苗艷 朱慶賀 陳亮 蘭世捷 張蕾 李丹 馮萬(wàn)宇 沈思思 黃寶銀 金振華 張紅 田秋豐
雛鵝痛風(fēng)是近年在我國(guó)多地區(qū)爆發(fā)的一種由鵝星狀病毒(Goose astrovirus,GAstV)引起的鵝的傳染性疾病,以內(nèi)臟尿酸鹽沉積為主要臨床特征。該病發(fā)病率和致死率都較高,給養(yǎng)鵝業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失,目前尚無(wú)針對(duì)該病的疫苗和特效藥。本文現(xiàn)對(duì)該病的流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷和防控措施進(jìn)行概述,旨在為該病今后的研究提供參考。
1 流行病學(xué)
雛鵝痛風(fēng)的主要傳染源是患病鵝和帶毒鵝,此外還有其排泄物和病鵝污染的飼料、鵝舍、用具等。一般認(rèn)為該病主要是通過(guò)糞-口途徑進(jìn)行水平傳播,即主要通過(guò)消化道和呼吸道進(jìn)行傳播。食物和水可以作為星狀病毒傳播的載體。各日齡的鵝均可感染該病毒,但4~21日齡雛鵝更易感和發(fā)病。該病常年可見(jiàn),發(fā)病高峰期以6~14日齡雛鵝為主。發(fā)病率在80%左右,致死率在30%~50%之間。
2 臨床癥狀
該病主要以雛鵝內(nèi)臟和關(guān)節(jié)尿酸鹽沉積、出血為特征,最早可在1日齡發(fā)病。患病雛鵝通常表現(xiàn)為精神沉郁、采食量減少、活動(dòng)減少、排白便、腿關(guān)節(jié)腫大,并有尿酸鹽沉積、癱瘓。剖檢可在腎臟、膽囊、膝蓋、輸尿管以及心臟、肝臟、肺泡、輸尿管和前胃表面發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的尿酸鹽沉積。疾病持續(xù)7~10 d,并伴有高發(fā)病率和高死亡率。存活下來(lái)的鵝生長(zhǎng)緩慢且很容易再感染其他病菌。組織病理學(xué)發(fā)現(xiàn),病鵝血清中尿素含量升高,腎小管管腔和肝細(xì)胞有尿酸鹽沉積。
3 診斷
3.1 臨床診斷
雛鵝痛風(fēng)的臨床特征比較明顯,可根據(jù)該病的特征性癥狀和剖檢變化作出初步診斷。但引起雛鵝痛風(fēng)的因素較為復(fù)雜,例如缺乏維生素 A 、鈣磷比例失調(diào)、飼料蛋白含量高、寄生蟲(chóng)感染和磺胺類藥物中毒等都可導(dǎo)致雛鵝發(fā)生痛風(fēng)。因此,還需要進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷才能最終確診病因。
3.2 病毒的分離培養(yǎng)
采集新鮮患病雛鵝的肝臟、腎臟、脾臟等組織樣品,經(jīng)處理后接種鵝胚進(jìn)行病毒的分離培養(yǎng)。
3.3 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)
RT-PCR是一種最為常用的病原檢測(cè)方法,可以直接對(duì)所分離到的病毒或臨床采集的樣品進(jìn)行快速診斷。通過(guò)對(duì)鵝星狀病毒的ORF1b、ORF2或RdRp基因進(jìn)行擴(kuò)增并通過(guò)測(cè)序后進(jìn)行序列分析,可對(duì)鵝星狀病毒進(jìn)行分型。熒光定量PCR也是一種比較常用的分子檢測(cè)技術(shù),特異性和敏感性都較高,已被廣泛用于各種動(dòng)物疾病的臨床診斷。Yuan等[1]建立了一種鵝星狀病毒RT-qPCR檢測(cè)方法,對(duì)新型鵝星狀病毒的最小檢出量為52.5拷貝/μL,比普通RT-PCR的病毒檢出率高出7.5%,為新型鵝星狀病毒早期快速檢測(cè)及定量分析提供了新的方法。白彩霞等[2]建立了一種鵝星狀病毒的SYBR Green I熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法,最小檢出量為3.75×101拷貝/μL。
3.4 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)
LAMP是一種新型的核酸擴(kuò)增方法,能夠在恒溫條件下進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng),易于操作、簡(jiǎn)單、快速高效,僅需水浴鍋等簡(jiǎn)單儀器設(shè)備即可完成,已廣泛用于多種病原微生物的檢測(cè)。張玉霞等[3]建立了鵝星狀病毒的LAMP檢測(cè)方法,其最低檢測(cè)濃度為1 ng/μL,具有較好的特異性和敏感性。
3.5 ELISA
ELISA是一種較為成熟的診斷方法,已在各種動(dòng)物疾病診斷中被廣泛應(yīng)用;具有操作簡(jiǎn)單、設(shè)備要求簡(jiǎn)單、快速、高效、特異性和敏感性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),是目前應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的酶免疫學(xué)技術(shù)方法。張?chǎng)斡畹萚4]發(fā)明了一種鵝星狀病毒的ELISA檢測(cè)試劑盒,其特異性強(qiáng)、敏感性高,能用于鵝星狀病毒抗體的批量檢測(cè),田間樣品的陽(yáng)性檢出準(zhǔn)確率為100%,陰性檢出準(zhǔn)確率為97.78%。
4 防控措施
目前,該病尚無(wú)良好的特效藥,也無(wú)商品化疫苗可以預(yù)防。本病的特異性防治以卵黃抗體接種為主,并配合使用抗生素對(duì)病情進(jìn)行控制,但總體效果并不理想。因此,在實(shí)際飼養(yǎng)過(guò)程當(dāng)中應(yīng)實(shí)行嚴(yán)格的生物安全防控措施來(lái)進(jìn)行預(yù)防。首先,應(yīng)改變傳統(tǒng)的飼養(yǎng)模式,采用網(wǎng)架飼養(yǎng)或多層籠養(yǎng)等育雛模式,可減少糞污與雛鵝的接觸幾率,避免病原感染;實(shí)行全進(jìn)全出、片區(qū)分點(diǎn)的方式,大力推進(jìn)糞污資源化利用,減少污染物的排放;加快養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展方式的轉(zhuǎn)變,不斷探索規(guī)?;?、現(xiàn)代化、標(biāo)準(zhǔn)化的生態(tài)養(yǎng)殖模式;其次,要防止病原傳播,實(shí)行封閉式管理,做好飼養(yǎng)環(huán)境、發(fā)病廠區(qū)、設(shè)施、種蛋和工作人員等的隔離、清潔和消毒工作;最后,還要進(jìn)行合理飼喂,均衡日糧營(yíng)養(yǎng)水平,降低飼料中的蛋白含量,從而減少尿酸鹽的產(chǎn)生。
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[3] 張玉霞,楊金興,孟凱,等. 鵝星狀病毒LAMP快速檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2019,41(11):1137-1140.
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