貴有軍 郝俊暉 王啟果 羅勇軍 木尼熱·木合買提 卡斯木江·玉素甫 李博 王誠 王效俊

（新疆維吾爾自治區(qū)疾病預防控制中心 830002）

鼠疫是由鼠疫耶爾森氏菌（Yersinia Pestis）引起的廣泛流行于野生嚙齒動物間的一種以鼠、蚤傳播為主的自然疫源性疾病，以發(fā)病急、傳播快、病死率高、傳染性強為主要特征，是《中華人民共和國傳染病防治法》 規(guī)定的甲類傳染病[1]。鼠疫血清學檢驗具有快速、敏感、特異性高、成本低、操作簡便實用等特點，同時對實驗室設備和人員水平要求較低，適合基層開展規(guī)模檢測[2]，在流行病學調查、常規(guī)監(jiān)測、腐敗材料檢驗、鼠疫快速檢驗和追溯診斷等方面有非常重要的作用。為提高全區(qū)鼠疫血清學檢測水平，建立一套行之有效的質量管理體系，確保檢測結果的科學性和準確性，2021 年7 月在全區(qū)13個鼠疫監(jiān)測實驗室開展室間質量控制，對檢驗工作進行全面分析，并作質控結果評價。

1 材料與方法

1.1 質控項目

間接血凝試驗（IHA）和反向間接血凝試驗（RIHA）。

1.2 質控材料制備

將鼠疫F1 抗體（抗原）間接血凝診斷試劑中陽性血清和菌體制劑分別按一定比例稀釋，充分混勻后分裝于離心管中，置于4℃冰箱中冷藏。各質控樣本每天檢測1 次，觀察記錄結果，連續(xù)測試5 次，已出現最多次數的滴度作為該批質控血清的標準滴度。試劑盒由蘭州生物制品研究所有限責任公司生產，均在有效期內使用。

1.3 質控方法

將質控樣本分裝于Eppendorf（1ml）管中分發(fā)到各考核點，統(tǒng)一時間進行檢測并報告結果。質控樣本的操作按照《新疆鼠疫防治手冊》 和試劑盒說明書進行。判定標準：鼠疫IHA 和RIHA 結果判定以反應強度(++) 為陽性反應界限，出現陽性反應的最高稀釋度作為該血清的陽性滴度。

1.4 結果評定標準

質控樣本檢測滴度與“標準滴度”比較相差不超過±1 個稀釋滴度，視為質控合格，超過則判定為不合格。

2 結果

2.1 鼠疫血清學檢測質控結果

由附表可知，2021 年7 月開展鼠疫血清學檢驗室間質控發(fā)放質控樣本共26 份，質控實驗室13 個，IHA 和RIHA 室間質控樣本標準滴度均為1:256，經對檢驗結果全面分析和質控評價，質控總合格率為80.76%，IHA 的合格率為84.62%，RIHA的合格率為76.92%。表明全區(qū)鼠疫監(jiān)測點基本具備鼠疫血清學檢驗能力，檢驗結果基本能反映監(jiān)測地區(qū)的客觀事實。

附表 2021 年新疆鼠疫血清學檢驗室間質控結果

2.2 質控結果影響因素分析

2.2.1 檢測人員實操能力

質控結果顯示，由于檢測人員操作不當、理論基礎差或工作崗位調整等原因，導致實驗操作和結果判定存在誤差，致使質控結果不合格。此類因素質控不合格頻率較高，有2 個實驗室3 次質控不合格，占質控不合格次數的60%。

2.2.2 儀器設備及試劑材料

質控結果顯示，由于儀器設備選擇或使用不當，導致1 個實驗室1 次質控不合格，此類因素占不合次數20%。由于試劑配制、保存不規(guī)范，導致1 個實驗室1 次質控不合格，此類因素占不合次數20%。

3 討論

20 世紀70、80 年代，新疆鼠防專業(yè)隊伍曾是全國最強的陣容之一，但隨著鼠疫防控老專家相繼退休，出現鼠防人才斷層，隊伍不穩(wěn)的局面，很多醫(yī)學專業(yè)畢業(yè)生不愿投身到這種條件艱苦、經常出野外的鼠疫防控事業(yè)中來[3]。多數基層疾病預防控制中心編制短缺，專業(yè)技術人員承擔多病種防治任務，單病種檢測規(guī)范化操作水平較低，專門從事鼠疫防控工作的人員更少，加之新入職和頻繁轉崗的人員缺乏專業(yè)知識培訓[4]，造成目前新疆鼠疫防控專業(yè)能力和技術水平不高的局面。

專業(yè)人員理論基礎和實操水平對整個實驗起關鍵主導作用。實驗人員要掌握專業(yè)理論知識，經專業(yè)培訓可熟練操作后持證上崗。實驗人員因自身經驗不足會影響試驗結果的準確性，如在倍比稀釋過程中，移液量不準確、移液器吹打力度或次數不同，均會造成稀釋滴度不準確；檢測人員對檢測原理、流程不熟悉、操作不規(guī)范，極易造成試劑或樣本交叉污染而導致整個試驗的失敗，如在使用移液器滴加陽性參考、F1 抗原（抗體）血球時，吸頭不小心接觸到反應孔（此時孔內已有稀釋液、血清、抗原等），又沒有及時更換吸頭，會造成試劑和各孔內液體交叉污染；實驗人員因專業(yè)理論掌握不扎實、責任性不強、樣本或試劑保存不規(guī)范等原因，會造成整批樣本腐敗或試劑失效，如在現場指導培訓時發(fā)現，有人將樣本和試劑一起長期在4℃冰箱中冷藏存放導致樣本腐敗；試驗人員（尤其是有最終復判權和出具報告的省級疾控監(jiān)測人員）要充分了解儀器檢測原理和性能，對實驗結果具有一定的分析能力，否則，即便是完全按照操作步驟進行試驗，當遇到復雜樣品或出現異?，F象時也不一定能得出準確可靠的結果[5]。

實驗室質量控制是為了排除誤差，保證檢驗結果實事求，它包括室內質控(IQC) 和室間質控(EQA)，且參與EQA 的實驗室應首先做好IQC[6]。隨著鼠疫監(jiān)測關口前移和監(jiān)測點標準化建設的不斷推進，提高鼠疫監(jiān)測質量成為監(jiān)測工作的重要內容，自治區(qū)疾控中心作為全區(qū)鼠疫監(jiān)測技術指導和復判機構，對全區(qū)監(jiān)測工作質量起督促與指導作用，在日常工作中應加強對地、縣級鼠防機構的現場指導和培訓力度，對IQC 人員進行組織管理、儀器設備（檢測儀應在校準）、取材運輸、試劑盒質控、檢驗程序、結果判定、風險評估及疫情報告等的培訓；對EQA 過程中涉及的樣本制備、專技培訓及結果分析等要做到認真負責；分析質控中發(fā)現問題的原因，提出解決辦法，再次進行考核，直至合格；對室間質控工作中出現的薄弱環(huán)節(jié)及時提出改進措施。為確保檢測質量，完善體制，建立長效機制，每年監(jiān)測工作開始前應對鼠防點實驗室進行儀器設備校準和質控考核，通過發(fā)現、分析和解決問題，使各實驗室檢驗工作都能達到質控要求，保檢測結果準確、可靠[7]。