閆曉，LEE JAEMYUNG，張銘，李瑞青，高靜，馮曉東，*

全球疾病負擔研究數(shù)據(jù)顯示，我國人口壽命年減少的首要病因是腦卒中［1］。在我國，腦卒中的發(fā)病率與患病率整體呈上升趨勢，其高致殘率和高死亡率已成為成年人群死亡和傷殘的首位病因［2］，而缺血性腦卒中約占腦卒中的70%［3］。腦卒中后患者通常會并發(fā)不同程度的功能障礙，在急性腦卒中患者中，約2/3的患者表現(xiàn)出不同程度的認知功能障礙。目前臨床上認知功能障礙的診斷標準為患者既往無認知障礙但在腦卒中后6個月內(nèi)，視空間、語言、執(zhí)行功能/注意力、記憶等存在至少1個認知領(lǐng)域損害或下降［4］。在認知功能中，學習記憶是一項基本能力，為高等動物和人類具有特色的生理特性之一，學習、記憶功能障礙嚴重影響患者的日常生活能力，降低其生命質(zhì)量和延緩神經(jīng)功能康復。

本課題組前期基于電針穴位組（穴位選取神庭、百會）、電針非經(jīng)非穴組、手針穴位組、手針非經(jīng)非穴組的基礎(chǔ)實驗研究及初步臨床實踐觀察均發(fā)現(xiàn)電針神庭、百會穴在改善腦卒中患者學習、記憶功能障礙時的治療效果更佳［5-9］。但電針治療作用的確切機制仍需要深入研究?；A(chǔ)醫(yī)學研究理論表明，自由基代謝異常是腦卒中損傷形成的重要原因之一［10-11］。因此，本課題基于自由基代謝，探索電針神庭、百會穴治療缺血性腦卒中患者學習記憶障礙的分子生物學機制，為腦卒中學習、記憶功能損傷的治療提供新的靶點。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 購于濟南朋悅實驗動物繁育有限公司〔許可證號：SCXK（魯）20190003〕體質(zhì)量為190 ～210 g、健康成年雄性SPF級SD大鼠18只，按照規(guī)范化條件于中心實驗室IVC屏障動物房適應(yīng)性喂養(yǎng)至270 ～280 g（60 ～75日齡），自然照明，自由攝食、水。本研究通過河南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院動物倫理委員會批準（YFYDW2019001），整個過程嚴格遵照國際動物保護及使用指南的相關(guān)規(guī)定。

采用SPSS 22.0軟件將SD大鼠進行完全隨機化分組，分為假手術(shù)組（6只）、模型組（6只）和電針組（6只）。本研究時間為2019年8月至2020年8月。

1.2 主要實驗儀器和試劑 儀器：Super Maze Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)（XR-XM 101，上海欣軟信息科技有限公司）；華佗電子針療儀（SDZ-Ⅱ型，蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）；臺式冷凍離心機（德國Biofuge stratos）；渦旋混勻儀（Vortex QL-901，海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；酶標儀器（美國VersaMax）；大腦中動脈阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型線栓（MSRC43B260PK50，深圳市瑞沃德生命科技有限公司）；無菌針灸針（環(huán)球牌，蘇州針灸用品有限公司，規(guī)格：0.30 mm×25 mm）；非吸收性外科縫線（3-0）（揚州市華祥醫(yī)療器械廠）；LEICA 819一次性窄刀片（德國徠卡LEICA）。

試劑：酒精（衛(wèi)輝市眾誠消毒制劑有限公司）；碘伏（山東德新康醫(yī)療科技有限公司）；水合氯醛（上海麥克林生化科技有限公司，C804539-100 g）；硫酸慶大霉素注射液〔開封制藥（集團）有限公司〕；呋塞米注射液（河南潤弘制藥股份有限公司）；磷酸鹽緩沖液（PBS）干粉（Solarbio：P1010）；BCA蛋白濃度測定試劑盒（Solarbio：PC0020）；總超氧化物歧化酶比色法測試盒（WST-1法）（武漢伊萊瑞特生物科技有限公司，E-BC-K020）；丙二醛比色法測試盒（TBA法）（武漢伊萊瑞特生物科技有限公司，E-BC-K025-M）。

1.3 動物模型制備

1.3.1 MCAO模型［12］（1）術(shù)前準備：適應(yīng)性飼養(yǎng)大鼠至目標體質(zhì)量（270 ～280 g），術(shù)前將造模動物禁食12 h、自由飲水。準備好分離動脈所需的物品，造模由2名經(jīng)培訓的手法基本一致的實驗人員同時進行，以避免因造模不同引起的誤差。（2）麻醉：大鼠抓取尾部，將其放在電子秤上稱量體質(zhì)量，稱重后按照3.5 ml/kg的劑量用10%的水合氯醛進行腹腔注射麻醉，檢查大鼠角膜反射，消失為麻醉成功的標志。麻醉時注意進針的深度和角度，避免造成動物意外死亡。（3）分離動脈：麻醉成功后用剃毛器將SD大鼠頸前部的皮毛剃去，將其仰臥位固定在大鼠固定板上，用碘伏、醫(yī)用乙醇消毒后備皮，在頸中線稍偏左側(cè)做1個4 cm左右的切口，鈍性逐層分離皮下組織，找到并將頸總動脈與迷走神經(jīng)分離，并在頸總動脈近心端處預留結(jié)扎線。沿頸總動脈向遠心端找到頸內(nèi)動脈與頸外動脈的分叉并將兩者分離。在頸外動脈遠心端處預留結(jié)扎線，在頸外動脈近心端、頸總動脈近心端處結(jié)扎頸外動脈與頸總動脈。（4）插栓：用動脈夾夾閉頸內(nèi)動脈遠心端，左手持彎鑷將頸總動脈結(jié)扎處與分叉處撐起，右手用顯微剪刀在距離頸內(nèi)與頸外動脈分叉1 cm處剪V型切口，將線栓從頸總動脈切口處經(jīng)分叉插入18 ～20 mm，稍感有阻力時即可停止插栓，用3-0的縫合線結(jié)扎V型切口處并記錄下插栓時間，消毒后將皮膚切口縫合。切記留1 cm線栓在皮膚外。（5）再灌注：線栓插入2 h后，小心將線栓退至分叉處，以實現(xiàn)缺血再灌注。在手術(shù)期間及術(shù)后，室溫保持在25 ℃左右，同時采用電熱毯維持大鼠肛溫在（37±1）℃，直至大鼠麻醉蘇醒，恢復意識。

1.3.2 假手術(shù)組模型制備 大鼠僅做頸部皮膚切開，分離頸總動脈、頸內(nèi)動脈與頸外動脈，然后消毒切口、縫合皮膚。

1.3.3 造模后處理 術(shù)后麻醉恢復時要注意保暖，保持呼吸道通暢。術(shù)后3組大鼠均腹腔注射硫酸慶大霉素2 U/只，連續(xù)注射3 d，以預防感染。術(shù)后均腹腔注射呋塞米注射液，劑量為0.1 mg/kg，防止腦水腫。

1.4 模型制備成功的標準 動物麻醉完全清醒后，按照Zea-Longa法［13］（0分：無神經(jīng)缺損癥狀，1分：無法完全伸展對側(cè)前爪，2分：向右側(cè)轉(zhuǎn)圈，3分：向?qū)?cè)傾倒，4分：意識喪失，無法自發(fā)行走）對MCAO模型大鼠進行評分，篩選分值為1 ～3分的大鼠為成功的動物模型，納入模型組、電針組。0分和4分失敗的動物模型不納入本次實驗研究。

1.5 干預方法

1.5.1 電針組 腧穴定位：參考《實驗針灸學》［14］和《實驗動物常用穴位名稱與定位第2部分：大鼠》［15］并模擬人體腧穴骨度分寸法定位取穴：神庭穴位于大鼠頭前正中線，額頂骨縫交界線前方；百會穴位于大鼠頭部前正中線，雙耳尖連線中點。

電針方法：術(shù)后第1天開始電針治療，選用直徑0.3 mm的環(huán)球無菌針灸針分別刺入神庭穴（向上斜刺，深度約2 mm）、百會穴（向前斜刺，深度約2 mm），進針后連接SDZ-Ⅱ型華佗電子針療儀，疏密波頻率為1 Hz/20 Hz，強度以針體輕輕抖動、動物耐受為度，1次/d，30 min/次，連續(xù)治療2周，直至動物被處死。針刺干預由同一人員進行操作。

1.5.2 模型組和假手術(shù)組 術(shù)后于籠中飼養(yǎng)，除同等條

件抓取固定30 min外，不給予任何干預措施。

1.6 檢測指標與方法

1.6.1 Morris水迷宮實驗 Morris水迷宮實驗設(shè)置參照設(shè)備說明書和參考文獻［16］設(shè)置，主要包括定位航行和空間探索兩部分實驗。

定位航行實驗：在動物每天電針治療結(jié)束后，分上、下午2個時段訓練，每次訓練將動物面朝池壁從4個不同的象限依次放入水迷宮中，記錄從不同象限將動物放入后，動物找到逃生平臺的時間（即逃避潛伏期）；動物如果在90 s內(nèi)找到逃生平臺，并在其上停留3 s以上，則認為動物找到逃生平臺；如果動物在90 s內(nèi)未找到逃生平臺，則由實驗者借助外物對動物進行引導，找到逃生平臺并熟悉10 s，此時動物的逃避潛伏期界定為90 s。此部分實驗時間從電針治療第9天開始，第13天結(jié)束，持續(xù)5 d。

空間探索實驗：本實驗于第14天電針治療結(jié)束后進行。撤掉池壁內(nèi)的逃生平臺，將大鼠按照相同的操作從離原平臺位置最遠象限投入池內(nèi)，并記錄動物在90 s內(nèi)穿越逃生平臺的次數(shù)。

1.6.2 腦組織超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量檢測 組織樣本采集：Morris水迷宮行為學測試結(jié)束后，抓取各組大鼠稱重后采用10%的水合氯醛以4 ml/kg的劑量進行腹腔注射麻醉，麻醉成功后迅速斷頭取腦，用LEICA手術(shù)刀片于冰上準確分離出梗死側(cè)腦皮質(zhì)，將其放入預先配置的4 ℃ PBS溶液中漂洗血液，漂洗結(jié)束用濾紙吸干并適量等分稱重，以重量與體積為1∶9的比例加入4 ℃的PBS進行研磨。

WST-1法檢測：研磨結(jié)束后，將各組樣本置于冷凍離心機中以4 ℃、1 500×g的速度離心10 min，使用移液器吸取上清液置于2 ml EP管中。取適量上清液100倍稀釋后，用BCA法測各組樣本的蛋白濃度。篩選條件滿足SOD抑制率在40% ～60%的樣本，根據(jù)測得的蛋白濃度計算各樣本適合的稀釋倍數(shù)，并配置稀釋液分裝（于-80 ℃保存?zhèn)溆茫?。按照總超氧化物歧化酶比色法測試盒（WST-1法）說明書配制試劑并進行實驗操作，測量樣品在450 nm處光密度值（OD值），運用公式計算大鼠腦組織SOD活性。

TBA法檢測：組織樣本研磨結(jié)束后，將其置于冷凍離心機中以4 ℃、10 000×g的速度離心10 min后，使用移液器吸取上清液分裝（于-80 ℃保存?zhèn)溆茫?。按照丙二醛比色法測試盒（TBA法）說明書配制試劑并進行實驗操作。測量樣品在532 nm處OD值，根據(jù)公式計算大鼠腦組織中MDA含量。

1.7 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，符合正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，多組間比較釆用單因素方差分析，方差齊時組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

模型組和電針組大鼠均造模成功。

2.1 電針神庭、百會穴對大鼠Morris水迷宮實驗行為學的影響 三組大鼠第13天逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；模型組大鼠第13天逃避潛伏期長于假手術(shù)組，穿越平臺次數(shù)少于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；電針組大鼠第13天逃避潛伏期短于模型組，穿越平臺次數(shù)多于模型組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；電針組與假手術(shù)組大鼠第13天逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 三組大鼠Morris水迷宮實驗結(jié)果比較（±s）Table 1 Comparison of the results of Morris water maze experiment among three groups of rats

表1 三組大鼠Morris水迷宮實驗結(jié)果比較（±s）Table 1 Comparison of the results of Morris water maze experiment among three groups of rats

注：a表示與假手術(shù)組相比P＜0.01，b表示與模型組相比P＜0.05

組別 只數(shù) 第1 3天逃避潛伏期（s） 穿越平臺次數(shù)（次）假手術(shù)組 6 5.5 9±1.7 0 5.3 3±1.5 1模型組 6 2 4.0 3±2.1 9 a 2.6 7±0.5 2 a電針組 6 7.3 4±1.4 7 b 4.6 7±1.3 7 b F值 1 8 9.6 8 7.8 8 P值 ＜0.0 0 1 0.0 1 2

2.2 電針神庭、百會穴對大鼠腦組織SOD、MDA表達的影響 三組大鼠SOD活性、MDA含量比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；模型組大鼠SOD活性低于假手術(shù)組，MDA含量高于假手術(shù)組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；電針組大鼠SOD活性高于模型組，MDA含量低于模型組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；電針組與假手術(shù)組大鼠SOD活性、MDA含量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 三組大鼠腦組織SOD活性、MDA含量比較（±s）Table 2 Comparison of SOD activity and MDA content in brain tissue among three groups of rats

表2 三組大鼠腦組織SOD活性、MDA含量比較（±s）Table 2 Comparison of SOD activity and MDA content in brain tissue among three groups of rats

注：a表示與假手術(shù)組相比P＜0.01，b表示與模型組相比P＜0.01；SOD=超氧化物歧化酶，MDA=丙二醛

組別 只數(shù) SOD活性（U/mg） MDA含量（μmol/g）假手術(shù)組 6 359.37±29.13 1.25±0.19模型組 6 164.32±27.39a 5.53±0.75a電針組 6 334.93±30.67b 1.54±0.26b F值 80.03 153.39 P值 ＜0.001 ＜0.001

3 討論

缺血性卒中又被稱作腦梗死，是指在內(nèi)外因作用下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的血液供應(yīng)障礙，缺血、缺氧所致的局限性腦組織的缺血性壞死或軟化，進而造成相應(yīng)的神經(jīng)系統(tǒng)功能損傷，當腦組織血液供應(yīng)受阻以后，缺血中心的壞死區(qū)及其周圍的缺血半暗帶會迅速出現(xiàn)在相應(yīng)缺血區(qū)域，此為腦卒中的超早期。在腦卒中超早期以恢復血流灌注、挽救缺血半暗帶為目的的治療方法，可以減小腦梗死的面積。所以，超早期的溶栓治療、機械取栓是最先進的藥物、介入治療方法［17］。盡管恢復血流再灌注是治療的關(guān)鍵，但在臨床實踐中發(fā)現(xiàn)，在缺血基礎(chǔ)上恢復血流后腦組織結(jié)構(gòu)功能損害不但沒有減輕，反而加重甚至出現(xiàn)不可逆性改變的現(xiàn)象，即腦缺血/再灌注損傷。

腦缺血/再灌注損傷的臨床表現(xiàn)為腦損傷和神經(jīng)功能障礙加重，其中約2/3的患者表現(xiàn)出不同程度的認知功能障礙?，F(xiàn)代醫(yī)學研究認為，認知功能是大腦的高級神經(jīng)活動，主要包括注意力、定向力、語言、視空間及執(zhí)行、學習與記憶等方面，其中特別是注意力、記憶力和執(zhí)行功能（即集成多個復雜過程）的損害可能會致殘［18］。《卒中后認知障礙管理專家共識2021》［19］將膽堿酯酶抑制劑多奈哌齊等藥物作為Ⅰ級推薦、A級證據(jù)用于卒中后認知障礙的治療，可改善患者的認知功能和日常生活能力。臨床實踐中認知障礙的康復方法包括認知干預、神經(jīng)調(diào)控技術(shù)、音樂治療、傳統(tǒng)康復方法等，涵蓋多認知領(lǐng)域［20］，但因經(jīng)濟發(fā)展水平和醫(yī)療資源的限制，目前藥物及認知康復療法存在治療價格高、周期長等弊端。針刺對腦卒中后認知障礙的治療有比較深刻的認識和豐富的臨床經(jīng)驗?！吨嗅t(yī)康復臨床實踐指南·腦卒中》［21］中將電針或頭針聯(lián)合認知訓練作為B級證據(jù)推薦給腦卒中后認知障礙患者的臨床治療。

針灸是中醫(yī)學的重要治療方法，不良反應(yīng)少，療效獨特，并且與常規(guī)針刺相比，電針可以將毫針刺激與電生理效應(yīng)結(jié)合，具有施針時程長、刺激量強、針感持久、方便靈活調(diào)整刺激量等優(yōu)點。詹杰等［22］關(guān)于電針治療腦卒中后認知障礙的Meta分析指出，腦卒中后認知功能障礙患者簡易智力狀態(tài)檢查量表評分、蒙特利爾認知評估量表評分、P300波幅和潛伏期及臨床表現(xiàn)在電針治療后有明顯的改善。陳潞婷等［23］指出電針百會、大椎穴可激活神經(jīng)生長因子（NGF）-酪氨酸激酶受體A（TrkA） 信號通路，進而可以改善腦缺血大鼠的學習、記憶障礙。HE等［24］研究發(fā)現(xiàn)電針可通過調(diào)控Wnt/βcatenint通路對MCAO動物模型發(fā)揮神經(jīng)保護作用，進而改善其學習、記憶障礙。

督脈起于胞中，入腦、絡(luò)心腎，為腎精轉(zhuǎn)輸入腦的通路，為人體諸陽之總匯，有“總督諸陽”和“陽脈之?！敝Q?！安∽冊谀X，首取督脈”為治療腦部疾病的首選。神庭穴屬督脈，位置在頭前部入發(fā)際五分處，為督脈、足太陽、陽明之會，能寧神醒腦、降逆平喘，對神經(jīng)系統(tǒng)有治療作用。百會穴是督脈、足太陽之會，其定位在頭頂正中線與雙耳尖連線的交叉處，位居顛頂部，深處為腦之所在，是調(diào)節(jié)大腦功能的要穴。劉芳等［5］關(guān)于一項針刺百會、神庭穴治療腦卒中后認知功能障礙臨床療效的系統(tǒng)評價指出，與單純認知康復訓練或藥物治療相比，針刺治療時取穴包含神庭、百會穴治療認知功能障礙的療效更佳。馮曉東［6］研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中患者的簡易智力狀態(tài)檢查量表、日常生活活動評分在電針神庭、百會穴配合康復訓練治療后較單純康復訓練有顯著改善。黃佳等［7］進行的基礎(chǔ)研究表明，電針神庭、百會穴可調(diào)節(jié)缺血/再灌注損傷后的神經(jīng)炎性反應(yīng)，改善大鼠的學習、記憶能力。馮曉東等［8］、黃金等［9］認為電針神庭、百會穴可通過調(diào)控自噬相關(guān)蛋白的表達，改善腦缺血/再灌注損傷所引起的學習、記憶障礙。臨床及基礎(chǔ)研究均表明電針神庭、百會穴可作為腦缺血/再灌注損傷學習、記憶障礙的一種治療方法。

生理狀態(tài)下，生物組織內(nèi)不僅可產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS）和活性氮（reactive nitrogen species，RNS）等自由基，同時也存在酶抗氧化和非酶抗氧化系統(tǒng)，上述兩者共同維持機體組織的平衡狀態(tài)；但在病理因素的影響下，機體的平衡狀態(tài)被破壞，導致自由基在體內(nèi)異常聚集并產(chǎn)生副作用［25］。腦組織對缺血、缺氧敏感且抗氧化能力弱，自由基對腦組織的攻擊不僅消耗大量抗氧化物質(zhì)，而且會造成蛋白質(zhì)變性、脂質(zhì)過氧化、多核苷酸鏈斷裂，導致細胞結(jié)構(gòu)完整性被破壞，進而影響其正常生理功能［26］。而ROS已被證明是包括學習和記憶在內(nèi)的基本認知功能的關(guān)鍵信號分子，可調(diào)節(jié)如N-甲基-D-天冬氨酸受體依賴性信號傳導、細胞內(nèi)Ca2+的調(diào)節(jié)等涉及長時程增強作用和記憶的信號通路，是信號轉(zhuǎn)導級聯(lián)的重要調(diào)節(jié)劑，其在突觸可塑性和記憶形成中起著重要和必要的作用［27］。SHI等［28］研究發(fā)現(xiàn)針灸可通過抑制腦缺血中煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶介導的ROS的產(chǎn)生而發(fā)揮神經(jīng)保護作用，改善學習、記憶等認知功能障礙。故從自由基代謝異常的角度出發(fā)，尋找治療腦缺血/再灌注損傷學習、記憶障礙的治療方法具有重要的意義。

MDA是自由基與脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物［29］，因有細胞毒性，所以當其大量蓄積時可導致蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)交聯(lián)聚合，進而破壞細胞膜的結(jié)構(gòu)和功能。因MDA與氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化程度呈正相關(guān)［30］，MDA含量可直接反映機體細胞脂質(zhì)過氧化程度，間接反映細胞受自由基攻擊的嚴重程度［31］。細胞抗氧化酶活性水平可間接反映機體清除氧自由基的能力［32-34］。故采用檢測酶活性的變化間接反映機體內(nèi)自由基水平及其抗氧化能力的方法可以避免由自由基性質(zhì)活躍、壽命短、檢測技術(shù)復雜且費時等不利因素導致檢測結(jié)果誤差較大的缺陷。SOD是機體重要的抗氧化酶，在維持機體的氧化平衡狀態(tài)中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。SOD能催化自由基超氧陰離子（O2-）發(fā)生歧化反應(yīng)生成氧和過氧化氫，抑制了黃嘌呤氧化酶催化的WST-1與O2-的反應(yīng)，

使水溶性的甲臜染料生成減少，故可利用此原理通過對產(chǎn)物甲臜染料的分析計算SOD的活性。本實驗結(jié)果顯示，電針神庭、百會穴可提高抗氧化酶SOD活性，減輕大鼠腦組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的蓄積，降低了ROS對細胞結(jié)構(gòu)的破壞，改善腦缺血/再灌注損傷大鼠的學習、記憶功能障礙，發(fā)揮其認知保護作用。侯志濤等［35］在研究電針對腦缺血大鼠學習、記憶障礙的影響時發(fā)現(xiàn)，“智三針”干預可使動物組織內(nèi)SOD活性提高、MDA含量降低，該研究認為電針是通過改善組織內(nèi)氧自由基含量、抑制細胞凋亡而發(fā)揮認知保護作用，改善學習、記憶能力。黎娜等［36］研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)后認知功能障礙老齡小鼠在接受電針大椎、百會穴預處理后，腦組織內(nèi)ROS、MDA含量降低，SOD1、SOD2蛋白表達顯著增加，認為電針預處理可通過降低組織內(nèi)氧化應(yīng)激水平而有效改善術(shù)后認知功能障礙老齡小鼠學習、記憶能力。本實驗研究結(jié)果與上述研究結(jié)果一致，提示電針神庭、百會穴改善腦缺血/再灌注損傷大鼠的學習、記憶功能障礙的機制可能與減輕大鼠腦組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的蓄積，提高抗氧化酶SOD活性，減輕自由基對機體的造成的損傷有關(guān)。

本研究也存在一定的不足之處：由于實驗條件的限制，在MCAO動物模型制備過程中未能采用激光多普勒血流測量儀對動物腦部血流進行實時監(jiān)測，以反映腦組織再灌注血流變化，觀察再灌注后的具體情況。

綜上，電針神庭、百會穴可作為臨床腦卒中認知功能障礙患者治療的借鑒，其理論探討可作為相關(guān)研究的參照。今后可從自由基代謝的角度出發(fā)，從電針神庭、百會穴調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的通路進一步深入研究，以期為腦卒中認知障礙患者提供更多的治療靶點。

作者貢獻：閆曉、LEE JAEMYUNG負責實驗研究的實施、數(shù)據(jù)的收集整理與統(tǒng)計學分析，繪制表格，使論文結(jié)果可視化呈現(xiàn)；張銘、李瑞青、高靜負責實驗研究的可行性分析與實驗管理；閆曉負責文章的構(gòu)思設(shè)計、撰寫和修訂；馮曉東為研究課題提供資金支持、負責文章的質(zhì)量控制及審校，并對文章整體負責，監(jiān)督管理。所有作者確認了文章最終稿。

本文無利益沖突。