楊紅梅，劉根新，達(dá) 奎，賈萬臣，張 璽，郭志明，孫月華

(甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，甘肅 武威 733006)

隨著我國規(guī)?；?、集約化養(yǎng)豬的快速發(fā)展，豬群中常見傳染病的種類和發(fā)病量不斷增加，尤其是豬繁殖與呼吸障礙綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)、豬圓環(huán)病毒病、非洲豬瘟等免疫抑制性傳染病，已經(jīng)嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，降低了豬場的經(jīng)濟(jì)效益。因此，規(guī)?；i場要有效預(yù)防傳染病的發(fā)生，提高生產(chǎn)效益，制定合理的免疫程序，進(jìn)行預(yù)防性免疫接種勢在必行。

筆者通過調(diào)查分析甘肅省河西地區(qū)中小規(guī)模豬場免疫接種的程序和常發(fā)傳染病，探討并制定了適用于中小規(guī)模豬場的免疫程序，并進(jìn)行抗體監(jiān)測，根據(jù)監(jiān)測結(jié)果完善免疫程序，使其更加合理，從而防制和減少中小規(guī)模豬場傳染病的發(fā)生，提高經(jīng)濟(jì)效益?，F(xiàn)將本次為河西地區(qū)中小規(guī)模豬場量身定制免疫接種程序的過程及結(jié)果匯報(bào)如下，以供養(yǎng)豬生產(chǎn)者在控制豬場常規(guī)傳染病的過程中借鑒，從而最大限度地控制發(fā)病率和死亡率，提高生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 疫苗

豬瘟(classical swine fever，CSF)細(xì)胞苗來自廣東永順生物制藥有限公司，豬乙型腦炎疫苗、豬細(xì)小病毒病疫苗由中農(nóng)威特生物科技有限公司提供，豬口蹄疫(foot-andmouth disease，F(xiàn)MD) 多價(jià)苗由內(nèi)蒙古金宇生物科技有限公司生產(chǎn)，豬圓環(huán)病毒2 型滅活疫苗、豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea，PED) 弱毒苗、PED滅活苗、大腸桿菌三價(jià)滅活苗、豬偽狂犬病(porcine pseudorabies，PR)基因缺失株疫苗均購自武漢科前生物股份有限公司，PRRS 弱毒疫苗、支原體滅活疫苗從碩騰生物制藥有限公司采購。

1.1.2 檢測試劑盒

CSF 病毒酶標(biāo)抗體檢測試劑盒、PR 病毒gB 酶標(biāo)抗體檢測試劑盒、PR 病毒gE 酶標(biāo)抗體檢測試劑盒、PRRS 病毒酶標(biāo)抗體檢測試劑盒均購自上海博研生物科技有限公司；豬FMD 病毒O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.1.3 試驗(yàn)豬場和試驗(yàn)豬

選擇3 家有一定代表性的中小規(guī)模豬場，隨后從這些豬場中各選擇60 頭處于不同生長階段的豬，按所制定的免疫程序接種疫苗，1 個(gè)月后（仔豬二免）采集血樣，分離血清后備用。

1.2 調(diào)查與分析

通過現(xiàn)場訪談和問卷調(diào)査，抽樣調(diào)查了甘肅省河西地區(qū)具有代表性的中小規(guī)模豬場的免疫程序和常發(fā)病，并統(tǒng)計(jì)分析了調(diào)查資料。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，河西地區(qū)85%的中小規(guī)模豬場有較合理的免疫程序，主要接種的疫苗為CSF 疫苗、豬FMD 疫苗、PR 疫苗、PED 疫苗、豬傳染性胃腸炎(transmissible gastroenteritis，TGE) 疫苗、仔豬黃白痢疫苗等；常發(fā)傳染病主要是豬喘氣病、豬鏈球菌病、PED、仔豬黃白痢、豬細(xì)小病毒病等，受威脅的傳染病主要是PRRS、非洲豬瘟(African swine fever，ASF)、豬嗜血桿菌病等。

1.3 中小規(guī)模豬場免疫程序的制定

根據(jù)對河西地區(qū)具有代表性的中小規(guī)模豬場目前采用的免疫程序、常發(fā)傳染病和受威脅傳染病的調(diào)查結(jié)果，與項(xiàng)目合作單位共同探討并制定了免疫程序，詳見表1。

所有后備豬群接種疫苗后需抽樣監(jiān)測，監(jiān)測合格后才能配種。

1.4 血清收集與抗體監(jiān)測

1.4.1 待檢血清

按以上免疫程序?qū)λx擇3 家豬場的各 60 頭豬接種疫苗，接種1 個(gè)月后（仔豬二免）對各家豬場按種公豬10 份、母豬20 份、仔豬15 份和育肥豬15 份的數(shù)量采集血樣，合計(jì)180 份血樣，血樣經(jīng)自然析出或離心分離后收集血清，于－20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 抗體監(jiān)測和結(jié)果判斷

所有抗體監(jiān)測實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果判定均按照ELISA 檢測試劑盒說明書操作進(jìn)行。

3 家豬場5 種抗體監(jiān)測結(jié)果見表2；不同生長階段豬的5 種抗體監(jiān)測結(jié)果見表3。

2 結(jié)果與分析

按制定的免疫程序?qū)? 家豬場各60 頭處于不同生長階段的豬接種疫苗后，經(jīng)抗體監(jiān)測結(jié)果顯示，免疫豬的CSF、FMD、PR-gB 的抗體合格率超過95%，PR-gE 抗體均為0.00%，PRRS 的抗體水平較低，但符合國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，說明所制定的免疫程序能對豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征產(chǎn)生良好的免疫效果。盡管如此，也應(yīng)注意是否存在豬瘟、豬偽狂犬病等疫病的野毒株感染情況，這需要結(jié)合病原學(xué)檢測及臨床癥狀進(jìn)行綜合評估，并根據(jù)評估結(jié)果采取相應(yīng)措施。

根據(jù)對處于不同生長階段的豬體內(nèi)抗體的監(jiān)測可發(fā)現(xiàn)，種公豬、母豬、仔豬和育肥豬按所制定的免疫程序接種疫苗后，公豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽性率達(dá)100%；母豬的豬瘟、口蹄疫、豬偽狂犬病(PR-gB) 的抗體陽性率達(dá)96%以上，豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽性率達(dá)91.67%；仔豬和育肥豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽性率略低于種公豬和母豬的，但均符合要求。

在預(yù)防豬繁殖與呼吸障礙綜合征上，我國以前常采取強(qiáng)制免疫的措施，但大部分豬場存在隱性帶毒情況，不接種疫苗也能保持疫情平穩(wěn)，但一旦接種反而會促使發(fā)病。2017 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部取消PRRS 強(qiáng)制免疫，部分豬場停止免疫接種，導(dǎo)致部分豬場的PRRS 病毒抗體水平不高。建議先進(jìn)行抗原檢測，后確定免疫程序，開展抗體監(jiān)測，完善免疫程序。

3 討論

本試驗(yàn)按表1 中免疫程序進(jìn)行免疫，一個(gè)月后監(jiān)測抗體，免疫豬的CSF、FMD、PR-gB的抗體合格率超過95%，PR-gE 抗體均為0，PRRS 的抗體陽性率約90%。陳南穎等對部分規(guī)?；i場主要疫病抗體與監(jiān)測分析中部分規(guī)?；i場抽樣進(jìn)行抗體監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，CSF 抗體陽性率最高為97.78%，F(xiàn)MD 抗體陽性率最高為97.78%、PR-gB 抗體陽性率最高為100%、PR-gE 抗體陽性率最高為0、PRRS 抗體陽性率最高為97.78%。李偉等豬O 型和A 型口蹄疫二價(jià)合成肽疫苗免疫抗體的檢測評估研究表明，首免后30 d，豬O 型及A 型口蹄疫抗體合格率分別為100%、95%,二免后15 d、45 d 抗體合格率均可達(dá)到100%,二免后90 d、120 d 抗體臺格率仍在95%以上。姚敬明等豬偽狂犬病基因缺失株疫苗免疫試驗(yàn)證明，種豬免疫抗體合格率達(dá)100%,仔豬49 日齡前抗體合格率達(dá)100%,75 日齡后抗體逐漸降低。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《2013 年國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》和《2021 年國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》分別要求高致病性豬繁殖與呼吸障礙綜合征、豬瘟免疫抗體合格率應(yīng)常年保持在70%以上，口蹄疫免疫抗體合格率應(yīng)常年保持在70%以上，綜上所述本文中的免疫程序?qū)χ行∫?guī)模養(yǎng)豬有一定的指導(dǎo)意義。

本試驗(yàn)按表1 中免疫程序進(jìn)行免疫，一個(gè)月后監(jiān)測抗體，公豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽性率達(dá)100%；母豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病(PR-gB) 的抗體陽性率達(dá)97%以上，豬繁殖與呼吸障礙綜合征的抗體陽性率達(dá)91.67%；仔豬和育肥豬的豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸障礙綜合征4 種疾病的抗體陽性率略低于種公豬和母豬。覃軍等規(guī)模化豬場主要疫病抗體監(jiān)測與免疫效果分析研究表明，哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的豬瘟抗體100%合格，哺乳母豬、哺乳仔豬、保育豬、育肥豬和妊娠母豬的豬口蹄疫血清抗體83.8%合格。賀俊暢等在規(guī)?；i場豬瘟免疫程序制定探索中研究結(jié)果表明，母豬首免后4 周監(jiān)測抗體合格率達(dá)93%。本試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)中的基本相符，個(gè)別結(jié)果抗體陽性率偏高，與免疫后采樣時(shí)間有一定的關(guān)系，綜上所述說明本文中免疫程序較合理。

新生仔豬在接種疫苗時(shí)，要考慮是否受母源抗體的干擾。如果母豬在配種前和妊娠階段接種了疫苗，且母豬相應(yīng)疫苗的抗體水平較高，所產(chǎn)仔豬通過吃初乳可獲得相應(yīng)的抗體，不宜過早接種相應(yīng)的疫苗。張一鳴的豬瘟苗免疫效果試驗(yàn)研究表明豬瘟STK 細(xì)胞苗、ST 細(xì)胞苗、豬瘟脾淋組織苗在仔豬二免后25 d（90 日齡）進(jìn)行抗體監(jiān)測，抗體合格率達(dá)100%，賀俊暢等在規(guī)?；i場豬瘟免疫程序制定探索中仔豬首免受母源抗體干擾研究結(jié)果表明，仔豬在25 日齡首免，65 日齡二免具有指導(dǎo)意義，本文表1 中仔豬接種的豬瘟細(xì)胞苗免疫程序基本與其研究相符，并且二免一個(gè)月后測抗體，仔豬豬瘟抗體合格率在96.67%，進(jìn)一步證明對中小規(guī)模養(yǎng)豬有一定的指導(dǎo)意義。

在制定免疫程序和實(shí)施免疫接種過程中，除把好疫苗質(zhì)量關(guān)外，還需考慮不同種類的疫苗之間的協(xié)同作用、拮抗作用等。許建康的生豬同時(shí)注射豬瘟、口蹄疫二種疫苗試驗(yàn)免疫效果分析結(jié)果表明分點(diǎn)同時(shí)注射豬瘟活疫苗和豬O 型口蹄疫滅活疫苗，28 d 后采血測抗體，豬瘟抗體陽性率86.5%，豬口蹄疫抗體陽性率87%，邵國青曾指出，同時(shí)注射豬瘟、豬口蹄疫二種疫苗，能夠增強(qiáng)二種疫苗的免疫效果，存在協(xié)同作用。本文借鑒參考文獻(xiàn)中研究結(jié)果，免疫程序制定過程中育肥豬150 日齡接種豬瘟細(xì)胞苗和豬口蹄疫多價(jià)苗，頸部左右兩側(cè)分別進(jìn)行肌內(nèi)注射，育肥豬140 日齡接種乙腦疫苗和豬細(xì)小病毒病疫苗，頸部左右兩側(cè)分別進(jìn)行肌內(nèi)注射。免疫接種后臨床上未見不良反應(yīng)和這兩種疾病的發(fā)生，還需進(jìn)一步抗體監(jiān)測以完善免疫程序。

4 結(jié)論

通過對河西地區(qū)中小規(guī)模豬場免疫接種情況、當(dāng)?shù)爻０l(fā)傳染性豬病進(jìn)行的調(diào)查、統(tǒng)計(jì)和分析，本試驗(yàn)重新制定了免疫接種程序，并在3 家有代表性的規(guī)?；i場不同生長階段的豬上應(yīng)用，通過血清抗體水平分析，證明該程序能有效預(yù)防豬瘟、豬口蹄疫、豬偽狂犬病和豬繁殖與呼吸障礙綜合征。由于受疫情、經(jīng)濟(jì)、地域等條件的限制，免疫程序中其他疫苗免疫后血清中抗體未測定，有待進(jìn)一步研究和探討。中小規(guī)模豬場制定科學(xué)的免疫程序需要綜合考慮豬場的飼養(yǎng)管理水平、生物安全、豬群的健康狀況、藥物使用情況等諸多因素，豬場的免疫程序并不是一成不變的，還要根據(jù)當(dāng)?shù)刎i傳染病的流行情況、豬群常發(fā)傳染性疾病的狀況以及抗原和抗體監(jiān)測結(jié)果進(jìn)行及時(shí)的調(diào)整，并進(jìn)行不斷的探討和完善，才能真正做到提高中小規(guī)模豬場生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。