遲韻陽,付宇新,2,曹 冰,2,賀義昌,王召瀅,龔 嵐,曾凡新,雷小林,左繼林
(1. 江西省林業(yè)科學院,江西 南昌 330013;2. 江西農(nóng)業(yè)大學 a. 林學院;b. 江西省森林培育重點實驗室,江西 南昌 330045)
油茶Camellia oleifera是我國重要的木本油料植物,廣泛種植于我國17 個?。▍^(qū))的1 100 多個縣(市)。我國是世界上山茶科植物分布最廣的國家[1]。油茶的主要產(chǎn)品茶油(以油茶種子為材料榨出的油),是一種天然的優(yōu)質(zhì)保健食用油,與棕櫚油、橄欖油和椰子油并稱為世界四大木本植物油[2-3]。茶油的成分主要包括脂肪酸、維生素、山茶苷和茶多酚等,其中脂肪酸的質(zhì)量分數(shù)約為75%,主要包括油酸、亞油酸、亞麻酸等不飽和脂肪酸及棕櫚酸、花生酸等飽和脂肪酸[4-9]。
茶油的用途非常廣泛,尤其對人體具有較好的保健功效。據(jù)報道,茶油具有預防心血管疾病、減少血液中的膽固醇、提高免疫力、抑制腫瘤、抗炎等多種作用[4,10-14];Lee 等[15]報道,茶油可使肝臟免受CCl4引起的氧化損傷;Cheng 等[16]的研究結果表明,茶油對于酮洛芬引起的胃腸道損傷具有強烈的抑制作用。此外,茶油易于儲存,色清味香,是聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織重點推廣的保健型食用油[17]。目前,關于茶油的研究主要集中于環(huán)境因素和加工工藝對茶油品質(zhì)的影響。王彥花等[18]的研究結果表明,立地因素是影響油茶果經(jīng)濟性狀及脂肪酸組成的重要因素;賀義昌等[19]對江西省不同產(chǎn)地茶油的活性成分進行了研究,結果表明永新縣、新建區(qū)、石城縣等7 個地域的茶油活性成分較優(yōu);Wu 等[20]使用不同干燥方法處理油茶籽,并對所提取茶油品質(zhì)進行研究,結果表明以自然光照曬干的油茶籽榨取的茶油品質(zhì)最高。有關不同氣象因子條件下油茶品質(zhì)的研究鮮有報道。
江西省為我國第二大油茶主產(chǎn)區(qū),地處我國東南部,屬亞熱帶季風性濕潤氣候,年度間平均降水量及溫度均存在差異,使得油茶的生長發(fā)育和結實受到影響。為給油茶品種篩選及良種推廣提供參考,本研究中對2018、2019 年不同品種油茶果實的表型性狀、經(jīng)濟性狀進行分析,并對不同品種茶油的脂肪酸組成進行分析,探究氣象因子對不同品種油茶果實性狀和茶油品質(zhì)的影響。
2018 年11 月和2019 年11 月在江西省林業(yè)科學院油茶良種基地進行果實采樣,采集品種包括長林系列(3 號、4 號、18 號、40 號、53 號),贛石系列(83-4 號、84-8 號),贛無系列(1 號、2 號),贛興48 號。樹齡10 a 左右,常規(guī)管理。
脂肪酸甲酯標準品為分析純,上海安譜實驗科技股份有限公司生產(chǎn);石油醚(60 ~90 ℃)、甲醇鈉-甲醇溶液、草酸-乙酸甲酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯均為分析純,上海國藥集團化學試劑有限公司生產(chǎn);乙腈、超純水為默克化工技術有限公司生產(chǎn)。
GC-2010Plus AF 氣相色譜儀為日本島津公司生產(chǎn),ME104E 電子天平為梅特勒-托利多國際貿(mào)易(上海)有限公司生產(chǎn),PD-151 游標卡尺為寶工實業(yè)股份有限公司生產(chǎn),電熱鼓風干燥箱為上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn),RE5298A 旋轉蒸發(fā)儀為上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn),HH-S6 電熱恒溫水浴鍋為金壇市恒豐儀器廠生產(chǎn)。
1.3.1 果實性狀指標
隨機選取20 個完整的果實,分別用1/1 000電子天平稱量單果質(zhì)量。觀察果實的果皮顏色(用青、紅、褐色、黃棕來描述),形狀(用球形、桃形、梨形、橄欖形、卵形、橘形來描述)和果皮光滑度(用光滑、糠皮、凹凸來描述)[21]。使用分辨率為0.01 mm 的游標卡尺測量其橫徑、縱徑,并計算果形指數(shù)(縱徑/橫徑)。將果皮剝開,使用游標卡尺測量果皮中部的厚度。將油茶籽取出,直接觀察其顏色(用黑色、棕褐色和褐色描述)和形狀(用球形、半球形、錐形、似腎形和不規(guī)則形描述)。采用直接計數(shù)法統(tǒng)計各油茶果實中油茶籽的數(shù)量。
1.3.2 干籽含油率
采用索氏提取法提取茶油。首先,稱取均勻試樣5 g,移入濾紙筒中,將濾紙筒放入提取管內(nèi),連接冷凝管和圓底燒瓶,加100 mL 石油醚至圓底燒瓶中,在85 ℃水浴鍋中加熱回流6 ~8 h;隨后取出濾紙筒,取下圓底燒瓶,回收石油醚;最后,將濾紙筒和圓底燒瓶在100 ~105 ℃烘箱中烘干2 h,直至連續(xù)2 次稱量結果相差不超過0.001 0 g為止。計算干籽含油率(ω):
式中:m1為油的質(zhì)量;m0為油茶干籽質(zhì)量。
1.3.3 茶油脂肪酸組分
樣品甲酯化參考陳小露等[13]、鄧龍等[22]的方法。色譜條件:色譜柱為CD-2560(100 m×0.25 mm×0.2 μm),檢測器為FID(氫火焰檢測器),檢測器溫度260 ℃,進樣口溫度250 ℃,載氣流速1.0 mL/min,分流比30∶1。程序升溫:140 ℃,保留5 min;4 ℃/min 升溫至240 ℃,保留30 min。
使用Excel 2019 軟件進行數(shù)據(jù)整理。使用SPSS 22.0 軟件對數(shù)據(jù)進行相關性分析,使用MATALB R2016a 軟件進行主成分分析。
采樣地屬亞熱帶季風性濕潤氣候,2018—2019 年采樣地氣象因子的變化情況如圖1 所示。由圖1 可見,2019 年總降水量較2018 年多247.10 mm,且降水主要集中在2—7 月,8—10月降水量驟減,90 d 內(nèi)僅9 d 降水,降水量僅為72.1 mm。
圖1 2018—2019年采樣地氣象因子的變化情況Fig. 1 Changes of meteorological factors at sampling sites from 2018 to 2019
對10 個品種的油茶果實表型性狀進行觀測比較,結果見表1。由表1 可知,2018 和2019 年果實表型性狀差異較大。2018 年收獲的油茶果實以球形居多,其次是橘形、桃形,且多數(shù)品種包含2種以上果形;果皮顏色以青色為主,除長林53 號為單色果實,其余均為2 種以上顏色;果面除贛無2 號有糠皮面,其余均是光滑面;種子形狀以錐形和半球形為主,少數(shù)種子為似腎形和球形,僅在長林18 號發(fā)現(xiàn)不規(guī)則形狀種子;種皮顏色除長林53 號為棕褐色,其余種皮顏色均表現(xiàn)為褐色和黑色。2019 年收獲的油茶果實以球形居多,少數(shù)果形表現(xiàn)為梨形和橄欖形;果皮顏色以單色(青色)為主,少數(shù)品種果皮還存在紅色,僅贛無2號表現(xiàn)為黃棕色;果面均表現(xiàn)為光滑面;種子形狀以錐形為主,僅在長林4 號發(fā)現(xiàn)不規(guī)則形狀種子;種皮顏色以棕褐色和黑色為主??傮w來說,2019 年果實的表型豐富度較2018 年低,這可能是由于2019 年2—7 月頻繁降雨,降雨日達104 d,降水量1 622.806 mm,比2018 年同期分別多27 d和557.002 mm,該時期為油茶果實第1 次膨大期和膨大高峰期,洪澇脅迫下果實表型豐富度降低。在10 個品種中,贛無2 號的表型豐富度最優(yōu),長林3 號、18 號和40 號次之。
表1 不同品種油茶果實表型性狀的比較?Table 1 Comparison of fruit and seed phenotypic traits of different C. oleifera cultivars
對10 個品種的油茶果實經(jīng)濟性狀進行測定比較,結果見表2。由表2 可知:2018 年收獲的油茶果實單果質(zhì)量為13.21 ~31.72 g,縱徑為28.43 ~40.85 mm,橫徑為26.87 ~38.59 mm,果形指數(shù)為0.96 ~1.30,果皮厚為1.97 ~4.02 mm,單果籽數(shù)量為2.95 ~6.75,干籽含油率為26.40%~44.20%;2019 年收獲的油茶果實單果質(zhì)量為9.60 ~25.00 g,縱徑為27.11 ~40.12 mm,橫徑為23.89 ~33.86 mm,果形指數(shù)為1.02 ~1.28,果皮厚為2.29 ~3.56 mm,單果籽數(shù)量為2.30 ~6.60,干籽含油率為28.18%~38.44%。2019 年2—7 月出現(xiàn)強降雨,8—10 月出現(xiàn)干旱天氣,這3 個月的降雨日和降水量比2018 年同期分別減少22 d和217.17 mm。2—7 月為油茶果實膨大期,8—10月為油茶油脂轉化期,干旱脅迫下2019 年油茶果實的經(jīng)濟性狀較2018 年差,油茶結出的果實普遍偏小且干籽含油率偏低。2019 年油茶的干籽含油率雖存在大幅下降,干籽含油率均低于40%,但贛無2 號和贛興48 號仍具有較高的干籽含油率,分別達到38.44%和36.94%,說明這2 個品種油茶的抗水澇、抗干旱脅迫能力較其他品種強。此外,在2018 年雨水光照充足的情況下,贛無1 號的干籽含油率最高,長林4 號、長林40 號、贛無2 號、贛石83-4 號和贛興48 號次之。
表2 不同品種油茶果實經(jīng)濟性狀的比較?Table 2 Comparison of fruit economic traits of different C. oleifera cultivars
對10 個品種的油茶果實經(jīng)濟性狀指標進行相關性分析,結果見表3。由表3 可知:單果質(zhì)量與縱徑、橫徑和單果籽數(shù)量存在極顯著或顯著正相關關系,其中單果質(zhì)量與縱徑和橫徑的相關系數(shù)分別達到0.763 和0.976,單果質(zhì)量與果形指數(shù)存在顯著負相關關系;縱徑與橫徑和單果籽數(shù)量分別存在極顯著和顯著正相關關系;橫徑與果形指數(shù)存在極顯著負相關關系,與單果籽數(shù)量呈現(xiàn)顯著正相關關系。綜合單果質(zhì)量、縱徑和橫徑這3 個指標來看,單果質(zhì)量是最重要的指標,與其他4個性狀指標顯著相關,可以利用單果質(zhì)量對橫徑進行預測。果形指數(shù)與果皮厚存在極顯著負相關關系,單果籽數(shù)量與干籽含油率存在顯著負相關關系,這說明在一般情況下,同樣大小的果實中,單果籽數(shù)量越多,種子越不飽滿,干籽含油率越低。因此在生產(chǎn)實踐中,可以根據(jù)油茶單果籽數(shù)量對干籽含油率進行初步評價,并作為選育油茶優(yōu)良品種的一個重要的參考性狀[21]。
表3 油茶果實經(jīng)濟性狀指標間的相關系數(shù)?Table 3 Correlation analysis of economic indicators of C. oleifera fruit
對10 個品種的茶油脂肪酸組成進行測定,結果見表4。由表4 可知,在2018 和2019 年,從不同品種茶油的樣品中分別檢測出17、14 種脂肪酸,包括肉桂酸、十五烷酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、十七烷酸、十七碳烯酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、花生酸、花生烯酸、二十一烷酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、神經(jīng)酸、二十二碳二烯酸、二十四烷酸和二十四碳烯酸。2018 和2019 年茶油中的不飽和脂肪酸含量分別占總脂肪酸含量的82.24%~90.36%和87.45%~90.85%,不飽和脂肪酸含量均達到較高的水平,具有較高的營養(yǎng)價值。此結果與葉敏倩等[23]、Yang 等[24]報道的含量相近。此外,在2019 年從不同品種的茶油樣品中均檢測出的神經(jīng)酸,在2018 年未檢出,在2018 年檢測出的十五烷酸、二十一烷酸、二十碳二烯酸和二十碳三烯酸,2019 年未檢測到,總體上2018 年茶油樣品的脂肪酸組成更為豐富。2019年茶油中油酸含量普遍低于2018 年,但2019 年贛無2 號和贛石84-8 號茶油中油酸質(zhì)量分數(shù)仍分別達到83.243%和81.987%,且與其他品種相比不飽和脂肪酸總量也呈現(xiàn)較高的水平。綜上所述,2019 年的強降雨和干旱極端條件雖對茶油脂肪酸組成產(chǎn)生一定的影響,但對贛無2 號和贛石84-8號茶油脂肪酸組成的影響較小,這2 個品種抵御水澇、干旱脅迫能力較強。
表4 不同品種茶油中各脂肪酸組分的質(zhì)量分數(shù)?Table 4 Mass fraction of seed oil fatty acid composition of different C. oleifera cultivars %
對2018、2019 年茶油脂肪酸及干籽含油率進行主成分分析,結果如圖2 所示。由圖2 可見,第1 主成分(PC1)、第2 主成分(PC2)分別代表變量總方差的52.8%、15.8%,累計貢獻率達68.6%,這2 個主成分中包含了被分析樣本的絕大部分信息。由圖2 可見,2018 和2019 年茶油脂肪酸組成之間可以較好地區(qū)分,2019 年脂肪酸區(qū)分在左邊,2018 年區(qū)分在右邊。結果表明,2018 和2019 年茶油脂肪酸及干籽含油率之間存在明顯的差異。
圖2 不同年份茶油脂肪酸及干籽含油率的主成分得分Fig. 2 Score plots of C. oleifera seed oil fatty acid and dry seed oil content in different years by principal component analysis
2019 年試驗地出現(xiàn)極端氣候,上半年降水量急劇增多,下半年少雨持續(xù)干旱,導致該年度油茶果實表型性狀、經(jīng)濟性狀和脂肪酸組成均不如2018 年,但贛無2 號和贛石84-8 號均有穩(wěn)定的優(yōu)良表現(xiàn),抵御水澇、干旱脅迫能力均較為突出,建議作為優(yōu)良品種培育、推廣。
油茶的生長發(fā)育、果實經(jīng)濟性狀及茶油品質(zhì)受多項氣象因子的影響,其中水分是關鍵因子之一。在果實快速生長期,油茶對土壤水分需求量大,反應敏感,土壤含水量條件的微小差異有可能導致油茶果實生長性狀出現(xiàn)分異[25-26]。本研究結果顯示,2018 年油茶果實表型性狀的豐富度優(yōu)于2019 年,其中贛無2 號的表型豐富度最優(yōu),果形為桃形和球形,果皮顏色為青色、黃棕色和褐色,果面為光滑面和糠皮面,種子形狀為球形、半球形和錐形,種皮顏色為黑色,長林3 號、長林18號和長林40 號的果實表型性狀豐富度次之。
關于油茶素有“七干球,八干油”的說法。若7 月干旱,則影響果實生長,導致油茶果長不大,產(chǎn)量下降;若8 月干旱,則影響油脂轉化,導致油茶果含油率下降[26-31]。在本研究中,干旱對油茶果的含油率產(chǎn)生較大影響,各品種的干籽含油率均低于40%,但在雙重脅迫下,贛無2 號和贛興48 號仍具有較高的干籽含油率。此外,在雨水光照充足的情況下,贛無1 號干籽含油率最高,長林4 號、長林40 號、贛無2 號、贛石83-4 號和贛興48 號次之。除了油茶果實經(jīng)濟性狀因氣象條件不同而發(fā)生變化,茶油脂肪酸組成也會因氣象因子的影響產(chǎn)生差異[32-33]。在2019 年從各品種的茶油樣品中均檢測出的神經(jīng)酸,在2018 年并未檢出,而在2018 年檢測出的十五烷酸、二十一烷酸、二十碳二烯酸和二十碳三烯酸,在2019 年并未檢測到,總體上2018 年茶油的脂肪酸組成更為豐富。有研究結果表明,每年的7—8 月是油茶果實膨大高峰期和油脂轉化積累高峰期[30],降水量是影響油茶油酸含量的重要氣象因子。張乃燕等[33]在分析氣候因子對油茶脂肪酸的影響時,發(fā)現(xiàn)年均降水量的增加有利于油酸的積累。本研究中2019 年茶油的油酸含量普遍低于2018 年,這與前人的研究結果基本一致[34-36],但2019 年贛無2 號和贛石84-8 號茶油的油酸質(zhì)量分數(shù)仍分別達到83.243%和81.987%,且不飽和脂肪酸總量與其他品種相比呈現(xiàn)較高水平。
本研究中試驗區(qū)未設置獲取小環(huán)境氣象因子數(shù)據(jù)的自動氣象站,氣象因子數(shù)據(jù)來自天氣網(wǎng)站,且提取的氣象因子數(shù)量有限,存在一定的局限性。后續(xù)將對氣象因子和油茶生長發(fā)育指標進行關聯(lián)分析,提取關鍵因子,建立評價模型,篩選適應性好、抗性強的油茶品種。