100。

1.5 生化指標(biāo)的測(cè)定利用全自動(dòng)生化分析儀依次測(cè)定血清中的總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、尿素氮（BUN）等血清生化指標(biāo)。

1.6 抗氧化能力的測(cè)定利用南京建成生物工程研究所的超氧化物歧化酶（SOD）、血清總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒依次測(cè)定血清樣品中的SOD、T-AOC、CAT、GSH-Px活性及MDA含量。

1.7 免疫力的測(cè)定利用南京建成生物工程研究所的酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）、補(bǔ)體3（C3）測(cè)定試劑盒依次測(cè)定血清樣品中的ACP、AKP、LZM、C3含量。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA）和Duncan多重比較，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)生長(zhǎng)性能的影響由表1可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組末重分別顯著提高6.57%（P＜ 0.05）、11.47%（P ＜ 0.05），增重率分別顯著提高9.08%（P＜ 0.05）、15.96%（P＜ 0.05），特定生長(zhǎng)率分別提高4.67%（P＞0.05）、8.41%（P＜0.05）。與試驗(yàn)1組相比，試驗(yàn)2組末重提高顯著4.61%（P＜0.05），增重率顯著提高6.31%（P＜ 0.05）。

表1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定結(jié)果

2.2 對(duì)血清生化指標(biāo)的影響由表2可知，與對(duì)照組相比，兩個(gè)試驗(yàn)組TP含量分別提高9.58%（P＞0.05）、14.68%（P＜0.05），ALB含量分別提 高 10.39%（P＞ 0.05）、21.13%（P＜ 0.05），AST含量分別顯著降低5.36%（P＜0.05）、9.44%（P＜ 0.05），ALT含量分別降低 6.83%（P＞0.05）、13.17%（P＜ 0.05），BUN 含量分別降低9.58%（P＞ 0.05）、14.68%（P＜ 0.05）。 與 試驗(yàn)1組相比，試驗(yàn)2組AST含量顯著降低4.31%（P＜ 0.05）。

表2 血清生化指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果

2.3 對(duì)抗氧化能力的影響由表3可知，與對(duì)照組相比，兩個(gè)試驗(yàn)組T-AOC活性分別顯著提高6.21%（P＜ 0.05）、13.37%（P＜0.05），SOD活性分別提高2.03%（P＞0.05）、4.47%（P＜0.05），GSH-Px活性分別顯著提高2.80%（P＜0.05）、4.41%（P＜0.05），MDA含量分別顯著降低8.47%（P＜ 0.05）、14.38%（P＜ 0.05）。與試驗(yàn) 1組相比，試驗(yàn)2組T-AOC活性顯著提高6.74%（P＜0.05），GSH-Px活性顯著提高1.56%（P＜0.05），MDA含量顯著降低6.46%（P＜0.05）。

表3 抗氧化能力的測(cè)定結(jié)果

2.4 對(duì)免疫力的影響由表4可知，與對(duì)照組相比，兩個(gè)試驗(yàn)組LZM含量分別顯著提高6.86%（P＜ 0.05）、11.60%（P＜ 0.05），C3含量分別顯著提 高 7.23%（P ＜ 0.05）、14.06%（P ＜ 0.05）。與試驗(yàn)1組相比，試驗(yàn)2組LZM含量顯著提高4.43%（P＜0.05），C3含量顯著提高6.37%（P＜ 0.05）。

表4 免疫力的測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 微生態(tài)制劑對(duì)鱸魚生長(zhǎng)性能的影響當(dāng)前已有研究結(jié)果表明，益生菌制劑能提高鱸魚的生長(zhǎng)性能，張冬梅等（2022）研究表明，鱸魚基礎(chǔ)飼料中添加0.5%、1%的枯草芽孢桿菌能提高鱸魚的增重率、特定生長(zhǎng)率和體重。卞宇豪等（2021）研究表明，利用酵母培養(yǎng)物替代鱸魚基礎(chǔ)飼料中的魚粉能改善鱸魚的增重率和飼料系數(shù)。本研究表明，飼喂1%、2%微生態(tài)制劑可將鱸魚末重分別提高6.57%、11.47%，增重率分別提高9.08%、15.96%，特定生長(zhǎng)率分別提高4.67%、8.41%。表明復(fù)合微生態(tài)制劑中包含多種益生菌和活性代謝產(chǎn)物可以發(fā)揮協(xié)同作用，能最大限度地提高鱸魚腸道的消化功能，故復(fù)合微生態(tài)制劑的作用效果將明顯好于單一的枯草芽孢桿菌或酵母培養(yǎng)物。

3.2 微生態(tài)制劑對(duì)鱸魚生化指標(biāo)的影響血清ALB主要在動(dòng)物肝臟內(nèi)合成，其生理功能在于修補(bǔ)組織和提供能量；ALT和AST是存在于肝組織細(xì)胞中的重要轉(zhuǎn)氨酶，肝臟受損會(huì)導(dǎo)致大量的ALT和AST釋入血液。王成強(qiáng)等（2019）研究表明，在珍珠龍膽石斑魚基礎(chǔ)飼料中添加枯草芽孢桿菌和酵母培養(yǎng)物能提高珍珠龍膽石斑魚AST活性。本研究在鱸魚基礎(chǔ)日糧中添加2%復(fù)合微生態(tài)制劑能顯著提高血清中TP、ALB含量，顯著降低AST、ALT含量，表明添加2%復(fù)合微生態(tài)制顯著改善鱸魚肝臟等組織器官健康，提高鱸魚肝臟等組織器官功能。

3.3 微生態(tài)制劑對(duì)鱸魚抗氧化能力的影響張冬梅等（2022）研究表明，在鱸魚基礎(chǔ)飼料中添加0.5%、1%的枯草芽孢桿菌能提高鱸魚SOD、GSH-Px等酶類抗氧化物活性，顯著降低MDA含量。王賽賽等（2021）研究表明鱸魚基礎(chǔ)飼料中添加0.5%復(fù)合微生態(tài)制劑能夠提高鱸魚SOD活力。柯浩等（2014）研究表明，在羅非魚基礎(chǔ)飼料中添加由富硒酵母菌、酵母菌、乳酸菌組成的富硒益生菌能提高鱸魚GSH-Px、SOD活性。本研究表明，飼喂2%微生態(tài)制劑可提高T-AOC、SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，與張冬梅等（2022）、王賽賽等（2021）、柯浩等（2014）的研究結(jié)果一致。表明復(fù)合微生態(tài)制劑能改善鱸魚機(jī)體內(nèi)的氧化平衡反應(yīng)，提高鱸魚的抗氧化能力。

3.4 微生態(tài)制劑對(duì)鱸魚免疫力的影響何偉聰?shù)龋?015）研究表明，枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌單獨(dú)或混合添加于飼料中均能顯著增加軍曹魚血清中LZM活性。李小梅等（2015）研究表明，在斜帶石斑魚基礎(chǔ)飼料中添加由光合細(xì)菌、短小芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌按照20%、2%和78%質(zhì)量百分比組成的復(fù)合益生菌能顯著增加斜帶石斑魚LZM活性。趙峰等（2019）研究表明，在奧尼羅非魚基礎(chǔ)飼料中添加由0.2%枯草芽孢桿菌和0.4%果寡糖能顯著增加奧尼羅非魚LZM活性。本研究表明，飼喂1%、2%微生態(tài)制劑可提高LZM活性和C3含量，與趙峰等（2019）、何偉聰?shù)龋?015）、李小梅等（2015）的研究結(jié)果一致性。表明復(fù)合微生態(tài)制劑中含有的益生菌及其活性物質(zhì)能提高魚類自身免疫力。

4 結(jié)論

鱸魚飼喂2%微生態(tài)制劑可顯著改善生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、抗氧化能力和免疫力。