趙磊,曲涵婷,孫艷濤,姜大成,馬彧,昝珂
(1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,長(zhǎng)春 130117; 2.四平市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林四平 136000;3.四平市社會(huì)精神病院,吉林四平 136000; 4.吉林師范大學(xué),吉林四平 136000;5.中國(guó)食品藥品檢定研究院,北京 100050)
關(guān)于銀朱,《本草綱目》載“銀朱,乃硫磺同汞升煉而成,其性燥烈,亦能爛齦攣筋,其功過(guò)與輕粉同也。”《本草逢原》載“銀朱,水銀和硫磺煅煉成朱,故專殺蟲治瘡,以毒攻毒而已。觀其同蟹殼燒之,則臭蟲絕跡,和棗肉熏之,則瘡痂頓枯,其性悍烈可知?!薄侗静荼阕x》載“銀朱與輕粉之性,寒溫略異,而主治卻又相同,其燥烈升散較猛,長(zhǎng)于外治,不宜內(nèi)服爾?!标P(guān)于其功能主治:《本草蒙筌》載“殺蟲、虱?!薄夺t(yī)學(xué)入門》“殺瘡蟲,治腦風(fēng),熏歷風(fēng)瘡,能收水去毒?!薄锻饪迫份d“止癢”[1]。銀朱為水銀、硫磺為原料經(jīng)加工而成的硫化物。主含硫化汞。具有攻毒,殺蟲,燥濕,劫痰。主治癰疽腫毒,惡瘡,臁瘡,疥癬[2-3]。
銀朱屬于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第一冊(cè)附錄中藥典未收載的藥材,也是《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥分冊(cè)》成方制劑中未收載藥材。目前,銀朱藥材無(wú)國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),地方標(biāo)準(zhǔn)如上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)(1994 年版)收載銀朱藥材[4-5]。銀朱是冰紅燙傷膏、四十二味疏肝膠囊、四香祛濕丸、九華膏、長(zhǎng)春燙傷膏、解毒消炎紅藥膏、肺熱普清散、十二味冰片散、十三味紅花丸、巴特日七味丸、紅花清肝十三味丸、清肺十八味丸等成方制劑的組方藥材之一,屬于品種倒掛,這極大限制了銀朱藥材的應(yīng)用,嚴(yán)重制約了該品種的深入開發(fā)。與銀朱容易混淆的中藥材有朱砂、靈砂藥材,朱砂與靈砂藥材均主含硫化汞。朱砂的來(lái)源為硫化物類礦物辰砂族辰砂,采挖后,選取純凈者,用磁鐵吸凈含鐵的雜質(zhì),再用水淘去雜石和泥沙,為天然礦物[5]。銀朱與靈砂為人工合成品,銀朱是以水銀、硫磺和氫氧化鉀為原料,經(jīng)加熱升華、水洗后過(guò)濾干燥的硫化汞。靈砂為以水銀和硫黃為原料,經(jīng)人工加熱升華而制成的硫化汞[6-10]。通過(guò)制定銀朱藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),有助于朱砂的鑒別,適用于成方制劑的生產(chǎn)、科研和經(jīng)營(yíng)中對(duì)銀朱的鑒定和質(zhì)量檢驗(yàn),為銀朱的質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制提供全面、科學(xué)、有效的方法和依據(jù),拓展銀朱藥材的應(yīng)用,能夠提高銀朱藥材的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)價(jià)值[11-15]。
X 射線衍射儀:Rigaku D/max-2500 型,日本理學(xué)株式會(huì)社。
超純水器:2001B 型,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。
電子天平:BT125D 型,感量為0.000 1 g,上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠。
硫化汞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))為99%,批號(hào)為20201011,上海阿拉丁生化科技股份有限公司。
鹽酸、硝酸、碘化鉀、氯化鋇、醋酸鉛、醋酸銨、硝酸鉀、高錳酸鉀、硫酸亞鐵、硫酸鐵銨及硫氰酸銨:均為分析純。
硫酸:優(yōu)級(jí)純。
鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液:10 μg/mL,稱取硫酸鐵銨0.863 g,置于1 000 mL 容量瓶中,用水溶解后,加入硫酸2.5 mL,用水稀釋至標(biāo)線,搖勻,作為貯備液。臨用前,精密量取貯備液10 mL,置于100 mL 容量瓶中,加水稀釋至標(biāo)線,搖勻,即得。
銀朱藥材樣品:10 批,規(guī)定批號(hào)為YZ-1~YZ-10,經(jīng)專家鑒定為正品銀朱。
實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
電壓:40 kV;電流:200 mA;Cu 靶;石墨單色器;接收狹縫:0.30 mm;發(fā)散狹縫/防散射狹縫:1°;掃描速率:4°/min;掃描范圍:10~80°。
2.1.1 化學(xué)鑒別
參照中國(guó)藥典2020 年版4 部(通則0301)汞鹽與硫酸鹽的鑒別反應(yīng)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)試驗(yàn)。在參照硫酸鹽鑒別反應(yīng)時(shí),藥典規(guī)定為“硫酸鹽(2)取供試品溶液,滴加乙酸鉛試液,即生成白色沉淀;分離,沉淀在乙酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解”。實(shí)驗(yàn)過(guò)程發(fā)現(xiàn)沉淀在乙酸銨試液中很容易就會(huì)溶解,但在氫氧化鈉試液中溶解較慢。
(1)銅片反應(yīng)。取銀朱粉末,用鹽酸潤(rùn)濕后,在光潔的銅片上摩擦,銅片表面顯銀白色光澤,加熱烘烤后,銀白色消失。此項(xiàng)銅片反應(yīng)的作用為用于鑒別硫化汞。反應(yīng)原理為硫化汞在鹽酸潤(rùn)濕后與銅反應(yīng),生成氯化銅,汞,硫化氫。生成的汞具有銀白色光澤,加熱烘烤后,汞蒸發(fā),銀白色消失。
(2)汞鹽鑒定。取銀朱粉末2 g,加鹽酸-硝酸(體積比為3∶1)的混合溶液2 mL 使溶解,蒸干,加水2 mL 使溶解,濾過(guò),濾液備用。
取備用濾液適量,加入氫氧化鈉試液,即生成黃色沉淀。
取備用濾液,加入碘化鉀試液,即生成猩紅色沉淀,能在過(guò)量的碘化鉀試液中溶解;再以氫氧化鈉試液堿化,加入銨鹽即生成紅棕色的沉淀。
取備用濾液,涂于光亮的銅箔表面,擦拭后即生成一層光亮似銀的沉積物。
(3)硫酸鹽鑒定。取“2.1 汞鹽鑒定”的備用濾液適量,滴加氯化鋇試液,即生成白色沉淀;分離,沉淀在鹽酸或硝酸中不溶解。
取汞鹽鑒定的備用濾液適量,滴加醋酸鉛試液,即生成白色沉淀;分離,沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。
取汞鹽鑒定的備用濾液適量,加入鹽酸,不生成白色沉淀(與硫代硫酸鹽區(qū)別)。
(4)鐵鹽檢查法。取銀朱1 g,加稀鹽酸20 mL,加熱煮沸10 min 放冷,濾過(guò),濾液置于250 mL 容量瓶中,加入氫氧化鈉試液中和后,加水至標(biāo)線。取10 mL,與鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液4 mL 制成的對(duì)照液相比較。因朱砂為合成品,從源頭不會(huì)帶入鐵元素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果未檢出顏色。此項(xiàng)可作為與朱砂藥材鑒別點(diǎn)。
2.1.2 X 射線衍射檢查法
銀朱與朱砂的主要成分均為硫化汞。區(qū)別是銀朱為合成品,朱砂為天然礦物。采用X 射線衍射(XRD)法對(duì)二者進(jìn)行區(qū)分。XRD 法是利用晶體形成的X 射線衍射,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行內(nèi)部原子在空間分布狀況的結(jié)構(gòu)分析方法,其所測(cè)得的基本數(shù)據(jù)是d-I,即衍射面間距-衍射強(qiáng)度。正如人的指紋一樣,每一種晶體都有它自己特征的“d-I”數(shù)據(jù)。每一種晶體的粉末衍射線的分布和強(qiáng)度都有特征的規(guī)律,以此可以作為物相鑒定的基礎(chǔ)。
經(jīng)對(duì)銀朱與朱砂的樣品進(jìn)行XRD 測(cè)定,結(jié)果表明銀朱與朱砂在晶型方面沒有明顯差別。二者均屬于六方晶格,空間群為三方晶系(P3221)。銀朱與朱砂所得衍射數(shù)據(jù)的PDF 卡片均匹配,XRD 檢測(cè)方法無(wú)法在晶型上找到銀朱與朱砂的區(qū)分點(diǎn),目前尚不能作為區(qū)分人工合成朱砂與朱砂的可靠方法。
參照中國(guó)藥典2020 年版朱砂方法進(jìn)行含量測(cè)定。操作方法為“取銀朱約0.3 g,精密稱定,置錐形瓶中,加硫酸10 mL 與硝酸鉀1.5 g,加熱使溶解”。在試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)在水浴反應(yīng)溫度達(dá)不到溶解要求,隨著水浴加熱時(shí)間的增加也未溶解,因此更換為平板加熱,提升測(cè)定溫度時(shí),顏色逐漸變淡,最后溶液變?yōu)闊o(wú)色(但有白色沉淀物),表明溶解完全。因汞蒸氣有毒,測(cè)定時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥里操作。
2.2.1 測(cè)定方法
取銀朱約0.3 g,精密稱定,置錐形瓶中,加入硫酸10 mL 與硝酸鉀1.5 g,加熱使溶解,放冷,加入水50 mL,并加入1%高錳酸鉀溶液至溶液顯粉紅色,再滴加2%硫酸亞鐵溶液至紅色消失,加入硫酸鐵銨指示液2 mL,用0.1 mol/L 硫氰酸銨滴定液滴定。每1 mL硫氰酸銨滴定液相當(dāng)于11.63 mg的硫化汞。
2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
精密稱取硫化汞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),同2.2.1 測(cè)定方法測(cè)定,相關(guān)測(cè)定數(shù)據(jù)見表1。以硫化汞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)理論含硫化汞的量(x)為縱坐標(biāo),實(shí)測(cè)含硫化汞的量(y)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得線性方程為y=0.997 7x-0.108 3,相關(guān)系數(shù)r=0.999 9。
表1 硫化汞標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定數(shù)據(jù) mg
2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取6 份批號(hào)為YZ-1 的銀朱樣品,精密稱定,置錐形瓶中,加硫酸10 mL 與硝酸鉀1.5 g,加熱使溶解,放冷,加水50 mL,分別放置0、2、6、12、14 h,參照2.2.1 測(cè)定方法測(cè)定,測(cè)定結(jié)果列于表2。由表2可知,測(cè)定值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.84%,表明在24 h硫化汞較穩(wěn)定。
表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)
2.2.4 精密度試驗(yàn)
取6 份批號(hào)為YZ-1 的銀朱樣品,批號(hào)為YZ-1,精密稱定,參照2.2.1 測(cè)定方法測(cè)定,測(cè)定結(jié)果列于表3。由表3 可知,測(cè)定平均值為97.19%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.17%,表明精密度良好。
表3 精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)
2.2.5 加標(biāo)回收試驗(yàn)
取銀朱樣品(批號(hào)為YZ-1,硫化汞的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為97.19%)6 份,精密稱定,分別精密加入硫化汞標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)約150 mg,按照2.3.1 方法測(cè)定,結(jié)果列于表4 。由表4 可知,平均加標(biāo)回收率為98.60%,表明本法回收率較好,準(zhǔn)確度較高。
表4 樣品加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果
建立了銀朱的鑒別及硫化汞的含量測(cè)定方法。銀朱在與朱砂鑒定時(shí)因朱砂為天然礦物藥,可作為考察其它金屬元素作為定性鑒別的條件。但與靈砂鑒別時(shí)因都為合成品,合成后都為硫化汞,其鑒別特征有待進(jìn)一步研究。