徐國棟

（天津市動物疫病預(yù)防控制中心，天津 300402）

對國內(nèi)牛群中犬新孢子蟲（Neospora Canium）感染的調(diào)查文獻進行了匯總?，F(xiàn)報告如下：

1 匯總方法

查閱2021年以前國內(nèi)牛犬新孢子蟲感染相關(guān)文獻，剔除檢測數(shù)據(jù)重復(fù)的文獻。當(dāng)同一文獻中采用不同方法檢測同一批樣品時，取靈敏度或陽性率較高的結(jié)果錄入。按時間順序依次錄入被檢樣品相關(guān)信息，包括采樣時間、樣品來源省（市、自治區(qū)）、檢測方法、樣品種類、目的基因（或擴增的核苷酸序列）、陽性率等。用Microsoft Office Excel工作表對原始數(shù)據(jù)進行匯總分析。

2 調(diào)查匯總結(jié)果

2．1 血清學(xué)檢測數(shù)據(jù)匯總結(jié)果

血清學(xué)檢測數(shù)據(jù)的匯總結(jié)果見表1。其中采樣時間欄中上標(biāo)“*”的，指因文獻未載具體采樣時間，則假定以投稿或發(fā)表時間為采樣時間；采樣地點（省、直轄市或自治區(qū)）欄中，內(nèi)蒙古自治區(qū)以“蒙”作為簡寫；檢測方法中，T1代指酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），T2代指間接免疫熒光抗體試驗（IFAT）；樣品種類欄中，S1代指收集自不能確定是否存在癥狀牛（牛、牦牛、奶牛、黃牛、肉牛等）的血清，S2代指收集自有流產(chǎn)癥狀母牛的血清，S3代指收集自未發(fā)生流產(chǎn)母牛的血清。

表1 牛群中犬新孢子蟲血清學(xué)檢測結(jié)果原始匯總表

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：（1）共有18篇文獻可供參考。（2）共整理得到38條信息。（3）采樣時間跨度自2001～2019年，不能得到多數(shù)樣品的真實采樣時間（71.05%，27/38），且即便以之為自然年份來確定時間節(jié)點，仍存在時間節(jié)點不連續(xù)以及自然年份連續(xù)不可分等情況，因此，不能從“時間節(jié)點-陽性率”關(guān)系中得到國內(nèi)牛群中犬新孢子蟲感染的真實時間順序相關(guān)性。（4）調(diào)查者使用ELISA法檢測的頻次較高（89.47%，34/38）。（5）共檢測7679份血清、血清陽性率在0%～36.67%、累計匯總的平均陽性率為15.61%（1199/7679）。（6）調(diào)查的14個省（自治區(qū)、直轄市）頻次依次是吉*12、新*9、黑*3、冀*2、京*2、魯*2、川*1、桂*1、津*1、晉*1、內(nèi)蒙古*1、青*1、豫*1、粵*1，其中自吉林、新疆、黑龍江三地累計采樣量分別為3405份、2974份、510份，總量占全部血清樣品總數(shù)的89.71%（6889/7679），因此，全部數(shù)據(jù)分析結(jié)果更能反映出三地牛群中犬新孢子蟲實際感染狀況。（7）在假定其他因素同質(zhì)的背景下，可以分別對“樣品種類”相關(guān)血清學(xué)檢測結(jié)果進行累加，其后進行兩兩差異比較（卡方檢驗），可以得到χ2（S1-S2）＝0.233、χ2（S1-S3）＝0.111、χ2（S2-S3）＝0.947，根據(jù)Excel函數(shù)“CHIDIST＝（χ2，1）”，分別得到P（S1-S2）＝0.629、P（S1-S3）＝0.111、P（S2-S3）＝1，即牛群中犬新孢子蟲血清學(xué)陽性樣品的檢出，與是否出現(xiàn)臨床癥狀無關(guān)。

2．2 核酸檢測數(shù)據(jù)匯總結(jié)果

核酸檢測數(shù)據(jù)的匯總結(jié)果見表2。其中采樣時間欄標(biāo)記“*”的，指因文獻未載具體采樣時間，則假定以投稿時間（或發(fā)表時間）為采樣時間；檢測方法中，t1代指PCR方法，t2代指基因芯片技術(shù)；所檢測目的基因（核苷酸序列）欄中，g1代指蟲體Nc-5基因，g2代指NcSAG1基因、Nc5基因和NcSRS2基因；樣品種類欄中：s1代指犬新孢子蟲血清抗體陽性流產(chǎn)母牛的糞便，s2代指流產(chǎn)的胎牛腦、脊髓組織，s3代指流產(chǎn)母牛的血樣或全血，s4代指流產(chǎn)胎兒的組織，s5代指?？鼓土鳟a(chǎn)胎兒組織。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：（1）共有7篇文獻可供參考。（2）共整理得到9條信息。（3）采樣時間跨度自2004～2019年，類似于血清學(xué)檢測結(jié)果的匯總情況，不能從“時間節(jié)點（自然年份）-陽性率”關(guān)系中得到國內(nèi)牛群犬新孢子蟲感染的真實時間順序相關(guān)規(guī)律性。（4）調(diào)查者采用PCR法檢測的頻次較高（88.89%，8/9）。（5）共檢測了640份血清，分別為血清學(xué)陽性或有癥狀病牛的組織，調(diào)查的檢出率在5.00%～19.61%，累計匯總的平均陽性率為9.84%（63/640）。

表2 牛群中犬新孢子蟲核酸檢測結(jié)果原始匯總表

3 討論

從樣品陽性率區(qū)間的高限、總體平均陽性率來看，血清學(xué)檢測結(jié)果均高于核酸檢測結(jié)果，且核酸檢測樣品均源于發(fā)病牛的組織，兩者的陽性結(jié)果仍存在很大差別，可能存在的原因包括：（1）兩者對比的數(shù)據(jù)為累積結(jié)果，現(xiàn)實中存在如采樣時間跨度較大等諸多異質(zhì)性因素；（2）牛感染犬新孢子蟲后并不一定造成流產(chǎn)，還有其它造成牛流產(chǎn)的原因；（3）組織嗜性不同，機體組織中蟲體核酸含量不同，取樣的目標(biāo)造成檢出率較低；（4）病程不同，“寄生蟲-機體”互作機制導(dǎo)致組織中蟲體核酸含量有差異，同時在持續(xù)感染狀態(tài)下，血清抗體存在時間較長，而組織中蟲體清除率高，其核酸含量低于檢測敏感度；（5）或許存在導(dǎo)致血清抗體陽性率、組織核酸含量不呈線性相關(guān)的特殊免疫學(xué)機制。

三類牛（不能確定是否存在癥狀牛、有流產(chǎn)癥狀母牛、未發(fā)生流產(chǎn)癥狀母牛）的血清學(xué)檢測結(jié)果分別累加后分析，統(tǒng)計學(xué)差異不顯著，應(yīng)考慮：統(tǒng)計檢驗是在假設(shè)除“樣品種類”外，其它因素同質(zhì)的背景下進行的，而實際情況并非如此，即本文所用的統(tǒng)計學(xué)方法沒有意義。相反，若結(jié)果確實具有統(tǒng)計意義，則在現(xiàn)實養(yǎng)殖生產(chǎn)中，還應(yīng)綜合考慮血清抗體滴度、蟲體感染強度、其它致病因素、協(xié)同致病因素（如飼養(yǎng)管理環(huán)境、氣候、營養(yǎng)狀態(tài)等）等互作對牛繁殖障礙的綜合效應(yīng)。