彭翔宇，侯 健，顧佳鑫，劉 蕾

(河北省唐山市開(kāi)灤總醫(yī)院檢驗(yàn)科, 河北 唐山 063000)

帶狀皰疹是一種由水痘-帶狀皰疹病毒所引發(fā)的急性感染性疾病，帶狀皰疹感染后因水痘-帶狀皰疹病毒具有親神經(jīng)性可長(zhǎng)期潛伏于脊髓后跟神經(jīng)元中，當(dāng)機(jī)體勞累、感冒、抵抗力低下時(shí)水痘-帶狀皰疹病毒會(huì)再次繁殖，造成皮膚強(qiáng)烈炎癥的發(fā)生[1]。硼替佐米是臨床上用于治療前列腺癌、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)、血液腫瘤等多種疾病的抗腫瘤藥物，但含硼替佐米的方案在治療過(guò)程中可能引起免疫功能異常，進(jìn)而導(dǎo)致MM患者感染帶狀皰疹，影響其治療效果[2]。干擾素γ(interferon-γ,IFN-γ)可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬消化細(xì)菌的能力，對(duì)帶狀皰疹病情發(fā)展具有抑制作用[3]。白細(xì)胞介素6(interleukin-6,IL-6)可促進(jìn)炎性細(xì)胞聚集，加重帶狀皰疹患者炎癥反應(yīng)[4]。白細(xì)胞介素4(interleukin-4,IL-4)是一種可改變病毒免疫功能的細(xì)胞趨化因子，帶狀皰疹患者因免疫能力下降導(dǎo)致IL-4水平上升[5]。目前關(guān)于IFN-γ、IL-6、IL-4在含硼替佐米方案治療MM感染帶狀皰疹研究甚少，因此，本研究對(duì)IFN-γ、IL-6、IL-4在含硼替佐米方案治療MM感染帶狀皰疹患者中的表達(dá)進(jìn)行分析，為MM感染帶狀皰疹的早期診斷提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年8月—2021年8月我院收治的含硼替佐米方案治療MM感染帶狀皰疹患者60例作為MM感染帶狀皰疹組，男性29例，女性31例；年齡35～68歲，平均(48.93±6.50)歲；出疹時(shí)間(5.02±0.50)d；MM初治患者36例，復(fù)發(fā)、難治患者24例；帶狀皰疹發(fā)病部位：頭面部部18例，上肢16例，下肢26例。選取我院收治的單純MM患者60例為MM組，男性35例，女性30例；年齡34～67歲，平均(47.98±6.52)歲；MM初治患者34例，復(fù)發(fā)、難治患者26例。另外選取健康體檢者60例為健康組，男性28例，女性32例；年齡33～69歲，平均(48.45±8.00)歲。3組性別、年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)[批準(zhǔn)號(hào)：(2019)倫審第(114)號(hào)]。

納入標(biāo)準(zhǔn)：MM感染帶狀皰疹患者符合《中國(guó)多發(fā)性骨髓瘤診治指南》[6]及《帶狀皰疹中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)》[7]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，骨髓檢查漿細(xì)胞>30%，IgG>35 g/L、IgA>20 g/L、IgM>15 g/L、IgD>2 g/L、IgE>2 g/L,出疹時(shí)間<7 d。MM患者符合《中國(guó)多發(fā)性骨髓瘤診治指南》[6]中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，骨髓涂片檢查漿細(xì)胞>30%，IgG>35 g/L、IgA>20 g/L、IgM>15 g/L、IgD>2 g/L、IgE>2 g/L，接受過(guò)含硼替佐米方案治療。健康組身體健康，無(wú)其他疾病。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有免疫系統(tǒng)障礙疾病者；②合并其他惡性腫瘤者；③潛在其他病毒感染；④帶狀皰疹的特殊類(lèi)型(出血型、泛發(fā)型、大皰型)；⑤合并血液系統(tǒng)疾病者。

1.2方法

1.2.1IFN-γ、IL-6、IL-4水平檢測(cè)方法 所有受試者采集空腹靜脈血6 mL，以離心半徑5 cm、轉(zhuǎn)速3 000 r/min離心處理10 min，分離上層血清，-80 ℃保存待檢。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)IFN-γ、IL-6、IL-4水平。IFN-γ、IL-6、IL-4ELISA試劑盒由江西艾博因生物科技有限公司提供，貨號(hào)分別為IB-E10033、IB-E10049、IB-E10051。

1.2.2嚴(yán)重程度判定 根據(jù)《帶狀皰疹中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)》[7]將帶狀皰疹分為輕度、中度、重度，從疼痛程度、水皰簇?cái)?shù)、紅斑面積、水皰變化、水皰數(shù)目5個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估，疼痛程度分值為0～4分，水皰簇?cái)?shù)分值為1～4分，紅斑面積分值為0～4分，水皰變化分值為0～4分，水皰數(shù)目分值為0～4分；<6分為輕度，6～12分為中度，>12分為重度。

1.3觀察指標(biāo) ①比較3組血清IFN-γ、IL-6、IL-4水平;②比較不同嚴(yán)重程度MM感染帶狀皰疹患者IFN-γ、IL-6、IL-4水平；③分析IFN-γ、IL-6、IL-4與MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度相關(guān)性，及IFN-γ、IL-6、IL-4之間的相關(guān)性;④分析MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度的影響因素；⑤評(píng)價(jià)IFN-γ、IL-6、IL-4對(duì)MM感染帶狀皰疹的診斷價(jià)值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析，影響因素確定采用多因素Logistic回歸分析，繪制受試者工作特征曲線(xiàn)(receiver operating characteristic curve，ROC)得到曲線(xiàn)下面積(areas under the curve，AUC)，檢驗(yàn)IFN-γ、IL-6、IL-4對(duì)MM感染帶狀皰疹的診斷價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.13組血清IFN-γ、IL-6、IL-4水平比較 MM組、MM感染帶狀皰疹組IFN-γ水平低于健康組，IL-6、IL-4水平高于健康組，MM感染帶狀皰疹組IFN-γ水平較低于MM組，IL-6、IL-4水平高于MM組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組血清IFN-γ、IL-6、IL-4水平比較Table 1 Comparison of serum levels of IFN-γ, IL-6 and IL-4 among three groups

2.2不同嚴(yán)重程度MM感染帶狀皰疹患者IFN-γ、IL-6、IL-4水平比較 隨著MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度的加重，IFN-γ降低加劇，IL-6、IL-4升高加劇。重度、中度感染帶狀皰疹患者IFN-γ水平低于輕度感染帶狀皰疹患者，IL-6、IL-4水平高于輕度感染帶狀皰疹患者；MM重度感染帶狀皰疹患者IFN-γ水平低于中度感染帶狀皰疹患者，IL-6、IL-4水平高于中度感染帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同嚴(yán)重程度MM感染帶狀皰疹患者IFN-γ、IL-6、IL-4水平比較Table 2 Comparison of IFN -γ, IL-6 and IL-4 in MM patients with herpes zoster infection of different severity

2.3IFN-γ、IL-6、IL-4與MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度相關(guān)性分析 IFN-γ與MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，IL-6、IL-4與MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 IFN-γ、IL-6、IL-4與MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度相關(guān)性分析Table 3 Correlation analysis of IFN-γ, IL-6, IL-4 with the severity of MM complicated with herpes zoster infection

2.4MM感染帶狀皰疹嚴(yán)重程度的影響因素分析 以MM感染帶狀皰疹(否=0；是=1)為因變量，以IFN-γ(連續(xù)變量)、IL-6(連續(xù)變量)、IL-4(連續(xù)變量)為自變量，進(jìn)行Logistic回歸模型分析，結(jié)果顯示，IFN-γ、IL-6、IL-4是MM感染帶狀皰疹的危險(xiǎn)因素。見(jiàn)表4。

表4 Logistic回歸分析結(jié)果Table 4 Results of Logistic regression analysis

2.5IFN-γ、IL-6、IL-4之間相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析顯示(圖1)，IFN-γ與IL-6呈負(fù)相關(guān)(r=-0.632，P=0.001)；IFN-γ與IL-4呈負(fù)相關(guān)(r=-0.597，P=0.001)；IL-6與IL-4呈正相關(guān)(r=0.680，P=0.001)。

圖1 IFN-γ、IL-6、IL-4之間相關(guān)性分析Figure 1 Correlation analysis of IFN-γ, IL-6 and IL-4

2.6IFN-γ、IL-6、IL-4對(duì)MM感染帶狀皰疹的診斷價(jià)值 以正確診斷指數(shù)最大對(duì)應(yīng)的IFN-γ、IL-6、IL-4值作為最佳診斷分界點(diǎn)。ROC曲線(xiàn)顯示(圖2)，三項(xiàng)聯(lián)合對(duì)MM感染帶狀皰疹的診斷價(jià)值高于IFN-γ、IL-6、IL-4單項(xiàng)診斷(P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5 ROC曲線(xiàn)分析IFN-γ、IL-6、IL-4對(duì)MM感染帶狀皰疹的診斷價(jià)值Table 5 ROC curve analysis of the diagnostic value of IFN-γ, IL-6, and IL-4 for MM complicated with herpes zoster infection

圖2 IFN-γ、IL-6、IL-4診斷MM感染帶狀皰疹的ROC曲線(xiàn)分析Figure 2 ROC curve analysis of IFN-γ, IL-6, IL-4 in the diagnosis of MM complicated with with herpes zoster infection

3 討 論

MM是由克隆漿細(xì)胞惡性增殖、異常聚集所引發(fā)的血液腫瘤的一種，其發(fā)病人群以老年人為主[8-9]。含硼替佐米方案是目前臨床常用于治療MM的手段，硼替佐米作為蛋白酶抑制劑可有效抑制骨髓瘤細(xì)胞中的蛋白酶體，進(jìn)而達(dá)到抑制骨髓瘤細(xì)胞增殖的作用，但硼替佐米在抑制骨髓瘤細(xì)胞增殖的同時(shí)可能造成感染帶狀皰疹、白細(xì)胞減少、非感染性發(fā)熱、周?chē)窠?jīng)病變等不良反應(yīng)的發(fā)生，其中以感染帶狀皰疹為主[10-12]。

IFN-γ屬于Th1類(lèi)細(xì)胞，對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬及消化原蟲(chóng)和細(xì)菌能力具有增強(qiáng)作用，因硼替佐米的應(yīng)用導(dǎo)致IFN-γ分泌被抑制，使得IFN-γ表達(dá)下降，導(dǎo)致MM患者體內(nèi)潛在帶狀皰疹病毒因免疫功能異常，同時(shí)不能被IFN-γ及時(shí)清理而大量繁殖，進(jìn)而引發(fā)MM患者感染帶狀皰疹[13-14]。本研究結(jié)果顯示，隨著MM感染帶狀皰疹病情加重，IFN-γ水平的降低，導(dǎo)致其清理作用減弱，與楊晶晶等[15]研究結(jié)果一致。IFN-γ可通過(guò)對(duì)抗病毒蛋白的產(chǎn)生起到促進(jìn)作用，在病毒進(jìn)入、翻譯、組裝、脫殼等階段協(xié)助機(jī)體對(duì)抗病毒感染。同時(shí)IFN-γ低表達(dá)導(dǎo)致其對(duì)骨髓瘤增殖的抑制作用減弱，加重了患者的免疫功能異常，進(jìn)而使得MM感染帶狀皰疹患者病情加重。

IL-6是由骨髓基質(zhì)細(xì)胞及骨髓瘤細(xì)胞自身分泌出的骨髓瘤細(xì)胞主要生長(zhǎng)因子，可介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答及組織損傷，使得炎癥反應(yīng)加重，IL-6在MM感染帶狀皰疹患者中性粒細(xì)胞于炎癥損傷部位所聚集，導(dǎo)致大量炎癥介質(zhì)釋放，使得患者炎癥損傷加重，同時(shí)可對(duì)細(xì)胞的分化進(jìn)行調(diào)節(jié)，使得細(xì)胞通透性增強(qiáng)，促進(jìn)了炎性滲出，進(jìn)而促進(jìn)了MM感染帶狀皰疹患者病情的發(fā)展[16-17]。本研究結(jié)果顯示，隨著病情嚴(yán)重程度的加重IL-6水平上升，表明IL-6可促進(jìn)疾病的發(fā)展，與陳金芳等[18]研究結(jié)果一致。IL-6作為機(jī)體炎性因子可促進(jìn)帶狀皰疹的發(fā)展，同時(shí)IL-6可對(duì)帶狀皰疹發(fā)展中神經(jīng)元的興奮進(jìn)行刺激，使得MM感染帶狀皰疹患者出現(xiàn)疼痛癥狀。

IL-4在炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，表達(dá)升高，促進(jìn)了血液、淋巴循環(huán)中的炎癥細(xì)胞溢出血管，IL-4以炎癥中心向外移動(dòng)，在病變組織及其周?chē)e聚，促進(jìn)炎性因子的進(jìn)一步釋放，使得炎癥反應(yīng)進(jìn)一步加重，導(dǎo)致組織損傷的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，隨MM感染帶狀皰疹患者病情加重IL-4水平上升。IL-4屬于Th2型因子，IL-4高水平表達(dá)可導(dǎo)致Th1/Th2失衡，進(jìn)而造成異常免疫應(yīng)答的出現(xiàn)，促進(jìn)了MM感染帶狀皰疹的發(fā)生與發(fā)展。

雖然證實(shí)了IFN-γ、IL-6、IL-4和MM感染帶狀皰疹的關(guān)系，但本文樣本量過(guò)少，存在一定的局限性，因此還需后續(xù)研究大樣本、高質(zhì)量、多中心的分析IFN-γ、IL-6、IL-4的具體作用機(jī)制，造福于更多的患者。

綜上所述，IFN-γ在MM感染帶狀皰疹中低表達(dá)，IL-6、IL-4要MM感染帶狀皰疹中高表達(dá)，隨著疾病的發(fā)展，IFN-γ表達(dá)降低加劇，IL-6、IL-4表達(dá)升高加劇，臨床可根據(jù)上述指標(biāo)對(duì)MM感染帶狀皰疹病情嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估。