畢亞菊，楊潔，梁志超

作者單位：石家莊市中醫(yī)院婦科，河北 石家莊 050000

人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是臨床上最常見的性傳播病毒［1］。高危型HPV類型主要 包 括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59等，高危型HPV 感染被認(rèn)為是生殖道腫瘤的主要病因，例如子宮頸癌、外陰癌、陰道癌等。高危型HPV 持續(xù)感染是導(dǎo)致婦科腫瘤發(fā)生的主要原因，近年來其感染率呈逐漸上升趨勢［2］。因此，早期診斷并積極治療高危型HPV 感染具有非常重要的臨床意義，是防控及降低宮頸癌發(fā)生的重要舉措［3］。目前，臨床上尚無高危型HPV 持續(xù)感染的針對性治療方案，而局部用藥是臨床常用的診療方法［4-5］。重組人干擾素是一種臨床常用的抗HPV 的藥物，它具有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗增生的藥理作用，廣泛地應(yīng)用于治療臨床各種類型的HPV 感染，但單一使用臨床療效有限，且易反復(fù)發(fā)作，不良反應(yīng)及耐藥性也是臨床醫(yī)師較為關(guān)注的重點(diǎn)。因此，尋求更為有效、安全性高的治療藥物及方式是目前臨床抗HPV的研究的重點(diǎn)。近年來，中藥栓劑［6］、中藥涂敷［7］及中藥灌洗［5］等中藥外治法及中醫(yī)藥自擬方等已廣泛應(yīng)用在高危型HPV 感染的治療中，且取得較好的臨床效果。中醫(yī)藥廣泛地應(yīng)用于抗HPV 臨床中，具有臨床療效顯著，不良反應(yīng)少，安全性高，病人依從性好的優(yōu)勢［9］。因此，本研究將中醫(yī)的辨證、辨病相結(jié)合，將補(bǔ)腎柔肝方和重組人干擾素聯(lián)合應(yīng)用于高危型HPV 持續(xù)感染的治療中，以期為中醫(yī)藥治療高危型HPV持續(xù)感染提供思路與方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017 年1 月至2019 年12 月在石家莊市中醫(yī)院住院治療的84 例確診的高危型HPV 持續(xù)感染的病人為研究對象。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參考耿建祥等發(fā)布的《HPV 感染疾病相關(guān)問題專家共識(shí)（2017）》［10］，結(jié)合宮頸脫落細(xì)胞液基薄層細(xì)胞檢測、陰道鏡鏡檢診斷為高危型HPV持續(xù)感染。

1.3 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)中醫(yī)診斷參考《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則（試行）》［11］中針對慢性宮頸炎相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，屬于肝腎陰虛證，以帶下量多，色、質(zhì)、味改變?yōu)橹饕Y狀表現(xiàn)，或伴有腰膝酸痛、陰部瘙癢等，舌紅少苔，脈細(xì)數(shù)。

1.4 納入標(biāo)準(zhǔn)①已婚婦女或有性生活史，近段時(shí)間無生育意愿者；②年齡范圍18～60歲；③HPV檢測高危亞型呈現(xiàn)陽性，且2 次或2 次以上為同種高危型HPV感染者；④就診前2周內(nèi)未進(jìn)行相關(guān)治療者；⑤病人或其近親屬簽署知情同意書者。

1.5 排除標(biāo)準(zhǔn)①合并其他系統(tǒng)嚴(yán)重功能障礙性疾病者；②合并衣原體、支原體、霉菌感染等者；③觀察資料不全或未能配合完成研究者；④對治療藥物過敏者；⑤陰道鏡下疑似子宮頸癌前病變。

1.6 給藥方法對照組：給予重組人干擾素α-2b凝膠［兆科藥業(yè)（合肥）有限公司，批號(hào)S20010054］陰道給藥，在病人月經(jīng)干凈后第3 天使用，隔天1 次，1克/次，治療60 d。試驗(yàn)組：在對照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合服用自擬補(bǔ)腎柔肝方治療，方藥組成：熟地黃15 g、山藥12 g、山茱萸12 g、牡丹皮9 g、澤瀉9 g、茯苓9 g、當(dāng)歸9 g、白芍9 g、枸杞子12 g、女貞子9 g、墨旱蓮9 g 等中藥配方顆粒，根據(jù)病人四診情況，適當(dāng)加減配伍，如氣虛加黃芪15 g，黨參10 g；濕熱加黃柏10 g，土茯苓30 g；陽虛加桂枝10 g，烏藥15 g；血瘀加川芎10 g，三棱10 g；氣滯加柴胡10 g，郁金15 g 等，中藥配方顆粒由神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)。病人于月經(jīng)干凈后開始口服，早晚各一次，經(jīng)期停止，服用60 d。

1.7 觀察指標(biāo)

1.7.1治療后各時(shí)間點(diǎn)HPV 的轉(zhuǎn)陰率 分別比較兩組病人治療5 d、10 d、15 d、20 d、25 d、30 d后六個(gè)時(shí)間點(diǎn)HPV的轉(zhuǎn)陰率及總轉(zhuǎn)陰率。

1.7.2臨床療效判定 參考《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則（試行）》［11］將兩組病人臨床療效分為治愈，顯效，有效，無效。治愈：臨床癥狀及體征完全消失，治療后HPV DNA檢測結(jié)果原亞型數(shù)目治療前減少80%以上；顯效：臨床癥狀及體征明顯消失，治療后HPV DNA 檢測結(jié)果原亞型數(shù)目較治療前減少60%～80%；有效：臨床癥狀及體征較前減輕，治療后HPV DNA 檢測結(jié)果原亞型數(shù)目治療前減少30%～60%；無效：臨床癥狀及體征無減輕甚至加重，治療后HPV DNA 檢測結(jié)果原亞型治療前減少30%以下。總有效率=（治愈+顯效+有效）/總例數(shù)×100%

1.7.3不良反應(yīng)發(fā)生率 統(tǒng)計(jì)計(jì)算治療期間兩組病人不良反應(yīng)（瘙癢、惡心嘔吐、腹痛腹瀉等）發(fā)生率。總不良反應(yīng)發(fā)生率=（瘙癢+惡心嘔吐+腹痛腹瀉）/總例數(shù)×100%

1.7.4外周血CD4+，CD8+T 細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值比較 采用三色熒光抗體染色法檢測兩組病人干預(yù)結(jié)束后24 h 內(nèi)外周血CD4+，CD8+T 淋巴細(xì)胞的表達(dá)，比較兩組CD4+，CD8+T 細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值。

1.7.5血清C 反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、降鈣素原（PCT）的比較 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測治療前后病人血清中炎性因子CRP、IL-6、PCT的水平，具體操作步驟參照試劑盒說明書。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，服從正態(tài)分布后，組間采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)、構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組病人一般情況比較兩組研究對象年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、吸煙史、飲酒史等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

表1 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例一般情況比較

2.2 兩組病人治療后不同時(shí)間點(diǎn)HPV 的轉(zhuǎn)陰率比較對照組的總轉(zhuǎn)陰率為61.9%，試驗(yàn)組的總轉(zhuǎn)陰率為83.34%。試驗(yàn)組總轉(zhuǎn)陰率明顯高于對照組（P<0.001）。見表2。

表2 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例各時(shí)間點(diǎn)HPV的轉(zhuǎn)陰率/例（%）

2.3 兩組病人臨床療效及不良反應(yīng)發(fā)生率的比較對照組的總有效率為76.19%，試驗(yàn)組的總有效率為95.24%，試驗(yàn)組總有效率明顯高于對照組（P<0.05）；對照組的總不良反應(yīng)發(fā)生率為14.28%，試驗(yàn)組的總不良反應(yīng)發(fā)生率為4.76%，試驗(yàn)組總不良反應(yīng)發(fā)生率低于對照組（P>0.05）。見表3。

表3 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例臨床療效及不良反應(yīng)情況的比較/例（%）

2.4 兩組病人治療前后外周血免疫相關(guān)指標(biāo)的比較治療前兩組病人外周血CD4+，CD8+T 細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后兩組病人外周血CD8+T 細(xì)胞百分率均較治療前降低，外周血CD4+細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值均較治療前升高（P<0.001）；治療后試驗(yàn)組病人外周血CD8+T 細(xì)胞百分率低于對照組，外周血CD4+細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值高于對照組（P<0.001）。見表4。

表4 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例外周血免疫相關(guān)指標(biāo)比較/±s

表4 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例外周血免疫相關(guān)指標(biāo)比較/±s

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2.5 兩組病人治療前后血清炎性因子水平的比較治療前兩組的CRP、IL-6、PCT 水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后均較治療前均顯著降低（P<0.001），且治療后試驗(yàn)組的CRP、IL-6、PCT 水平較對照組均明顯降低（P<0.001）。見表5。

表5 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例治療前后血液相關(guān)指標(biāo)水平比較/±s

表5 高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染84例治療前后血液相關(guān)指標(biāo)水平比較/±s

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3 討論

宮頸癌是臨床婦科常見惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅女性健康及生命。Ghosh等［12］研究發(fā)現(xiàn)高危型HPV 持續(xù)感染在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。因此，臨床上及早發(fā)現(xiàn)并積極治療HPV 感染意義重大，在預(yù)防婦科腫瘤的發(fā)生具有重要的臨床意義［13］。賈利平等［14］發(fā)現(xiàn)重組人干擾素具有廣譜抗病毒及抑制細(xì)胞增殖等作用，可增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等對HPV 的殺傷力或吞噬能力，抑制組織病毒生長及繁殖，促進(jìn)病人臨床癥狀的改善。但僅局部用藥抗HPV 臨床療效有限，不良反應(yīng)大，易復(fù)發(fā)等缺點(diǎn)，研究發(fā)現(xiàn)臨床上中醫(yī)藥治療高危型HPV感染病人，臨床療效顯著，安全性較高［15-16］。

祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，HPV 感染當(dāng)歸屬于中醫(yī)的“帶下病”范疇，病位主要是肝、腎，與脾、肺相關(guān)。主要病因?yàn)闄C(jī)體素虛，正氣不足，又HPV 侵襲機(jī)體，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)肝腎兩虛，濕、熱、瘀等互結(jié)導(dǎo)致帶下病的發(fā)生。病機(jī)多屬本虛標(biāo)實(shí)，以肝腎兩虛為本，以濕、熱、瘀為標(biāo)，其病纏綿難愈［17-18］。腎為先天之本、生命之源，且主藏精，而精溫煦五臟，是人體生長發(fā)育及生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。腎精不足，無以化生滋養(yǎng)后天之脾，脾臟運(yùn)化障礙，五谷精微不得化生，無法濡養(yǎng)先天之腎。而“女子以肝為先天”，肝主藏血，而經(jīng)、帶、胎、產(chǎn)等均依賴于營血的充盛；肝主疏泄，調(diào)暢氣機(jī)，肝氣郁滯，可致脾虛運(yùn)化失司，進(jìn)而濕邪內(nèi)生，久而濕、毒互結(jié)，戀于帶脈而為病。肝腎同源，是“母”與“子”的關(guān)系，二者相互滋生及制約。故采用補(bǔ)腎柔肝法，可使“肝腎雙補(bǔ)”，女性氣機(jī)調(diào)達(dá)、血脈旺盛，精血重盛以抗邪外出［19］。

本研究所用補(bǔ)腎柔肝法方中熟地黃補(bǔ)血益精填髓，山藥益氣養(yǎng)陰、補(bǔ)腎固精止帶，山茱萸補(bǔ)益肝腎、澀精固脫，牡丹皮可活血化瘀，澤瀉可滲濕化濁，另茯苓健脾滲濕，當(dāng)歸補(bǔ)血、調(diào)經(jīng)止痛，白芍養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、柔肝止痛，枸杞子、女貞子滋補(bǔ)肝腎，墨旱蓮補(bǔ)益肝腎、收斂止癢［20］。以上諸藥合用，共奏補(bǔ)益肝腎、祛濕之功用，促使人體精氣充足，血脈旺盛，氣機(jī)調(diào)達(dá)，以扶正固本，達(dá)到“扶正祛邪”的目的?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，熟地黃多糖具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能的作用，山藥多糖具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能的作用，山茱萸多糖可提高巨噬細(xì)胞吞噬作用，牡丹皮中有效成分五沒食子?；咸烟蔷哂锌共《净钚约坝行С煞值てし?、單萜苷類具有增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用，澤瀉提取物具有利尿作用，茯苓素具有利尿、茯苓多糖具有增強(qiáng)免疫功能及羥甲基茯苓多糖具有抗病毒作用，當(dāng)歸多糖、枸杞多糖及女貞子多糖具有調(diào)節(jié)免疫功能作用，白芍總甙具有免疫調(diào)節(jié)及抗病毒作用，墨旱蓮水提取物具有免疫調(diào)節(jié)作用［21-24］?？v觀全方，補(bǔ)腎柔肝方可提高病人機(jī)體免疫力，增強(qiáng)細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用，有助于更好地促進(jìn)體內(nèi)病毒排除，且部分中藥的抗病毒活性可增強(qiáng)對病毒的殺傷力及生長抑制。因此，補(bǔ)腎柔肝方聯(lián)合應(yīng)用重組人干擾素治療高危型HPV 持續(xù)感染病人臨床療效顯著，但具體的抗HPV 感染的作用機(jī)制還不明確，尚需要進(jìn)一步的深入研究。

綜上所述，補(bǔ)腎柔肝方聯(lián)合重組人干擾素治療高危型人乳頭瘤病毒HPV 持續(xù)感染可可通過提高機(jī)體免疫力、降低血清相關(guān)指標(biāo)水平，提高臨床療效，安全性好，可達(dá)到增效減毒的目的，值得臨床推廣應(yīng)用。