馬江龍，楊春林，吳玲，曾毅，趙小琪，倪曉君，洪瓊花*

(1.昭通市昭陽區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣服務(wù)中心，云南 昭通 657000；2.瀘水市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，云南 瀘水 673199； 3.綏江縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 綏江 657700；4.水富市兩碗鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村和集體經(jīng)濟(jì)發(fā)展中心，云南 水富 657803；5.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南 昆明 650224)

蛋白質(zhì)是一切生命的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]，其攝入量充足與否對(duì)動(dòng)物正常生命活動(dòng)起著至關(guān)重要的作用，但是，攝入過量的蛋白質(zhì)也會(huì)增加腎臟的負(fù)擔(dān)。雖然我國近幾十年來在羊營養(yǎng)需要量研究方面取得一定成果[2]，但是云南半細(xì)毛羊尚無可借鑒的全套營養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)及參數(shù)[3]。

云南半細(xì)毛羊是我國培育的第一個(gè)粗檔半細(xì)毛羊新品種，毛肉兼用型，產(chǎn)肉性能和產(chǎn)毛性能都很優(yōu)良。在實(shí)際生產(chǎn)中，根據(jù)羊只不同的生理狀態(tài)、生產(chǎn)水平及對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需要特點(diǎn)和規(guī)律，保證給羊提供科學(xué)合理的營養(yǎng)物質(zhì)，使羊的生產(chǎn)潛能得到充分發(fā)揮[4]，同時(shí)又能不浪費(fèi)飼料。因此，科學(xué)系統(tǒng)地研究云南半細(xì)毛羊不同生理階段的各種營養(yǎng)需要，發(fā)展舍飼或半舍飼生產(chǎn)模式，既能進(jìn)一步減少資源浪費(fèi)和緩解我國草原生態(tài)退化的現(xiàn)狀，又能提高氮利用率，降低氮排放對(duì)環(huán)境的污染，同時(shí)提高實(shí)際生產(chǎn)效率，增加養(yǎng)殖場(戶)經(jīng)濟(jì)收入，這對(duì)鞏固脫貧攻堅(jiān)成果，助推鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略實(shí)施具有重要意義。本試驗(yàn)旨在探討不同蛋白質(zhì)水平對(duì)云南半細(xì)毛羊(羯羊)生長期血清生化指標(biāo)的影響，為生長期云南半細(xì)毛羊(羯羊)精準(zhǔn)營養(yǎng)系統(tǒng)研究提供基礎(chǔ)性資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)羊的選擇及試驗(yàn)場地

本試驗(yàn)在云南省巧家縣賴石山種羊場挑選50只體況良好、體重相近、10月齡的云南半細(xì)毛羊(羯羊)拉到昆明易興恒畜牧科技有限責(zé)任公司大群飼養(yǎng)1個(gè)月，讓羊只充分適應(yīng)試驗(yàn)地點(diǎn)氣候環(huán)境。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，將50只羊趕入單欄飼喂欄飼養(yǎng)。預(yù)飼期14 d，預(yù)飼期所有羊飼喂蛋白質(zhì)含量相同的日糧。正試期30 d，在預(yù)飼期結(jié)束第2天，空腹稱量每一只羊體重，隨機(jī)分成5組，每組10只，每只羊單欄飼喂。整個(gè)試驗(yàn)過程在昆明易興恒畜牧科技有限責(zé)任公司完成。

1.2 試驗(yàn)羊日糧

5組試驗(yàn)羊日糧中蛋白質(zhì)水平依次設(shè)計(jì)為：8%、10%、12%、14%、16%，其他營養(yǎng)成分保持一致。試驗(yàn)羊日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羊在試驗(yàn)前進(jìn)行驅(qū)蟲、注射疫苗等處理，將羊舍打掃干凈，并徹底消毒，檢查食槽、水槽等設(shè)施是否正常，無異常情況，再將羊趕入圈舍進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)羊每天飼喂2次，早8:00飼喂1次，下午17:00飼喂1次，自由飲水。飼喂時(shí)先飼喂玉米青貯飼料，再飼喂精料。試驗(yàn)共44d，包括14d預(yù)飼期和30d正試期。在預(yù)飼期，主要是熟悉試驗(yàn)羊飼養(yǎng)管理日程，并記錄各組試驗(yàn)羊的采食量，根據(jù)前一天的采食量，調(diào)整第2天飼喂量，確保飼槽內(nèi)每只羊有10%左右的剩料，預(yù)飼期間，所有試驗(yàn)羊飼喂同樣的日糧，正試期開始換試驗(yàn)日糧。預(yù)飼期結(jié)束后，空腹稱重每一只羊，隨機(jī)分成5組，轉(zhuǎn)為正試期，每天記錄每只羊的采食量，在下午17:00飼喂前，收集每一只羊的剩料并稱重，根據(jù)采食量情況，及時(shí)調(diào)整第2天的飼喂量，確保每一只羊的飼槽內(nèi)有10%左右的剩料。

表1 試驗(yàn)羊日糧組成及營養(yǎng)成分

1.4 樣品采集

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，隨機(jī)選擇每組試驗(yàn)羊5只，用一次性真空采血管抽取前腔靜脈血液5mL左右，靜置30min后，再放入低速離心機(jī)內(nèi)3500r/min離心15min，將上層血清用移液槍轉(zhuǎn)移到1.5mL血清管內(nèi)，放入-20℃冰箱內(nèi)保存待檢。

1.5 指標(biāo)測(cè)定及方法

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)采用速率法測(cè)定；白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)采用終點(diǎn)法測(cè)定；尿素(UREA)采用兩點(diǎn)法測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel電子表格整理統(tǒng)計(jì)后，再用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA法)，用LSD法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P>0.05 表示差異不顯著，P<0.05 表示差異顯著，P<0.01 表示差異極顯著。

2 結(jié)果

日糧中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)生長期云南半細(xì)毛羊(羯羊)血清中生化指標(biāo)的影響見表2。日糧中16%蛋白質(zhì)水平組血清白蛋白的含量明顯高于8%蛋白質(zhì)水平組，提高13.5%，兩組之間差異極顯著(P<0.01)，其他組間差異不顯著(P>0.05)；尿素的含量隨著日糧中蛋白質(zhì)水平的提高而不斷提高，16%蛋白質(zhì)水平組最高，與其他組之間差異極顯著(P<0.01)，8%水平組與10%水平組差異顯著(P<0.05)，12%水平組與14%水平組差異不顯著(P>0.05)；各蛋白質(zhì)水平組的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總蛋白、葡萄糖等4項(xiàng)指標(biāo)雖然有一定的波動(dòng)，但是都不顯著(P>0.05)。

表2 日糧中蛋白質(zhì)水平對(duì)生長期云南半細(xì)毛羊(羯羊)血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

血清生化指標(biāo)作為評(píng)價(jià)動(dòng)物健康與否的重要指標(biāo)之一，經(jīng)常用于評(píng)價(jià)動(dòng)物本身的健康狀況[5]。

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶均存在于組織細(xì)胞中，可在轉(zhuǎn)氨酶的作用下通過轉(zhuǎn)氨基作用參與蛋白質(zhì)的分解合成[6]，其活性的動(dòng)態(tài)變化能反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成與分解情況[7]。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶如果活性升高，意味著動(dòng)物肝臟可能受到損傷。本試驗(yàn)中，日糧中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)云南半細(xì)毛羊血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性并無顯著影響，說明該試驗(yàn)中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)云南半細(xì)毛羊肝臟沒有產(chǎn)生不良影響。

血清白蛋白合成于肝臟，是脊椎動(dòng)物血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)。Young等(1990)研究認(rèn)為，血清中白蛋白含量是衡量動(dòng)物蛋白質(zhì)需要的敏感指標(biāo)[8]。白蛋白作為合成體組織和代謝廢物的載體，隨著動(dòng)物生長代謝活動(dòng)的增強(qiáng)，其濃度也隨之增強(qiáng)[9]。本試驗(yàn)中，隨著日糧中蛋白質(zhì)水平的提高，白蛋白含量有所波動(dòng)，以16%水平組的白蛋白含量最高，且極顯著高于8%蛋白質(zhì)水平組，與其他蛋白質(zhì)水平組均無顯著差異。說明16%水平組的羊機(jī)體代謝活動(dòng)最旺盛。

血清中總蛋白的濃度能夠直觀地反映出機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)合成、代謝等大致狀態(tài)，某種程度上也代表了機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化利用程度和免疫水平[10]，是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)[11]，同時(shí)在一定程度上也可反映飼料蛋白質(zhì)水平。當(dāng)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成作用增強(qiáng)時(shí)，血漿中總蛋白水平較高。本試驗(yàn)中，隨著日糧中蛋白質(zhì)水平的增加，各組血清中總蛋白差異不顯著，其原因可能是總蛋白的沉積還與日糧中的能量、氨基酸平衡等因素有關(guān)。

葡萄糖作為動(dòng)物機(jī)體最直接的供能物質(zhì)，是合成各類蛋白、脂肪、糖原的能量來源，同時(shí)也作為底物參與蛋白質(zhì)的合成[6]。反芻動(dòng)物葡萄糖來源分外源途徑和內(nèi)源途徑，外源途徑是淀粉在小腸以葡萄糖形式直接被吸收，內(nèi)源途徑是由發(fā)酵產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸和乳酸在肝臟異生成葡萄糖。正常情況下，血糖含量變化反映了動(dòng)物機(jī)體對(duì)糖吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)[12]。當(dāng)動(dòng)物機(jī)體內(nèi)葡萄糖供應(yīng)不足時(shí)，反芻動(dòng)物易發(fā)生酮病，嚴(yán)重影響動(dòng)物的生長和健康。本試驗(yàn)中，日糧中不同水平的蛋白質(zhì)含量對(duì)血清中葡萄糖含量影響不顯著，這個(gè)結(jié)果與Sahlu[13]等研究結(jié)果一致，即山羊日糧中蛋白質(zhì)含量達(dá)到維持需要以上，血清中葡萄糖含量不受日糧蛋白質(zhì)水平或羊品種影響。

反芻動(dòng)物血清中尿素氮來源于瘤胃壁吸收的氨氮和機(jī)體組織蛋白質(zhì)分解，與瘤胃內(nèi)氨態(tài)氮濃度相關(guān)。尿素氮是動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的最終產(chǎn)物，血清中尿素氮的含量受日糧中蛋白質(zhì)水平的影響，與體內(nèi)氮沉積、蛋白質(zhì)利用率呈顯著負(fù)相關(guān)，其水平的高低是蛋白質(zhì)與氨基酸之間平衡的重要指標(biāo)，反映了動(dòng)物蛋白質(zhì)代謝狀況。Stanley等研究表明，血清中尿素氮是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)反映蛋白質(zhì)代謝和日糧氨基酸平衡狀況的指標(biāo)[14]。當(dāng)日糧中含氮物質(zhì)增高，或體內(nèi)氨基酸代謝旺盛、組織遭受破壞、核蛋白清除量增加、腎功能障礙和血中尿素不能正常排出等，均會(huì)使血清中尿素氮濃度升高。本試驗(yàn)中，隨著日糧中蛋白質(zhì)水平的提高，血清中尿素氮含量也隨之增加，其中日糧中16%蛋白質(zhì)水平組與其他水平組之間呈現(xiàn)出極顯著的差異。這個(gè)試驗(yàn)結(jié)果與王洪榮等[15]研究的綿羊血清中尿素氮水平與其蛋白質(zhì)和能量進(jìn)食水平密切相關(guān)結(jié)果相一致。

4 結(jié)論

日糧中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)云南半細(xì)毛羊(羯羊)血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總蛋白、葡萄糖等4個(gè)指標(biāo)均無明顯影響；尿素的含量隨著日糧中蛋白質(zhì)水平的增加而增加；日糧中蛋白質(zhì)水平與血清中尿素含量成正相關(guān)。