王津津 李慧慧 郭建軍 蔣蕾 李航 武國華

摘要：本文以埃洛石納米管（HNTs）對再生絲素蛋白（RSF）進行共混改性，采用流延法制備了一種新型的生物吸附劑HNTs/RSF復合膜。表征結果表明，25% HNTs/RSF復合膜具有良好的機械性能和熱穩(wěn)定性，其中25% HNTs/RSF復合膜的斷裂強度和斷裂伸長率分別達到（6.67±0.65） MPa和291.17%±16.74%，相比RSF膜分別提高了84.3%和278.2%。通過傅里葉變換紅外光譜（FTIR）和廣角X射線衍射（WAXD）分析表明，HNTs降低了RSF膜的β折疊和結晶度。進一步通過亞甲基藍的吸附實驗表明，增加環(huán)境的堿性或HNTs含量，均有助于提高其吸附性能，在300 min后基本達到吸附平衡。本文基于此制備了具有高吸附性能和優(yōu)異機械性能的HNTs/RSF復合膜，在醫(yī)藥化工廢水處理和生物吸附等領域具有較高的開發(fā)和利用價值。

關鍵詞：再生絲素蛋白;埃洛石納米管;共混改性;力學性能;亞甲基藍;吸附

中圖分類號：TS102.54文獻標志碼：A文章編號： 10017003（2022）06003410

引用頁碼： 061105

DOI： 10.3969/j.issn.1001-7003.2022.06.005（篇序）

基金項目： 江蘇省特聘教授專項基金項目（蘇教師〔2015〕17號）;國家特種農(nóng)產(chǎn)品質量安全風險評價項目（GPFP1801003）

作者簡介：王津津（1997），女，碩士研究生，研究方向為生物材料。通信作者：武國華，研究員，ghwu@just.edu.cn。

印染廢水是一種水質成分復雜、色度高的有機廢水，因其毒性強、難降解、排放到環(huán)境中容易被生物體積蓄、會長期滯留等多種特點成為長期以來醫(yī)藥化工廢水治理中備受關注的難題^[1]。印染廢水的處理方法通常為混凝沉淀法^[2]、生物反應器法^[3]、光催化法^[4]、吸附法^[5]。其中，吸附法具有效率高、對環(huán)境影響小、應用范圍廣、操作簡單、易收集再利用等優(yōu)點。吸附法的原理是依靠分子間的引力或化學鍵之間的作用力，使染料分子能有效地固定在吸附劑表面，從而達到凈化水體的目的^[6]。

埃洛石納米管（Halloysite nanotubes，HNTs）是一種在自然界廣泛存在的低成本天然材料，具有高比表面積和特殊管狀結構。其管狀結構由帶負電荷的SiO₂外表面和帶正電荷的Al（OH）₃內(nèi)表面組成^[7]。另外，其表面大量的羥基有助于HNTs在不同溶劑中更好地分散。因此，HNTs被用于染料吸附、重金屬吸附、藥物傳遞、膜過濾和表面功能化等眾多領域^[8-9]。然而，僅HNTs單一材料，難以在水處理中廣泛應用，因為吸附后的HNTs粉末不易回收，且需要經(jīng)歷漫長和復雜的再處理過程。尋找合適的HNTs應用載體，形成可定向且規(guī)模使用的宏觀固體納米吸附復合材料成了一項重要而有意義的工作。

近年來，再生絲素蛋白（Regenerated silk fibroin，RSF），是一種從蠶繭中提取的再生動物蛋白，也可以從大量廢棄絲織品中獲得^[10]。因它具有優(yōu)異的力學性能、可降解性和生物相容性及環(huán)境友好，而被廣泛應用于服裝、醫(yī)療、化妝品等行業(yè)，并逐漸受到國內(nèi)外科研人員的關注，根據(jù)用途將RSF加工成纖維^[13]、薄膜^[14]、海綿^[15]或微球^[16]等各種材料。此外，再生絲素蛋白具有親水性和兩性特性，已被證明可以有效地與各種有機或無機污染物^[17-18]相互作用，并通過與各種有機或無機填料的結合進一步提高其性能，成為醫(yī)藥化工廢水處理的潛在生物吸附載體。研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)境pH值、溫度、有機溶劑等^[19]對RSF中晶體和β折疊結構有很大的影響，可以通過調節(jié)制備工藝條件，從而獲得一種水穩(wěn)定的材料，在與水污染物相互作用中保持較為穩(wěn)定的結構構象，從而延長使用壽命。

綜上，本文以再生絲素蛋白為固體基質，通過埃洛石納米管的共混改性，采用流延法制備了一種具有高吸附性能和良好機械性能的HNTs/RSF天然復合膜材料。同時，利用不同的表征方法探索HNTs對再生絲素蛋白膜內(nèi)部結構的影響，充分挖掘可再生的絲素蛋白在生物吸附和污染物處理等領域的二次開發(fā)和潛在利用價值。

1 實 驗

1.1 試劑、材料與儀器

甲酸、碳酸鈉、無水氯化鈣、無水乙醇（國藥集團化學試劑有限公司），蠶繭（中國農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)研究所），納米埃洛石（上海阿拉丁有限公司）。

DF-101S磁力攪拌器（鞏義予華儀器有限公司），電熱恒溫鼓風干燥箱（上海榮豐科學儀器有限公司），UV775B紫外分光光度計（上海精密科學儀器有限公司），Thermo Scientific Nicolet iS10傅里葉變換紅外光譜儀（美國賽默飛世爾公司），S-4800場發(fā)射掃描電子顯微鏡（日本日立公司），Pyris 1 TGA熱重分析儀（美國珀金埃爾默公司），Xeuss2.0 X射線散射儀（法國Xenocs公司），Instron-5967萬能材料試驗機（美國Instron公司）。B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

1.2 過 程

1.2.1 RSF溶液的制備

稱取一定量的蠶繭，將其剪成指甲蓋大小的片狀，放入0.05% Na₂CO₃水溶液中，煮沸30 min進行脫膠處理后用去離子水反復漂洗3次去除雜質，上述過程循環(huán)3次。最后將完全脫膠后的絲素置于45 ℃下烘干至恒重，存入塑封袋中備用。

1.2.2 HNTs/RSF復合膜的制備

制備方法根據(jù)文獻[17]，制備流程如圖1所示。分別加入不同質量的HNTs于5% CaCl₂-FA溶液中，室溫下攪拌1 h。之后加入一定量的絲素使其充分溶解，室溫下攪拌4 h，然后將HNTs均勻分散到上述絲素溶液中，使最終HNTs相對絲素質量分數(shù)為5%、10%、15%、20%、25%。將共混液倒入水平的乙烯基模具（直徑60 mm）上澆鑄薄膜;放入通風櫥待甲酸揮發(fā)48 h后，將半成品在凝固浴乙醇中浸泡2 h，以去除CaCl₂和殘留的甲酸;最后將HNTs/RSF復合膜剝?nèi)?，自然風干。

1.2.3 力學性能測試

對添加了不同質量濃度HNTs的RSF膜進行分析，而在測試前破裂或從鉗夾中滑出的樣品被排除在進一步的評估之外。將膜切成50 mm×10 mm的均勻條狀（每個樣品n=5），夾具長度和初始速度分別預設為20 mm和20 mm/min進行力學性能測試。

1.2.4 溶脹率和溶失率測定

采用稱重法測量RSF膜和質量分數(shù)為25%-HNTs/RSF復合膜的溶脹率和溶失率。將復合膜在105℃烘箱中烘干后，稱取一定質量的樣品（W₀），分別置于相同體積的不同pH值溶液中（3、7、11）浸泡24 h，在37 ℃下恒溫振蕩24 h，用濾紙快速吸干表面水分后稱重（W₁），最后置于105 ℃烘箱中烘干稱重（W₂）。溶脹率（SWR）和溶失率（WSR）計算公式如下：

SWR/%=W₁-W₀W₀×100??? （1）

WSR/%=W₀-W₂W₀×100??? （2）

1.2.5 吸附性能測定

選取亞甲基藍染料測試HNTs/RSF復合膜的吸附性能，該實驗在24 ℃下進行，準確稱取一定量的樣品，浸泡在100 mL（40 mg/L）亞甲基藍溶液中，考察pH值、HNTs添加量、接觸時間對染料去除率的影響。亞甲基藍吸附量和去除率的計算公式如下：

q_e=V（c₀-c₁）m??? （3）

R/%=c₀-c₁c₀×100??? （4）

式中：q_e為平衡吸附量，mg/g;V為亞甲基藍水溶液體積，mL;c₀和c₁分別為吸附前初始質量濃度和吸附平衡后的質量濃度，mg/L;m為HNTs/RSF復合膜的投加量，g;R為亞甲基藍去除率，%。

亞甲基藍濃度采用分光光度法測定（最大吸收波長668 nm），標準曲線為y=0.096 2x-0.006 4，R2=0.99;pH值采用PHS-3C型精密pH值計測定。

1.2.6 數(shù)據(jù)分析

所得數(shù)據(jù)用Origin 2017軟件作圖，結果表示為三個平行實驗的平均值±標準差。顯著性檢驗用SPSS 23.0分析處理，Duncan多重比較分析，圖表中不同字母表示差異顯著，p<0.05。

2 結果與分析

2.1 HNTs/RSF復合膜的形貌分析

圖2為HNTs的掃描電鏡和動態(tài)散射（DLS），結果證實HNTs呈管狀形，分布均勻，尺寸為（242.4±34.38） nm。利用掃描電鏡（SEM）分別對RSF膜和HNTs/RSF復合膜的微觀結構進行表征，如圖3所示。相比RSF膜（圖3（a）），HNTs/RSF復合膜（圖3（b））表面較為粗糙，有少量孔洞且可以明顯觀察到納米顆粒的存在。圖3顯示，RSF膜的截面（圖3（c））形成光滑致密且規(guī)則的褶皺形狀，而HNTs/RSF復合膜截面（圖3（d））由于納米顆粒的存在，形成了大量的孔洞和裂紋，同時在這種結構中能夠明顯地觀察到分布均勻的HNTs，這種疏松多孔結構可能會增加一定的表面積，有利于染料等物質的吸附。

2.2 HNTs/RSF復合膜的紅外分析

圖4為RSF膜和HNTs/RSF復合膜的紅外光譜。由圖4可見，1 650 cm^-1和1 620 cm^-1（酰胺I）處，1 230 cm^-1和1 265 cm^-1（酰胺Ⅲ）處顯示出絲素蛋白的特征吸收峰^[20]均存在，說明HNTs并未改變絲素蛋白本身的結構。由于FTIR測試是在開放的環(huán)境中進行的，空氣中的水分子會干擾酰胺Ⅰ和酰胺Ⅱ區(qū)域，但酰胺Ⅲ區(qū)域不受水分子的影響。因此，在本文中，酰胺Ⅲ區(qū)（1 200～1 300 cm^-1）被用來半定量研究每個樣品的蛋白質構象轉變。其中，1 230 cm^-1和1 265 cm^-1處的峰分別是α螺旋/無規(guī)則卷曲和β折疊的吸收。如圖5所示，RSF和HNTs/RSF復合膜中α螺旋/無規(guī)卷曲和β折疊的含量可以看出，HNTs的存在導致β折疊含量明顯降低，其中RSF膜的β折疊含量為45.93%±0.38%，當HNTs含量為25%時，β折疊含量最低，達到35.82%±0.80%。這說明HNTs的加入阻礙了α螺旋/無規(guī)卷曲向β折疊的轉變，或不利于β折疊的形成，可能是由于HNTs的存在導致絲素分子的結構重排，從而影響絲素蛋白的聚集。B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

2.3 HNTs/RSF復合膜的廣角X射線衍射（WAXD）分析

本文進一步采用WAXD分析HNTs對RSF復合膜結構的影響，如圖6所示。2D-WAXD圖明顯顯示，25%-HNTs/RSF復合膜的衍射環(huán)同時具備RSF和HNTs的特征衍射環(huán)。使用Fit2D對2D-WAXD進行積分，得到一維衍射角曲線，并用peakfit進行分峰擬合。如圖7所示，RSF膜顯示在2θ=8.68°、17.06°、20.81°、24.14°、26.75°和30.53°出現(xiàn)結晶衍射峰，其符合silk Ⅱ的β片層結構^[21]。與RSF膜相比，HNTs復合膜中顯示出4個新的衍射峰，為HNTs的特征峰，其中2θ=12.5°、20.0°、25.6°、27.1°。同時，從表1可以看出，HNTs/RSF復合膜的結晶度明顯下降，這與之前β折疊含量變化趨勢一致。這可能是由于HNTs的存在導致周圍的RSF分子運動受限，結晶度下降。利用Scherrer公式^[22]計算晶粒尺寸，（210）（200）和（002）三個晶面分別對應晶粒尺寸在a（鏈間）、b（片層間）和c（纖維軸）方向的大小。結果顯示，由于HNTs的存在，RSF的晶粒體積增大。在RSF分子形成膜的自組裝過程中，HNTs與RSF分子產(chǎn)生相互作用，導致RSF分子運動受限難以形成晶粒。同時，由于納米顆粒的物理吸附作用，形成的小晶粒容易團聚成尺寸更大的晶粒，所以在HNTs/RSF復合膜中形成晶粒少而大的晶體結構^[23]。

2.4 HNTs/RSF復合膜的熱穩(wěn)定性分析

膜的熱穩(wěn)定性是其實際應用的一個重要指標。如圖8所示，本文對RSF和25%-HNTs/RSF復合膜進行熱重分析，得到TGA和DTG曲線。結果顯示，RSF膜和25%-HNTs/RSF復合膜隨著溫度的上升重量損失過程基本相同，且二者均含有20%左右的水分，在熱處理中這些水分很快就被除去。DTG曲線顯示，RSF膜和HNTs/RSF復合膜降解峰分別出現(xiàn)在243.9 ℃和251.5 ℃，所對應的失重率為68.87%和67.33%。與RSF膜相比，HNTs/RSF復合膜失重速率較為緩慢，其熱穩(wěn)定性有所提高，使其具有開發(fā)和應用價值的潛力。

2.5 HNTs/RSF復合膜的力學性能分析

圖9為不同質量分數(shù)的HNTs/RSF復合膜的力學性能測試結果。由圖9可知，當HNTs質量分數(shù)為25%時斷裂強度和斷裂伸長率最高，分別為（6.67±0.65） MPa和291.17%±16.74%。同時，相對于RSF空白膜的斷裂強度和斷裂伸長率僅為（3.62±0.31） MPa和76.88%±10.44%（表2），分別提高了84.3%和278.2%。與RSF相比，HNTs質量分數(shù)少（≤15%）的RSF復合膜在斷裂強度方面無明顯差異，但是其斷裂伸長率有所提高，表現(xiàn)出更好的柔韌性。與Kopp等^[24]報道并制備的絲素膜斷裂強度1.4 MPa、斷裂伸長率30%相比，本文制備的HNTs/RSF復合膜力學性能良好。說明HNTs的添加對絲素蛋白膜的力學性能有積極影響，可有效促進RSF膜的韌性和剛性。結合FTIR和WAXD結果，推測HNTs的存在阻礙了RSF中無規(guī)卷曲和α螺旋構象向β折疊構象的轉變，導致RSF復合膜的結晶度下降，說明無定型區(qū)域的增加是斷裂伸長率上升的主要原因。這與Pan等^[25]提出的納米受限結晶增韌機制相符合，HNTs在RSF基質中充當一個交聯(lián)節(jié)點，與RSF晶粒連接形成交聯(lián)網(wǎng)絡，使再生絲素復合膜的韌性大幅增加。優(yōu)良的機械性能是膜材料在眾多領域應用的前提，同時作為吸附劑其優(yōu)異的韌性也可以在存儲和吸附過程中提供更多的實用和便捷。

2.6 HNTs/RSF復合膜的溶脹率與溶失率

圖10是RSF膜和25%-HNTs/RSF復合膜在不同pH值溶液中浸泡24 h后的溶脹率和溶失率。由圖10（a）可以看出，當溶液pH值由3變?yōu)?的時候，RSF膜的溶脹率由25.4%±3.6%升至59.8%±7.2%，而HNTs/RSF復合膜的溶脹率隨pH值的變化較為穩(wěn)定，且在中性和堿性環(huán)境中都比RSF膜的溶脹率低。另由圖10（b）可以看出，在不同的pH值環(huán)境下，HNTs/RSF復合膜的溶失率與RSF膜相比均有顯著性的降低。在水溶液中純絲素大分子之間的氫鍵易被水與絲素大分子形成的氫鍵取代^[26]，推測是由于HNTs表面的羥基與絲素分子中的羧基和氨基形成分子間氫鍵，提高了復合膜在水中的穩(wěn)定性，從而使絲素蛋白分子溶脹性能和溶失性能降低。說明與RSF膜相比，HNTs/RSF復合膜的溶脹率與溶失率隨pH值的波動較為平緩。

2.7 HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍的吸附性能

本文選取亞甲基藍染料模擬測試HNTs/RSF復合膜的吸附性能。如圖11（a）所示，不同pH值環(huán)境下，25%-HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍吸附能力的影響。隨著pH值的增加，樣品對亞甲基藍的吸附率逐漸上升，從56.18%上升至94.74%，說明堿性環(huán)境更利于HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍的吸附。其中pH 10時該復合膜對亞甲基藍的去除率為94.74%±1.09%，吸附容量為（12.63±0.15） mg/g，為吸附最佳條件。此外，比較不同HNTs質量分數(shù)對RSF復合膜對亞甲基藍的吸附效果。結果表明，納米顆粒質量分數(shù)為25%和30%時對染料的吸附率分別為95.05%±0.56%、95.99%±0.56%，而RSF膜去除率僅為57.04%±1.68%，分別提高了66.63%和68.3%（圖11（b））。說明HNTs的加入提高了RSF膜對亞甲基藍的吸附性能。B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

在pH 10的條件下，進一步考察隨接觸時間變化，25%-HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍的吸附效果，如圖12所示。結果顯示，HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍的吸附過程表現(xiàn)為吸附位點較多的初始階段，染料分子向樣品表面擴散，通過理化特性被快速負載，到60 min后吸附能力下降，進入平衡前的一個緩慢吸附過程，最終在300 min達到吸附平衡。

2.8 吸附等溫線

吸附等溫線模型用于描述恒溫下吸附質和吸附劑之間的關系。本文選用兩種常用的等溫線模型Langumir和Freundlich來分析HNTs/RSF復合膜對亞甲基藍的吸附，實驗結果如圖13所示。

Langumir等溫吸附模型用于表征單分子層吸附過程，計算公式如下：

C_eq_e=1q_mb+C_eq_m（5）

式中：C_e是染料溶液的平衡濃度，mg/L;q_e是染料的平衡吸附量，mg/g;q_m是對應于完整單層覆蓋的最大吸附容量，mg/g;b（L/mg）是Langumir常數(shù)，與結合位點的親和力有關。

Freundlich模型多用于非均相的多分子層吸附，計算公式如下：

lnq_e=lnK_f+1nlnC_e（6）

式中：K_f為Freundlich吸附系數(shù);1/n為Freundlich常數(shù)反映吸附過程的吸附強度，一般認為1/n小于1易于吸附。

表3總結了擬合的Langumir和Freundlich模型參數(shù)。對于亞甲基藍染料模型，Langmir等溫線模型的R2值高于Freundlich模型，表明亞甲基藍染料分子在HNTs/RSF復合膜上的吸附遵循Langmuir的單層表面覆蓋模型。證實本文制備的HNTs/RSF復合膜是一種結構均一的吸附劑，對亞甲基藍的最大吸附量為27.88 mg/g。表4列出了從相關文獻中收集的其他吸收劑對亞甲基藍的吸附程度，以及本文研究的結果。結果表明，HNTs/RSF復合膜具有相當?shù)奈侥芰Γ梢宰鳛橐环N有效的吸附劑用于廢水中染料的去除。

3 結 論

本文采用流延法制備了一種基于可再生絲素蛋白，可控且高效的HNTs/RSF新型復合生物吸附膜。HNTs的加入可有效提高RSF膜的韌性和剛性，當質量分數(shù)為25%時，斷裂強度和斷裂伸長率均為最高，分別為（6.67±0.65） MPa和291.17%±16.74%。FTIR和WAXD分析表明，一定量的HNTs可有效降低絲素膜中β折疊的含量，有利于RSF分子形成晶粒少而大的晶體結構，這可能是導致HNTs/RSF復合膜機械性能提升的原因。吸附結果顯示，調控溶液的pH值或RSF膜中HNTs的質量分數(shù)，均有助于提供更多吸附位點，提高對亞甲基藍的吸附性能，在300 min后基本達到吸附平衡。SEM結果表明，HNTs的加入導致膜表面趨于粗糙，內(nèi)部呈現(xiàn)疏松多孔結構。這種疏松多孔結構是HNTs/RSF復合膜具有優(yōu)異吸附性能的原因之一，同時HNTs/RSF復合膜具有良好的熱穩(wěn)定性。因此，HNTs/RSF復合膜可作為一種可控且高效的生物吸附劑去除廢水中的染料，這種新型的可持續(xù)生物吸附劑在實際應用中具有潛在的應用價值。

參考文獻：

[1]張洛紅， 王文韜， 柴易達， 等. 有機陽離子型絮凝劑處理陰離子印染廢水的研究進展[J]. 印染， 2019， 45（18）： 51-55.

ZHANG Luohong， WANG Wentao， CHAI Yida， et al. Research progress in treatment of anionic dye wastewater with organic cationic flocculants[J]. China Dyeing & Finishing， 2019，45（18）： 51-55.

[2]龔浩珍， 陳秋麗， 劉海葉. 混凝沉淀-水解酸化-生物接觸氧化法處理印染廢水[J]. 廣東化工， 2009， 36（7）： 154-155.

GONG Haozhen， CHEN Qiuli， LIU Haiye. The method of coagulation and sedimentation-hydrolytic acidification-biological contact oxidation for dyeing wastewater treatment[J]. Guangdong Chemical Industry， 2009， 36（7）： 154-155.

[3]JIN Y， WANG D Q， ZHANG W J. Newly designed hydrolysis acidification flat-sheet ceramic membrane bioreactor for treating high-dtrength dyeing wastewater[J]. International Journal of Environmental Research and Public Health， 2019， 16（5）： 777-788.

[4]SURESH P， VIJAYA J J， KENNEDY L J. Photocatalytic degradation of textile-dyeing wastewater by using a microwave combustion-synthesized zirconium oxide supported activated carbon[J]. Materials Science in Semiconductor Processing， 2014， 27（1）： 482-493.B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

[5]張巧利， 徐強， 張媛媛， 等. 磁性介孔碳的制備及對水體中染料的吸附去除[J]. 環(huán)境化學， 2018， 37（11）： 2548-2554.

ZHANG Qiaoli， XU Qiang， ZHANG Yuanyuan， et al. Preparation of magnetic mesoporous carbon and its application for dyes removal from water[J]. Environmental Chemistry， 2018， 37（11）： 2548-2554.

[6]黃月， 宋麗鳳. 吸附法處理染料廢水的研究進展[J]. 染料與染色， 2018， 55（2）： 58-61.

HUANG Yue， SONG Lifeng. Research development of dye wastewater treatment by adsorption method[J]. Dyestuffs and Coloration， 2018， 55（2）： 58-61.

[7]GOURAY M， MAUSUMI M. TiO₂decorated functionalized halloysite nanotubes （TiO₂@HNTs） and photocatalytic PVC membranes synthesis， characterization and its application in water treatment[J]. Scientific Reports， 2019， 9（1）： 4345-4362.

[8]馬智， 王金葉， 高祥， 等. 埃洛石納米管的應用研究現(xiàn)狀[J]. 化學進展， 2012， 24（Z1）： 275-283.

MA Zhi， WANG Jinye， GAO Xiang， et al. Application of halloysite nanotubes[J]. Progress in Chemistry， 2012， 24（Z1）： 275-283.

[9]LIU M， CHANG Y， JING Y， et al. Functionalized halloysite nanotube by chitosan grafting for drug delivery of curcumin to achieve enhanced anticancer efficacy[J]. Journal of Materials Chemistry B， 2016， 4（13）： 2553-2263.

[10]GUO J J， YANG B， MA Q， et al. Photothermal regenerated fibers with enhanced toughness： Silk fibroin/MoS₂nanoparticles[J]. Polymers， 2021， 13（22）： 3937-3951.

[11]侯愛芹， 史雅琪， 謝孔良. 絲素蛋白的提取及其在紡織上的應用進展[J]. 針織工業(yè)， 2009（4）： 63-67.

HOU Aiqin， SHI Yaqi， XIE Kongliang. Extraction of the silk fibroin and its application progress in textiles[J]. Knitting Industries， 2009（4）： 63-67.

[12]明津法， 黃曉衛(wèi)， 寧新， 等. 絲素蛋白材料制備及應用進展[J]. 絲綢， 2021， 58（2）： 20-26.

MING Jinfa， HUANG Xiaowei， NING Xin， et al. Preparation and application of silk fibroin materials[J].Journal of Silk， 2021， 58（2）： 20-26.

[13]馬強， 楊波， 李慧慧， 等. 再生絲素蛋白/納米銫鎢青銅雜化纖維的制備及性能研究[J]. 絲綢， 2021， 58（6）： 9-14.

MA Qiang， YANG Bo， LI Huihui， et al. Preparation and properties of the hybrid fiber made of regenerated silk fibroin/cesium tungsten bronze nanoparticles[J].Juornal of Silk， 2021， 58（6）： 9-14.

[14]LIN Z， MENG Z， MIAO H， et al. Biomimetic salinity power generation based on silk fibroin ion-exchange membranes[J]. ACS Nano， 2021， 15（3）： 5649-5660.

[15]石敏， 陶思潔， 李丹， 等. 面向組織工程應用的再生絲素/海藻酸鈣海綿：制備，表征及體內(nèi)，體外性能研究[J]. 材料導報， 2020， 34（4）： 158-165.

SHI Min， TAO Sijie， LI Dan， et al. Regenerated silk fibroin/calcium alginate sponge for tissue engineering applications： Preparation， characterization and in vivo and in vitro properties[J]. Materials Review， 2020， 34（4）： 158-165.B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

[16]李俊， 許燕， 王梅. 利福平絲素蛋白載藥微球的制備及性能研究[J]. 西北藥學雜志， 2020， 35（1）： 80-84.

LI Jun， XU Yan， WANG Mei. Preparation and properties of rifampicin loaded microspheres[J]. Northwest Pharmaceutical Journal， 2020， 35（1）： 80-84.

[17]SONG P， ZHANG D， YAO X， et al. Preparation of a regenerated silk fibroin film and its adsorbability to azo dyes[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2017， 102： 1066-1072.

[18]DAVIDE M， GIANVITO C， GIOVANNI P， et al. Titanate fibroin nanocomposites： A novel approach for the removal of heavy-metal ions from water[J]. ACS Applied Materials & Interfaces， 2018， 10（1）： 651-659.

[19]CAMPAGNOLO L， MORSELLI D， MAGR， et al. Silk fibroin/orange peel foam： An efficient biocomposite for water remediation[J]. Advanced Sustainable Systems， 2018， 3（1）： 1800097-1800107.

[20]LING S， QI Z， KNIGHT D P， et al. Synchrotron FTIR microspectroscopy of single natural silk fibers[J]. Biomacromolecules， 2011， 12（9）： 3344-3349.

[21]SHEN Y， JOHNSON M A， MARTIN D C. Microstructural characterization of Bombyx mori silk fibers[J]. Macromolecules， 1998， 31（25）： 8857-8864.

[22]UM I C， CHANG S K， KWEON H Y， et al. Wet spinning of silk polymer. Ⅱ. Effect of drawing on the structural characteristics and properties of filament[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2004， 34（1/2）： 107-119.

[23]CAI L， SHAO H， HU X， et al. Reinforced and ultraviolet resistant silks from silkworms fed with titanium dioxide nanoparticles[J]. ACS Sustainable Chemistry & Engineering， 2015， 3（10）： 2551-2557.

[24]KOPP A， SCHUCK L， GOSAU M， et al. Influence of the casting concentration on the mechanical and optical properties of FA/CaCl₂-derived silk fibroin membranes[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2020， 21（18）： 6704-6721.

[25]PAN H， ZHANG Y， SHAO H， et al. Nanoconfined crystallites toughen artificial silk[J]. Journal of Materials Chemistry B， 2014， 2（10）： 1408-1414.

[26]薛豪杰， 劉琳， 胡丹丹， 等. 低溶脹殼聚糖/絲素蛋白復合膜的制備及性能測試[J]. 蠶業(yè)科學， 2011， 37（6）： 1073-1078.

XUE Haojie， LIU Lin， HU Dandan， et al. Fabrication andproperty test of chitosan/silk fibroin composite films with low swelling ratio[J]. Science of Sericulture， 2011， 37（6）： 1073-1078.

[27]SHENVI S S， ISLOOR A M， ISMAIL A F， et al. Humic acid based biopolymeric membrane for effective removal of methylene blue and rhodamine B[J]. Industrial & Engineering Chemistry Research， 2015， 54（18）： 4965-4975.B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

[28]KAVITHA D， NAMASIVAYAM C. Experimental and kinetic studies on methylene blue adsorption by coir pith carbon[J]. Bioresource Technology， 2007， 98（1）： 14-21.

[29]ANIRUDHAN T S， RAMACHANDRAN M. Adsorptive removal of basic dyes from aqueous solutions by surfactant modified bentonite clay （organoclay）： Kinetic and competitive adsorption isotherm[J]. Process Safety & Environmental Protection， 2015， 95： 215-225.

[30]XIAO S， WANG Z， MA H， et al. Effective removal of dyes from aqueous solution using ultrafine silk fibroin powder[J]. Advanced Powder Technology， 2014， 25（2）： 574-581.

Preparation of regenerated silk fibroin protein composite films with adsorption function

WANG Jinjin^1a， LI Huihui^1b， GUO Jianjun^1a，2， JIANG Lei^1b， LI Hang^1a， WU Guohua^1a，b

（1a.College of Biotechnology; 1b.College of Environmental and Chemical Engineering， Jiangsu University of Science and Technology，Zhenjiang 212100， China; 2.College of Agriculture， Anshun University， Anshun 561000， China）

Abstract：Dye wastewater is becoming a serious environmental problem due to its toxicity， unacceptable color， high chemical oxygen demand， and resistance to chemical， photochemical and biological degradation. The release of organic dyes into water systems takes the form of pharmaceutical and chemical wastewater， agricultural runoff， and chemical spills. In order to achieve sustainable development， the research， development， and application of degradable natural polymeric materials-silk proteins， have attracted a lot of attention from researchers in terms of adsorbent substrate materials. China is a large producer and processor of silk， accounting for 65% of the global production of raw silk. During the production and processing of silk， a large amount of trimmings are produced. However， the current unmodified pure silk fibroin protein film has disadvantages such as poor mechanical properties， high water solubility， and instability. Regenerated silk fibroin protein （RSF） is a protein obtained from silkworm cocoons through degumming， dissolving， and dialysis. At the same time， it can be processed into the form of fibers， films， gels， microspheres， etc. Halloysite nanotubes （HNTs） have the advantages of toughness， low cost， high specific surface area， good biocompatibility， and environmental friendliness. It is widely used in cosmetics， drug slow-release， water treatment， and other fields. In this study， RSF was modified by the addition of HNTs to prepare HNTs/RSF composite films with high adsorption and excellent mechanical properties as a potential biosorbent carrier for dye wastewater treatment.B7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8

In this paper， a series of HNTs/RSF composite films were prepared by the coasting method by blending HNTs with RSF solution at mass fractions of 5%， 10%， 15%， 20%， 25%， and 30%， respectively. The effects of different mass fractions of HNTs on the microscopic morphology， secondary structure， crystal structure， thermal stability， and mechanical properties of the RSF films were investigated. With the elongation at the break of the composite membrane as a reference index， the 25%-HNTs/RSF composite film was selected for testing the adsorption performance of methylene blue. This included tests on the effect of HNTs content， pH of the aqueous solution， and contact time on its adsorption performance. The use of HNTs/RSF film for the removal of dye from wastewater， besides being an interesting solution for the disposal of waste silk by the textile industry， also results in environmental， social， and economic benefits. It is found that the addition of HNTs is effective in overcoming the shortcomings of RSF films， such as rigidity and brittleness， as well as water solubility. Scanning electron microscopy （SEM） shows that the addition of HNTs results in a rough surface of the membrane and a loose porous structure inside. The mechanical properties results show that the addition of HNTs can significantly improve the toughness and rigidity of the RSF film. When the content of HNTs is 25%， the breaking strength and elongation at the break of the composite film reach the highest of （6.67±0.65） MPa and 291.17%±16.74%， which are 84.3% and 278.2% higher than those of the RSF film， respectively. Fourier transform infrared spectroscopy （FTIR） and wide-angle X-ray diffraction （WAXD） analysis show that an appropriate amount of HNTs could effectively reduce the content and crystallinity of β-sheets in silk fibroin membranes， which may be the reason for the improved mechanical properties of HNTs/RSF composite membranes. The adsorption experiments of methylene blue show that increasing alkaline or HNTs content of the solution environment could improve the adsorption performance， and the adsorption equilibrium is reached after 300 min.

RSF， a regenerative biological protein， can be obtained from a large number of discarded textiles. Based on this， this work provides a method to prepare multifunctional regenerated silk-based composite membranes with high tenacity and obtain regenerated composite membranes with adsorption properties. The research results can provide reference for basic research such as improving the mechanical properties of regenerated silk-based proteins， and also have high development and utilization value in the fields of pharmaceutical and chemical wastewater treatment and biosorption.

Key words：regenerated silk fibroin; halloysite nanotubes; blend modification; mechanical properties; methylene blue; adsorptionB7CF044E-29E3-4739-8D56-0F70DB4106D8