王小飛， 傅江濤， 朱雙媚

（1.麗水市人民醫(yī)院耳鼻咽喉科，浙江 麗水 323000；2.麗水市人民醫(yī)院腫瘤科，浙江 麗水 323000）

頭頸部鱗狀細(xì)胞癌（head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC）是發(fā)生在口腔、喉部和咽部的鱗狀細(xì)胞癌的統(tǒng)稱，其整體治療效果較差，因而探索HNSCC的生物標(biāo)志物對制定診療方案和評估預(yù)后具有極其重要的意義。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6是一種由212個(gè)氨基酸組成的可溶性蛋白，在炎癥及免疫等生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用[1]。人類軟骨糖蛋白39（cartilage glycoprotein 39，YKL-40）是一種分泌型糖蛋白，滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞均可分泌YKL-40[2]。有研究結(jié)果顯示，YKL-40參與了血管生成和細(xì)胞生長、增殖、分化等病理生理過程[3]。YKL-40在結(jié)腸癌[4]、乳腺癌[5]等多種惡性腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)，且血清YKL-40水平與患者預(yù)后有關(guān)。為此，本研究擬探討血清IL-6和YKL-40在HNSCC患者預(yù)后評估中的價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2012年1月—2020年1月麗水市人民醫(yī)院收治的HNSCC患者130例，其中男74例、女56例，年齡（61.08±11.12）歲。所有患者均經(jīng)病理學(xué)檢查明確診斷。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）HNSCC由其他部位腫瘤轉(zhuǎn)移形成；（2）既往或就診時(shí)合并其他惡性腫瘤；（3）合并嚴(yán)重的器官損傷，如肝、腎功能不全；（4）合并風(fēng)濕性疾病或急性感染等可能影響血清IL-6和YKL-40水平的疾??；（5）臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果或隨訪資料不全。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集及檢測 采集所有患者治療前外周靜脈血5 mL，離心分離血清，-80 ℃保存，統(tǒng)一檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清IL-6和YKL-40水平。IL-6檢測試劑盒購自美國R&D公司，YKL-40試劑盒購自美國Invitrogen公司。檢測儀器為1510型酶標(biāo)儀（美國ThermoFisher Scientific公司）。

1.2.2 一般資料 采用美國癌癥聯(lián)合委員會（American Joint Committee on Cancer，AJCC）相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[6]對患者進(jìn)行腫瘤分級和分期。通過醫(yī)院電子病歷系統(tǒng)收集所有患者的一般臨床資料和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，包括年齡、性別、腫瘤部位、TNM分期及治療方式等。

1.2.3 隨訪 對所有患者進(jìn)行隨訪，隨訪終點(diǎn)為全因死亡或隨訪期結(jié)束，患者總生存期為樣本采集開始至任何原因?qū)е碌乃劳鲋埂３霈F(xiàn)終點(diǎn)事件的患者自動退出隨訪隊(duì)列。隨訪時(shí)間截至2021年1月1日，仍未出現(xiàn)終點(diǎn)事件記為刪失數(shù)據(jù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，2個(gè)組之間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線確定IL-6和YKL-40判斷患者預(yù)后的最佳臨界值，并依此進(jìn)行分組。采用Kaplan-Meier生存曲線分析患者的生存情況，生存期的比較采用Log-rank檢驗(yàn)。采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析影響HNSCC患者總生存期的危險(xiǎn)因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HNSCC患者的一般資料

130例HNSCC患者中，腫瘤部位為口咽45例（34.62%）、喉75例（57.69%）、下咽10例（7.69%）；TNM分期Ⅰ期10例（7.69%）、Ⅱ期29例（22.31%）、Ⅲ期57例（43.85%）、Ⅳ期34例（26.15%）。

2.2 IL-6、YKL-40與HNSCC患者臨床病理特征的關(guān)系

ROC曲線分析結(jié)果顯示，IL-6和YKL-40判斷HNSCC患者預(yù)后的最佳臨界值分別為19.8 pg/mL和119 μg/L。與IL-6≤19.8 pg/mL組比較，IL-6>19.8 pg/mL組TNM分期Ⅲ期和Ⅳ期患者所占比例顯著升高（P<0.05）；2個(gè)組之間性別、年齡、腫瘤部位和治療方式差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與YKL-40≤119 μg/L組比較，YKL-40>119 μg/L組年齡和TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期患者所占比例顯著升高（P<0.05）；2個(gè)組之間性別、腫瘤部位和治療方式差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1、表2。

表1 IL-6與HNSCC患者臨床病理特征的關(guān)系

表2 YKL-40與HNSCC患者臨床病理特征的關(guān)系

2.3 不同IL-6和YKL-40水平HNSCC患者Kaplan-Meier生存曲線分析

130例HNSCC患者中死亡79例。中位隨訪期為30.5個(gè)月（四分位區(qū)間為18～47個(gè)月）。Kaplan-Meier生存曲線分析結(jié)果顯示，IL-6>19.8 pg/mL組中位生存期（27個(gè)月）顯著短于IL-6≤19.8 pg/mL組（55個(gè)月）（P<0.001）；YKL-40>119 μg/L組中位生存期（31個(gè)月）顯著短于YKL-40≤119 μg/L組（47個(gè)月）（P=0.002）。見圖1。

圖1 不同IL-6和YKL-40水平HNSCC患者Kaplan-Meier生存曲線

2.4 影響HNSCC患者總生存期的危險(xiǎn)因素分析

單因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析結(jié)果顯示，TNM分期、IL-6和YKL-40與患者預(yù)后有關(guān)。多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析結(jié)果顯示，TNM分期、IL-6和YKL-40是影響HNSCC患者總生存期的危險(xiǎn)因素[風(fēng)險(xiǎn)比（hazard ratio，HR）值分別為2.65、1.78、1.69，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）分別為1.64～5.64、1.43～3.07、1.28～2.10]。見表3。

表3 影響HNSCC患者總生存期的危險(xiǎn)因素分析

3 討論

HNSCC是發(fā)生于頭頸部的常見的惡性腫瘤。雖然手術(shù)和放療、化療等治療方法能提高局部控制率，但HNSCC患者的總體生存期并未顯著提高[7]。當(dāng)HNSCC患者出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)，其5年生存率僅為40%；若出現(xiàn)遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移，則5年生存率進(jìn)一步下降至20%[8]。因此，對HNSCC預(yù)后標(biāo)志物的深入研究有助于及時(shí)采取合適和有效的干預(yù)措施，延長患者生存時(shí)間。

巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等多種細(xì)胞均可分泌IL-6。本研究結(jié)果顯示，IL-6與HNSCC的臨床特征及患者預(yù)后關(guān)系密切，是影響患者總生存期的危險(xiǎn)因素，檢測其水平有助于判斷HNSCC患者的預(yù)后。DUFFY等[9]的研究結(jié)果顯示，HNSCC患者IL-6水平顯著高于正常對照者（P<0.05）。MOJTAHEDI等[10]的研究結(jié)果顯示，隨著TNM分期的增高，HNSCC患者的IL-6水平逐步升高。這與本研究結(jié)果（IL-6水平較高患者的TNM分期Ⅲ期和Ⅳ期所占比例顯著升高）相似。還有研究發(fā)現(xiàn)，IL-6與喉鱗癌[11]和口腔鱗癌[12]患者預(yù)后不良有關(guān)。

IL-6與HNSCC預(yù)后不良的具體分子通路和機(jī)制尚不明確。YADAV等[13]的研究結(jié)果顯示，IL-6能誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)HNSCC的遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移。LEDERLE等[14]的研究結(jié)果顯示，IL-6可調(diào)控復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，以促進(jìn)鱗癌細(xì)胞的增殖。還有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞IL-6表達(dá)與HNSCC耐藥[15]和放射抵抗[16]有關(guān)。

YKL-40是一種相對分子質(zhì)量為40 000的分泌型糖蛋白，腫瘤細(xì)胞和軟骨細(xì)胞等均可以合成和分泌YKL-40。一項(xiàng)涵蓋41個(gè)隊(duì)列研究的Meta分析結(jié)果顯示，YKL-40水平升高是胃腸道腫瘤、卵巢癌、肺癌、泌尿道腫瘤和腦膠質(zhì)瘤患者總生存期縮短的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[17]，與本研究結(jié)果一致。ROSLIND等[18]發(fā)現(xiàn)，HNSCC細(xì)胞高表達(dá)YKL-40，且血清YKL-40水平升高的HNSCC患者總生存期和無復(fù)發(fā)生存期顯著縮短。SHAO等[19]的研究結(jié)果顯示，YKL-40可誘導(dǎo)腫瘤組織新生血管生成，抑制YKL-40表達(dá)后腫瘤新生血管生成減少。雖然目前已確認(rèn)YKL-40在多種惡性腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)，但YKL-40與HNSCC預(yù)后不良相關(guān)的具體分子機(jī)制尚不明確，仍需進(jìn)一步研究。

本研究的樣本量較大，納入的患者具有代表性。但本研究亦存在不足：（1）本研究為回顧性分析，研究結(jié)果可能有一定的偏差；（2）患者的異質(zhì)性較大，頭頸部不同部位的鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后可能存在差異；（3）僅檢測了患者治療前血清IL-6和YKL-40水平，動態(tài)檢測這2個(gè)指標(biāo)的變化情況可能更有意義；（4）本研究為單中心研究，結(jié)論有待前瞻性、多中心研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，血清IL-6和YKL-40水平是影響HNSCC患者總生存期的危險(xiǎn)因素，可用于評估患者的預(yù)后。聯(lián)合檢測血清IL-6與YKL-40水平對評估HNSCC患者預(yù)后有積極的意義。