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        鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體和酪氨酸磷酸酶抗體檢測(cè)在不同分型糖尿病診斷中的臨床價(jià)值

        2022-06-30 09:26:30巫翠云魏小斌杜梅英范維麗趙慶珠翁雪燕
        大醫(yī)生 2022年11期
        關(guān)鍵詞:糖尿病檢測(cè)

        巫翠云,魏小斌,杜梅英,范維麗,趙慶珠,翁雪燕

        (1.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬海口醫(yī)院檢驗(yàn)科;2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬??卺t(yī)院內(nèi)分泌科,海南海口 570208)

        糖尿病是由遺傳、環(huán)境、行為等多種因素誘發(fā)的代謝性疾病,臨床以胰島素分泌不足或胰島作用障礙為特征,導(dǎo)致血糖水平異常升高。糖尿病呈進(jìn)行性發(fā)展,最終可累及微血管和周圍神經(jīng),導(dǎo)致不良預(yù)后的發(fā)生[1]。而糖尿病的分型診斷是開(kāi)展精準(zhǔn)治療的前提,我國(guó)糖尿病以2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus,T2DM)最為常見(jiàn),該病起病緩慢,臨床具有較大異質(zhì)性[2]。但臨床偶見(jiàn)1型糖尿?。╰ype 1 diabetes mellitus,T1DM)和成人隱匿性自身免疫性糖尿?。╨atent autoimmune diabetes in adults,LADA)。不同分型糖尿病臨床癥狀相似[3],既往報(bào)道顯示,抗體檢測(cè)有助于不同糖尿病分型的鑒別診斷[4]。鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體(ZnT8A)自2007年被發(fā)現(xiàn)以來(lái),有關(guān)其在糖尿病發(fā)病機(jī)制中的認(rèn)識(shí)不斷深入[5],酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)屬Ⅰ型跨膜黏蛋白,有報(bào)道顯示,其在LADA患者中呈異常高表達(dá)[6]。推測(cè)ZnT8A、IA-2A可能有助于糖尿病分型的鑒別診斷。為驗(yàn)證這一結(jié)果,本研究探討兩者在糖尿病分型鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2020年3月至2022年1月中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬海口醫(yī)院收治的314例糖尿病患者,根據(jù)不同分型將患者分為T1DM組(23例,1型糖尿病)、T2DM組(279例,2型糖尿病)和LADA組(12例,成人隱匿性自身免疫性糖尿?。磉x取同期院內(nèi)30例健康體檢者作為對(duì)照組進(jìn)行回顧性分析。T1DM組患者中男性9例,女性14例;年齡12~81歲,平均年齡(53.92±17.64)歲;體質(zhì)量指數(shù)(BMI)20.80~26.50 kg/m2,平均BMI(22.96±1.79)kg/m2;糖尿 病 家族 史7例。T2DM組患者中男性161例,女性118例;年齡15~83歲,平均年齡(52.08±15.72)歲;BMI 21.00~26.20 kg/m2,平均BMI(23.02±1.84)kg/m2;糖尿病家族史72例。LADA組患者中男性8例,女性4例;年齡24~75歲,平均年齡(52.20±15.23)歲;BMI 21.10~26.45 kg/m2,平均BMI(23.34±1.80)kg/m2;糖尿病家族史4例。對(duì)照組研究對(duì)象中男性17例,女性13例;年齡21~75歲,平均年齡(53.16± 14.84)歲;BMI 20.50~26.00 kg/m2,平均BMI(23.12±1.77)kg/m2;空腹血糖在參考范圍內(nèi),無(wú)自身免疫性疾病。4組研究對(duì)象性別、年齡、BMI及糖尿病家族史等一般資料比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05),組間具有可比性。本研究經(jīng)中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)附屬??卺t(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):①患者均符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2017年版)》[7]中糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn);②臨床病例資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①繼發(fā)性糖尿病者;②合并惡性腫瘤者;③妊娠或哺乳期患者;④肝、腎功能嚴(yán)重不全或有嚴(yán)重心、肺基礎(chǔ)疾病者。

        1.2 檢測(cè)方法 ①標(biāo)本采集:抽取研究對(duì)象清晨空腹肘靜脈血3 mL,采用離心機(jī)(科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司,型號(hào):KDC-40型)對(duì)血液標(biāo)本以2 500 r/min離心5 min,取上清液,冷凍保存?zhèn)溆谩"诿庖哂≯E檢測(cè):取出試劑盒,將抗原膜條置于孵育槽內(nèi),每槽加1.5 mL樣本緩沖液,均勻搖晃5 min后棄孵育槽內(nèi)的液體;在每槽內(nèi)加1.5 mL解凍稀釋后的血清樣品,將膜條置于搖擺床,輕微搖晃孵育30 min;棄孵育槽內(nèi)液體,在每槽內(nèi)加1.5 mL清洗緩沖液,將膜條置于搖擺床上,輕微搖晃5 min,去孵育槽內(nèi)液體,重復(fù)洗滌2次;棄孵育槽內(nèi)液體,每槽加1.5 mL稀釋后的酶結(jié)合物,將膜條置于搖擺床上輕微搖晃,孵育30 min;棄孵育槽內(nèi)液體,每槽加1.5mL底物液,在室溫下將膜條置于搖擺床上孵育10 min;棄孵育槽內(nèi)液體,每槽加1.5 mL蒸餾水,室溫下將膜條置于搖擺床上輕微搖晃1 min,棄孵育槽內(nèi)液體,重復(fù)洗滌2次。待膜條干燥后將膜條檢測(cè)帶與標(biāo)準(zhǔn)帶結(jié)果進(jìn)行對(duì)照,記錄檢測(cè)結(jié)果。

        1.3 觀察指標(biāo) ①比較4組研究對(duì)象ZnT8A和IA-2A陽(yáng)性率。②分析ZnT8A和IA-2A在鑒別診斷不同糖尿病分型中的價(jià)值。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以(x)表示,多組間比較行方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示,組間比較行χ2檢驗(yàn)。ZnT8A和IA-2A的診斷價(jià)值采用受試者工作曲線(ROC)分析,結(jié)果以曲線下面積(AUC)表示,以AUC>0.75為準(zhǔn)確性高。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 4組研究對(duì)象ZnT8A和IA-2A陽(yáng)性率比較 T1DM組研究對(duì)象ZnT8A陽(yáng)性率顯著高于其他3組,IA-2A陽(yáng)性率顯著高于T2DM組和對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。T1DM組與LADA組研究對(duì)象IA-2A陽(yáng)性率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

        表1 4組研究對(duì)象ZnT8A和IA-2A陽(yáng)性率比較[例(%)]

        2.2 ZnT8A和IA-2A判斷T1DM價(jià)值分析 分別以ZnT8A、IA-2A及二者聯(lián)合預(yù)測(cè)概率為檢驗(yàn)變量,以是否為T1DM為狀態(tài)變量,繪制ROC曲線,見(jiàn)圖1。ROC分析結(jié)果顯示,ZnT8A與IA-2A單項(xiàng)指標(biāo)對(duì)判斷T1DM具有一定價(jià)值(P<0.05),二者聯(lián)合預(yù)測(cè)概率對(duì)診斷T1DM具有較高準(zhǔn)確性(AUC>0.75,P<0.05),ZnT8A與IA-2A聯(lián)合預(yù)測(cè)概率判斷T1DM的AUC值顯著高于ZnT8A、IA-2A單一指標(biāo)(z=-2.291,1.978;P=0.008,0.014),見(jiàn)表2。

        表2 ZnT8A和IA-2A判斷T1DM價(jià)值分析

        圖1 ZnT8A和IA-2A判斷T1DM的ROC曲線

        3 討論

        近年來(lái),隨著人們物質(zhì)生活水平的不斷提高和生活方式的日益多樣化,糖尿病發(fā)病率呈上升趨勢(shì),糖尿病已成為威脅人們生命健康的嚴(yán)重公共衛(wèi)生問(wèn)題[8]。本研究共選取314例糖尿病患者為研究對(duì)象,其中T2DM患者例數(shù)最多,有279例,占88.85%,與既往報(bào)道一致[9]。隨著人們對(duì)糖尿病認(rèn)知的不斷深入,糖尿病分型也不斷地更新。既往糖尿病分型主要基于患者臨床癥狀和血清胰島素含量,而LADA像是從T2DM向T1DM的過(guò)渡[10]。隨著臨床經(jīng)驗(yàn)的積累和檢測(cè)技術(shù)進(jìn)步,糖尿病自身抗體譜試劑盒出現(xiàn)和推廣,臨床分型傾向于檢測(cè)血清免疫標(biāo)記物表達(dá)情況。患者血清存在糖尿病自身抗體是T1DM和LADA的特點(diǎn)之一。自身抗體免疫學(xué)檢測(cè)被認(rèn)為具有自身免疫性疾病預(yù)測(cè)作用。因而,及時(shí)、準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)體內(nèi)糖尿病自身抗體將有助于糖尿病分型診斷,以最大程度地保護(hù)胰島細(xì)胞功能,延緩病情進(jìn)展。

        ZnT8A主要分布在胰島β細(xì)胞內(nèi)含有胰島素顆粒的囊泡膜上,胰島素顆粒中的Zn2+累積會(huì)影響胰島素的正常分泌、儲(chǔ)存。研究顯示,Zn2+與糖尿病早期發(fā)病的關(guān)系密切,而鋅的轉(zhuǎn)運(yùn)需要大量高效的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體來(lái)完成[11]。ZnT8A通過(guò)影響胰島素中Zn2+聚集,調(diào)節(jié)胰高血糖素和胰島素旁分泌。低鋅血癥在糖尿病患者中較為常見(jiàn),而鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體高表達(dá)多提示鋅含量及顆粒細(xì)胞儲(chǔ)存能力增強(qiáng)。在胰島β細(xì)胞自身免疫反應(yīng)中,ZnT8A屬典型自身抗原,ZnT8A作為異常體液免疫應(yīng)答對(duì)胰島β細(xì)胞進(jìn)行攻擊的重要標(biāo)志[12],可作為其診斷的預(yù)警信息,在T1DM患者出現(xiàn)臨床癥狀之前,可以早期預(yù)測(cè)并指導(dǎo)臨床治療。

        IA -2A代表胰島β細(xì)胞的特異性免疫。這種抗體是自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞的靶分子,主要在腦和胰腺中發(fā)揮作用,能以較高敏感度和特異度反映β細(xì)胞損傷引起的早期發(fā)病[13-14]。LADA早期臨床特點(diǎn)與T2DM類似,成為誤診、漏診的原因[15]。因LADA病程長(zhǎng)、臨床癥狀出現(xiàn)晚,多數(shù)患者在檢測(cè)糖尿病自身抗體時(shí)才發(fā)現(xiàn)體內(nèi)存在自身抗體,此時(shí)患者胰島細(xì)胞已被破壞[16]。

        本研究結(jié)果也顯示,T1DM組研究對(duì)象ZnT8A陽(yáng)性率顯著高于其他3組,IA-2A陽(yáng)性率顯著高于T2DM組和對(duì)照組,提示檢測(cè)ZnT8A與IA-2A可能有助于糖尿病的分型診斷;而進(jìn)一步ROC分析顯示,ZnT8A與IA-2A聯(lián)合預(yù)測(cè)判斷T1DM的敏感度達(dá)0.867,提示兩者聯(lián)合檢測(cè)可彌補(bǔ)IA-2A單項(xiàng)檢測(cè)難以鑒別LADA與T1DM的不足,這對(duì)于糖尿病分型診斷具有重要價(jià)值。

        綜上,ZnT8A與IA-2A與糖尿病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),兩者聯(lián)合檢測(cè)有助于糖尿病分型的診斷和鑒別診斷,具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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