劉小旋，黃德元，吳燕琴，陳少芳

（1.普寧市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科；2.普寧市人民醫(yī)院婦科，廣東揭陽 515300）

生殖道感染不僅影響患者生活質(zhì)量，還可增加不孕癥及異位妊娠的風(fēng)險。研究顯示，生殖道感染發(fā)病率和復(fù)發(fā)率較高[1]，支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，具有球形、桿形、絲狀等多種形態(tài)，女性生殖道支原體感染的發(fā)生直接危害生殖健康，還可成為尿道炎、宮頸癌變等其他疾病的誘因[2]。近年有報(bào)道顯示，陰道微生態(tài)與生殖道支原體感染密切相關(guān)，陰道微生態(tài)失衡將為致病菌的增殖繁衍創(chuàng)造條件[3]，推測陰道微生態(tài)異?？赡芘c支原體感染有關(guān)。為驗(yàn)證上述觀點(diǎn)，本研究分析陰道微生態(tài)與支原體感染的相關(guān)性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年12月至2021年8月普寧市人民醫(yī)院收治的300例陰道炎患者作為研究對象進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)是否伴有支原體感染分為感染組和未感染組，每組150例。感染組患者年齡23～62歲，平均年齡（42.62±15.89）歲；體質(zhì)量指數(shù)（BMI）18.00～26.00 kg/m2，平均BMI（22.72±1.93）kg/m2；病 程5～18 d，平均病程（11.82±3.63）d；文化程度：本科及以上58例，高中62例，初中及以下30例。未感染組患者年齡25～60歲，平均年齡（43.13±16.02）歲；BMI 18.20～25.50 kg/m2，平均BMI（22.28±1.86）kg/m2；病程4～16 d，平均病程（12.25±3.70）d；文化程度：本科及以上54例，高中67例，初中及以下29例。兩組患者年齡、BMI、病程及文化程度比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)普寧市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》[4]有關(guān)陰道炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②有性生活史，但入院前24 h無性生活。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠哺乳期或月經(jīng)期患者；②入院前1周內(nèi)有抗生素使用史或接受陰道沖洗者；③精神意識障礙者；④合并惡性腫瘤者。

1.2 檢測方法 ①標(biāo)本采集。采用無菌棉簽自陰道后穹窿處取陰道分泌物，均取3份標(biāo)本，第1支直接涂片固定，行革蘭染色，再做常規(guī)鏡檢；第2支做支原體培養(yǎng)；第3支做陰道炎五聯(lián)檢。②顯微鏡鏡檢。用生理鹽水涂片，高倍鏡下觀察，按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[5]，依據(jù)觀察到的白細(xì)胞、上皮細(xì)胞及球桿菌表達(dá)水平，記錄陰道清潔度，并記錄病原菌檢測結(jié)果。Ⅰ度：陰道正常菌群，未見病原菌，視野內(nèi)充滿上皮細(xì)胞；Ⅱ度：陰道無病原菌，視野內(nèi)較多上皮細(xì)胞；Ⅲ度：陰道可見病原菌，視野內(nèi)上皮細(xì)胞少見；Ⅳ度：陰道病原菌多，視野內(nèi)無上皮細(xì)胞。再涂1張行革蘭染色，觀察記錄細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果。③陰道微生態(tài)檢測。檢測過氧化氫（H2O2）、凝固酶（GADP）、葡萄糖醛酸苷酶（GUS）、唾液酸苷酶（SNA）及白細(xì)胞酯酶（LE）5項(xiàng)標(biāo)記物，試劑盒購自北京中生金域診斷技術(shù)股份有限公司。分別以H2O2＜2 μmol/L、GADP≥20 U/L、GUS≥15 U/L、SNA≥7 U/L及LE≥9 U/L為結(jié)果陽性。記錄乳桿菌減少發(fā)生率，以乳桿菌分級Ⅱb級、Ⅲ級及H2O2（-）為乳桿菌減少[6]。④支原體檢測。試劑盒購自珠海市麗拓生物科技有限公司，操作按說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較兩組患者陰道微生態(tài)檢測結(jié)果。包括H2O2、GADP、GUS、SNA、LE陽性率。②比較兩組患者臨床特征指標(biāo)。記錄陰道清潔度、pH值及乳桿菌減少發(fā)生情況。③分析陰道微生態(tài)與支原體感染的相關(guān)性。④分析陰道微生態(tài)異常判斷支原體感染的價值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（x）表示，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)；等級資料比較采用秩和檢驗(yàn)，影響因素采用多因素Logistic回歸分析，判斷價值采用受試者工作曲線（ROC）分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者陰道微生態(tài)檢測結(jié)果比較 感染組患者陰道微生態(tài)異常率，顯著高于未感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。感染組患者H2O2、GADP、GUS、SNA及LE陽性率顯著高于未感染組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者陰道微生態(tài)檢測結(jié)果比較[例(%)]

2.2 兩組患者臨床特征指標(biāo)比較 感染組患者陰道分泌物清潔度分級高于未感染組，pH值、乳桿菌減少發(fā)生率高于未感染組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者臨床特征指標(biāo)比較[例(%)]

2.3 支原體感染的多因素Logistic分析 采用Logistic分析支原體感染的相關(guān)因素，結(jié)果顯示H2O2、SNA、LE陽性及乳桿菌減少是支原體感染的獨(dú)立危險因素（P＜0.05），見表3。

表3 支原體感染相關(guān)因素分析

2.4 陰道微生態(tài)異常及乳桿菌減少判斷支原體感染的價值分析 分別以微生態(tài)異常相關(guān)指標(biāo)和乳桿菌減少為檢驗(yàn)變量，以是否為支原體感染為狀態(tài)變量，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，H2O2、SNA、LE陽性、乳桿菌減少及H2O2、SNA、LE聯(lián)合預(yù)測概率對判斷支原體感染具有較高準(zhǔn)確性（P＜0.05），見表4、圖1。

圖1 陰道微生態(tài)異常及乳桿菌減少判斷支原體感染的ROC曲線

表4 微生態(tài)異常與乳桿菌減少判斷支原體感染的價值分析

3 討論

生殖支原體屬柔膜細(xì)菌，可在無生命培養(yǎng)基中生長發(fā)育，其中解脲支原體和人型支原體可造成非淋菌性尿道炎，并可增加宮頸炎、盆腔炎、不孕癥等疾病風(fēng)險，影響女性健康[7]。林亞芬等[8]的報(bào)道認(rèn)為，解脲支原體通過與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，從而促進(jìn)有毒代謝物的產(chǎn)生。近年來隨著生活方式的改變和抗生素耐藥現(xiàn)象的增加，支原體感染發(fā)生率逐年上升[9]。

菌群水平在調(diào)控陰道微生態(tài)狀態(tài)中具有重要作用。健康女性陰道內(nèi)分布有多種正常微生物菌群，與內(nèi)環(huán)境、宿主保持相互制約的動態(tài)平衡，維持機(jī)體正常生理功能。陰道微生態(tài)平衡一旦被打破，則會促進(jìn)致病菌的繁殖，成為細(xì)菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎等的誘發(fā)因素。陰道微生態(tài)異常與支原體感染密切相關(guān)，乳桿菌為陰道優(yōu)勢菌種，可通過刺激宿主局部免疫反應(yīng)和抗菌作用，抑制致病菌增殖。因此，乳桿菌水平的降低可破壞陰道微生態(tài)，增加生殖道支原體感染率。H2O2是乳桿菌代謝產(chǎn)物，乳桿菌和H2O2水平呈顯著正相關(guān)性，H2O2水平降低后對支原體的抑制殺滅作用被削弱[10]。另外，SNA作為溶酶體及細(xì)胞膜上的酶蛋白，其表達(dá)水平與細(xì)菌性陰道疾病的發(fā)生相關(guān)，沈甍[11]也認(rèn)為SNA陽性是支原體感染的危險因素，與本研究結(jié)果一致。此外，LE陽性也是支原體感染的獨(dú)立影響因素，LE活性與白細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)。但也有研究發(fā)現(xiàn)，LE存在假陽性結(jié)果[12]，這可能影響其判斷支原體感染風(fēng)險的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示，各陰道微生態(tài)指標(biāo)對判斷支原體感染具有一定應(yīng)用價值，而聯(lián)合檢測H2O2、SNA、LE將進(jìn)一步提高其判斷的準(zhǔn)確性。

綜上，支原體感染與陰道微生態(tài)密切相關(guān)，聯(lián)合監(jiān)測微生態(tài)指標(biāo)有助于判斷支原體感染風(fēng)險，指導(dǎo)臨床進(jìn)行早期干預(yù)。