周威杰，羅培娟，成紀予

(1.寧波隆豐農(nóng)業(yè)有限公司，浙江 寧波 315000；2.浙江農(nóng)林大學(xué) 食品與健康學(xué)院，浙江 杭州 311300)

靈芝(Ganodermalucidum)隸屬擔子菌綱、多孔菌目、多孔菌科，是傳統(tǒng)名貴藥用真菌[1]。靈芝不僅含有蛋白質(zhì)、脂肪、膳食纖維、氨基酸、糖類、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分，還含有靈芝多糖、靈芝三萜、靈芝酸等功效成分，具有抗炎、抗氧化、抗癌、提高免疫力等生物活性[2-3]。近年來，靈芝被認為是癌癥的一種替代性輔助療法[4-5]，備受國內(nèi)外醫(yī)藥與保健品行業(yè)關(guān)注。

椴木栽培是靈芝傳統(tǒng)人工栽培方法，在靈芝產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展的過程中，木材需求量大，導(dǎo)致我國林木資源過快過量消耗，引發(fā)芝林矛盾問題，基于此，靈芝的生產(chǎn)逐漸轉(zhuǎn)向采用其他代料栽培為主導(dǎo)。竹屑是指竹材加工過程中產(chǎn)生的下腳料經(jīng)過粉碎得到的碎屑顆粒，其主要成分為木質(zhì)素、半纖維素和纖維素，也含有少量的竹多糖、竹多酚等[6]。竹屑可用于栽培竹蓀[7]、香菇[8]、秀珍菇[9]等食用菌，但竹屑是否適用于靈芝栽培還未見報道。

浙江省是我國竹子主產(chǎn)區(qū)，竹企業(yè)加工下腳料量大，因地制宜開發(fā)本地資源用于靈芝栽培，利用竹產(chǎn)業(yè)鏈廢棄的竹屑栽培靈芝將有效緩解浙江省靈芝產(chǎn)業(yè)的芝林沖突現(xiàn)狀，是突破靈芝產(chǎn)業(yè)發(fā)展瓶頸的一條重要途徑。因此，本試驗對竹屑代料栽培靈芝配方進行優(yōu)選，研究不同比例竹屑代料栽培對靈芝菌絲生長、子實體產(chǎn)量、商品品質(zhì)等方面的影響，以期為靈芝新型栽培基質(zhì)的開發(fā)、降低栽培成本及提高竹加工廢棄物利用率提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

靈芝菌種為隆豐靈芝1號，由寧波隆豐農(nóng)業(yè)科技有限公司與上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院共同選育。木屑為闊葉林樹粉碎的木屑，經(jīng)機械粉碎過篩網(wǎng)，顆粒大小為0.5～0.8 cm。

竹屑為新鮮、干燥、無霉變、無蟲蛀的毛竹，經(jīng)機械粉碎過篩網(wǎng)，顆粒大小為0.5～0.8 cm。其他原輔材料：棉籽殼、麩皮、石膏粉、菌袋等，均購自寧波本地食用菌原材料經(jīng)營商店。

1.2 試驗方法

1.2.1 栽培基質(zhì)配方

為篩選出最佳竹加工副產(chǎn)物的栽培基質(zhì)配方，本研究設(shè)計不同的基質(zhì)配制方案，原輔材料的添加量按干物質(zhì)百分比計，其中，麥麩、石膏、蔗糖和磷肥等原材料配比不變。培養(yǎng)料及其比例見表1。

表1 培養(yǎng)基配方及其比例

1.2.2 栽培過程

靈芝代料栽培的工藝流程為：原料→拌料→裝袋→滅菌→接種→發(fā)菌→覆土→出芝管理→采收。

分別按不同栽培料配方稱取各組分，攪拌均勻后裝袋，每袋裝料400 g，121 ℃滅菌2 h，冷卻至30 ℃以下接入菌種。采用室內(nèi)層架式發(fā)菌，控制室內(nèi)溫度26～28 ℃，空氣相對濕度60%～70%，并定期通風(fēng)換氣，每隔2 d翻一次菌袋。約30～40 d可發(fā)滿菌袋，菌袋進入生理成熟過渡期10 d后進行覆土栽培。將不同配方的菌袋移入遮陽大棚內(nèi)，去掉外袋，覆土1～2 cm，棚內(nèi)空氣相對濕度在75%以上，保持棚內(nèi)通風(fēng)良好。當靈芝子實體菌蓋邊緣白色生長圈消失、菌蓋不再增大、孢子大量彈射時，開始采收靈芝。

1.3 測定項目

1.3.1 菌絲生長情況

發(fā)菌階段觀察各配方的靈芝菌絲長勢，測定菌絲平均生長速度。每個配方下隨機抽取5袋正常生長的菌袋，每隔3 d測量一次菌絲生長長度，達到菌絲滿袋時停止測量。

1.3.2 靈芝產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率

采收的靈芝子實體立即置于60 ℃烘干至恒重。生物轉(zhuǎn)化率以兩潮的靈芝產(chǎn)量計算，各配方下的每個重復(fù)隨機選取10袋子實體，稱重測定產(chǎn)量。生物轉(zhuǎn)化率的計算公式為：生物轉(zhuǎn)化率=靈芝產(chǎn)量干重(g)/培養(yǎng)料干重(g)×100%。

1.3.3 靈芝的商品品質(zhì)

將采后的第一潮靈芝子實體進行商品品質(zhì)分析。靈芝菌蓋直徑以菌蓋最長處測量；菌蓋厚度以菌蓋厚度最大處縱切面測量[10]。靈芝子實體多糖含量和總?cè)坪康臏y定均采用分光光度法[11-12]。

1.3.4 重金屬含量測定

鉛和鎘含量的測定參照GB 5009.268—2016；砷含量的測定參照GB 5009.11—2014；汞含量的測定參照GB 5009.17—2014。

1.4 數(shù)據(jù)處理

結(jié)果統(tǒng)計及繪圖使用Excel 2007；顯著性差異比較使用SPSS 19軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌絲生長情況

靈芝菌種在5個培養(yǎng)基中均可正常生長(表2)。與木屑代料栽培靈芝(CK)相比，竹屑代料配方栽培的靈芝萌發(fā)時間以及生長速度均較慢，萌發(fā)時間晚2～4 d，滿袋時間晚3～8 d。在4個竹屑代料配方組中，隨著竹屑添加量的增加，靈芝菌絲生長速度下降，菌絲萌發(fā)時間和滿袋時間也隨之相應(yīng)延長，這可能與竹屑中含有的酚酸、蒽醌和生物堿等天然抑菌殺菌成分有關(guān)[13]，竹屑比例越大的配方對菌絲生長的抑制作用越強。配方1、2和3的菌絲生長速度無顯著性差異，配方4的菌絲生長速度顯著慢于其他配方組，但所有竹屑配方組菌絲的生長狀況均正常。只要靈芝菌絲適應(yīng)了竹屑培養(yǎng)基，也能較好地分解并利用竹屑營養(yǎng)成分生長。

表2 靈芝菌絲生長情況

2.2 靈芝產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率

不同配方下栽培的靈芝均能正常出芝并發(fā)育成熟，子實體外觀形態(tài)正常，色澤均勻一致，均能產(chǎn)生孢子，且孢子形態(tài)特征正常。由圖1可知，隨著竹屑添加比例的增大，靈芝產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率均有所降低，其中，配方1和2與CK組的產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率相近，無顯著性差異，配方4的表現(xiàn)最差，與其他各組存在顯著的差異。結(jié)果表明，配方中竹屑添加比例控制在50%～60%較為適宜。

柱間無相同字母表示組間差異顯著(P<0.05)，圖2、3同。

2.3 靈芝子實體商品性狀

菌蓋直徑及其厚度的大小可以反映靈芝的商品性狀。由圖2可知，竹屑代料栽培的靈芝子實體商品性狀與木屑代料栽培基本一致。從菌蓋直徑來看，配方2與CK之間、配方1和2之間無顯著性差異，隨著竹屑添加比例的增加，配方3和4的菌蓋生長受到抑制。從菌蓋厚度來看，配方3和4的靈芝菌蓋厚度平均值略低于其他組，但經(jīng)統(tǒng)計分析結(jié)果顯示各配方組間無顯著性差異?？梢姡裥即显耘嗖粫黠@降低靈芝的商品性狀。

圖2 靈芝子實體的菌蓋直徑及厚度

2.4 靈芝多糖和總?cè)坪?/h3>

多糖和三萜類是靈芝的主要藥用活性成分，由圖3可知，竹屑代料栽培的靈芝子實體多糖含量均比木屑代料栽培高，且差異顯著。這可能是由于竹子營養(yǎng)豐富，含有竹多糖、微量元素、維生素等成分，這些活性物質(zhì)對靈芝多糖的合成具有誘導(dǎo)促進作用[14]。竹屑代料栽培的總?cè)坪颗c木屑代料栽培相近，且無顯著性差異?？梢?，竹屑代料栽培模式可增加靈芝多糖的積累，提高靈芝的藥用價值。

圖3 靈芝子實體的多糖及總?cè)坪?/p>

2.5 靈芝重金屬含量

靈芝可以從培養(yǎng)基質(zhì)中吸附多種礦物元素及金屬元素，且靈芝的生長周期比一般食用菌長，其對重金屬元素的富集能力更強。因此，竹屑代料栽培靈芝是否會帶來安全問題，是研究的重點之一。檢測結(jié)果如表3所示，采用竹屑代料基質(zhì)不會造成靈芝子實體中有害元素超標，各配方栽培的靈芝子實體中鉛、汞、砷和鎘含量遠低于GB 2767—2017食品安全國家標準食品中污染物限量的要求。

表3 靈芝子實體重金屬含量

3 小結(jié)

靈芝的菌絲能在竹屑為主的代料培養(yǎng)基上正常生長，且能正常出芝，產(chǎn)生孢子，子實體和孢子形態(tài)特征與木屑代料栽培的靈芝無顯著差異。綜合比較各配方靈芝菌絲生長狀況、子實體產(chǎn)量、生物轉(zhuǎn)化率以及靈芝商品品質(zhì)等指標，竹屑代料栽培靈芝的優(yōu)選配方為：竹屑50%～60%，棉籽殼20%～30%，石膏1%，蔗糖1%，磷肥1%。竹屑代料栽培靈芝子實體的有害金屬元素不會超標，且具有促進子實體靈芝多糖合成和積累的優(yōu)勢，提升了靈芝的商品品質(zhì)。因此，竹屑可以作為靈芝栽培的代料資源，在竹資源豐富的產(chǎn)區(qū)進行產(chǎn)業(yè)化推廣，構(gòu)建“竹+靈芝”產(chǎn)業(yè)相結(jié)合的栽培模式，將具有廣闊的發(fā)展前景。