李雪文，徐攀洋，何 冰，邢東洋，夏 薇，許建成

（1.吉林大學第一醫(yī)院檢驗科，吉林 長春 130021；2.北華大學醫(yī)學技術(shù)學院，吉林 吉林 132013）

血清淀粉酶參考區(qū)間的準確性對胰腺疾病的診斷十分重要。目前，我國臨床實驗室檢測項目的參考區(qū)間大多來自相關(guān)行業(yè)標準、《全國臨床檢驗操作規(guī)程》或試劑說明書[1]，可能并不適用于所有地區(qū)的實驗室，因此建立適用于不同地區(qū)人群的參考區(qū)間尤為重要。建立參考區(qū)間的方法主要為直接法和間接法。直接法是按照預定的標準納入?yún)⒖紓€體、進行實驗項目測定、分析結(jié)果，進而建立參考區(qū)間。間接法是通過對實驗室信息系統(tǒng)中已有的數(shù)據(jù)進行分析來建立參考區(qū)間[2]。美國臨床實驗室標準化協(xié)會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）和國際臨床化學聯(lián)合會（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）推薦使用直接法建立參考區(qū)間[3]，但由于過程繁瑣且成本過高而難以實現(xiàn)。間接法建立參考區(qū)間簡便且成本低，逐漸被廣泛應(yīng)用。本研究擬運用間接法建立適用于長春地區(qū)的血清淀粉酶參考區(qū)間，以期為臨床相關(guān)疾病的診斷提供更可靠的參考。

1 材料和方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

收集2015年1月—2020年9月吉林大學第一醫(yī)院健康體檢人群的血清淀粉酶檢測結(jié)果。

1.2 樣本采集及處理

采用黃色真空采血管（廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司）采集所有對象空腹肘前靜脈血4 mL，剔除脂血、溶血等不合格標本，常溫送至檢驗科。

1.3 儀器與試劑

采用4，6-亞乙基-對硝基苯-α-D-麥芽七糖法檢測血清淀粉酶，試劑及標準品購自四川邁克公司，質(zhì)控品購自美國伯樂公司。檢測儀器為7600-210全自動生化分析儀（日本日立公司）。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件和LMS chartmaker Light 2.54軟件進行統(tǒng)計分析。采用Excel 2007軟件制作圖表。采用Kolmogorov-Smirnov檢驗分析數(shù)據(jù)的正態(tài)性。非正態(tài)數(shù)據(jù)進行自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后再檢驗其正態(tài)性。采用“Stem-and-Leaf & Box Plots”方法剔除離群值。不同性別之間比較采用Mann-Whitney U檢驗，不同年齡組之間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。采用LMS法擬合連續(xù)百分位數(shù)曲線分析血清淀粉酶隨年齡的變化。將剔除離群值后的數(shù)據(jù)從小到大排列，取第97.5百分位數(shù)（P97.5）和第2.5百分位數(shù)（P2.5）作為參考區(qū)間的上、下限。

2 結(jié)果

2.1 血清淀粉酶參考區(qū)間的建立

血清淀粉酶數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，經(jīng)自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后呈正態(tài)分布。剔除256個離群值，最終納入4 981例研究對象，其中男2 839名、女2 142名，年齡20～89歲。自然對數(shù)轉(zhuǎn)換及剔除離群值前后數(shù)據(jù)分布見表1。根據(jù)年齡分為20～30歲組、31～40歲組、41～50歲組、51～60歲組、>60歲組。各年齡組男、女性之間血清淀粉酶差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），不同年齡組之間差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。男性和女性的P97.5曲線隨年齡呈上升趨勢，P2.5、第25百分位數(shù)（P25）、第50百分位數(shù)（P50）和第75百分位數(shù)（P75）曲線則較為平緩。見圖1。建立的參考區(qū)間為：男性31～102 U/L，女性33～107 U/L。

表1 血清淀粉酶數(shù)據(jù)自然對數(shù)轉(zhuǎn)換及剔除離群值前后數(shù)據(jù)分布

圖1 血清淀粉酶連續(xù)百分位數(shù)曲線

2.2 血清淀粉酶參考區(qū)間的比較

本研究血清淀粉酶參考區(qū)間存在性別差異，與行業(yè)標準[4]不同。行業(yè)標準的參考區(qū)間上、下限均高于本研究。見表2。

表2 本研究與行業(yè)標準血清淀粉酶參考區(qū)間的比較

3 討論

血清淀粉酶在急性胰腺炎中的敏感性為87.0%、特異性為88.6%[5]，對急性闌尾炎、腸梗阻也有輔助診斷作用[6]，因此建立準確的參考區(qū)間尤為重要。間接法建立參考區(qū)間成本低、數(shù)據(jù)來源充足、操作簡便，但對數(shù)據(jù)分析時，易納入潛在疾病患者的數(shù)據(jù)，需使用合適的方法剔除離群值。

行業(yè)標準推薦采用Dixon法剔除離群值[7]，但CLSI EP28-A3c文件[3]中提出在同側(cè)異常值相近時，Dixon法易受掩蓋效應(yīng)的影響，導致離群值不能被完全剔除?！癝tem-and-Leaf & Box Plots”法將≥3倍四分位數(shù)間距的離群值剔除，此方法要求數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，偏態(tài)數(shù)據(jù)會導致正常值被剔除或出現(xiàn)離群值的掩蓋效應(yīng)[8]。本研究數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，應(yīng)用自然對數(shù)即可轉(zhuǎn)換為正態(tài)分布。百分位數(shù)曲線可為年齡分區(qū)提供參考依據(jù)，本研究男性與女性P97.5分位數(shù)曲線呈上升趨勢，這可能是各年齡段人數(shù)分布不均所致。確定參考區(qū)間上、下限的方法包括參數(shù)法和非參數(shù)法，參數(shù)法要求數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，常以±1.96s作為參考區(qū)間的上、下限。EP28-A3c指南中推薦非參數(shù)法作為確定參考區(qū)間的方法之一，同時要求樣本量超過120例，我國已有研究運用非參數(shù)法建立參考區(qū)間[9-12]。本研究數(shù)據(jù)分布及樣本量滿足要求，因此選用非參數(shù)法建立參考區(qū)間，以P97.5、P2.5作為參考區(qū)間上、下限。

本研究建立的血清淀粉酶參考區(qū)間與行業(yè)標準不同，可能是因為地理環(huán)境、飲食習慣、檢測方法、樣本量差異所致。行業(yè)標準中參考區(qū)間上限顯著高于本研究，且參考區(qū)間較寬。這可能因為行業(yè)標準納入的參考人群分布較廣，而本研究僅限于長春地區(qū)。

綜上所述，本研究利用實驗室信息系統(tǒng)中的數(shù)據(jù)初步建立了適用于長春地區(qū)人群的血清淀粉酶參考區(qū)間，結(jié)果存在性別差異，且上、下限與行業(yè)標準存在一定的差異。本地區(qū)臨床診斷相關(guān)疾病時應(yīng)考慮性別差異，目前全國各大醫(yī)院的信息系統(tǒng)已逐步完善，為間接法創(chuàng)造了便利條件，各地區(qū)實驗室可建立更加合理、準確的參考區(qū)間。