楊琪 劉彩霞 王靜 毋立華

摘要：目的：建立氣相色譜法測(cè)定酒石酸美托洛爾中間體及環(huán)氧乙烷的含量。方法：采用氣相色譜法，色譜柱為安捷倫DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.53 0mm，3.00 μm），氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），載氣為氮?dú)?，流?.0 ml·min-1，柱溫采用程序升溫，初始溫度為40 ℃，保持3 min，以20 ℃·min-1升溫至240 ℃，保持10 min，采用外標(biāo)法定量。結(jié)果：該檢測(cè)方法對(duì)中間體及環(huán)氧乙烷的分離效果、線性關(guān)系均良好。結(jié)論：本法專屬性強(qiáng)、靈敏度高，可用于酒石酸美托洛爾中間體及環(huán)氧乙烷含量的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法;環(huán)氧乙烷;中間體;酒石酸美托洛爾

酒石酸美托洛爾是β 受體阻滯劑，為治療高血壓、心絞痛的首選藥物[1-2]。酒石酸美托洛爾在各國(guó)藥典中均有收載，但目前尚未檢索到關(guān)于遺傳毒性雜質(zhì)的報(bào)道。酒石酸美托洛爾合成工藝中所用到的起始物料會(huì)引入環(huán)氧乙烷，該成分對(duì)人體毒害較大，具有一定的遺傳毒性和致癌性[3]。合成工藝中的重要中間體[1，2-環(huán)氧-3[4-（2-甲氧基乙基）苯氧基]丙烷]具有警示結(jié)構(gòu)單元，對(duì)人體有安全隱患。故本文通過實(shí)驗(yàn)建立測(cè)定酒石酸美托洛爾中環(huán)氧乙烷及其重要中間體含量的氣相色譜法，能有效檢測(cè)其殘留量情況，防止其對(duì)人體健康造成危害。

1 儀器與試劑

氣相色譜儀（Agilent 7890 A）;自動(dòng)進(jìn)樣器（Agilent G4513A）FID檢測(cè)器;電子分析天平（Mettler XS 205）。

乙腈（天津賽孚瑞科技有限公司）;環(huán)氧乙烷（阿拉?。?中間體（TRC）酒石酸美托洛爾。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

采用安捷倫DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.530 mm，3.00 μm）;進(jìn)樣口溫度為220 ℃;氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）溫度為250 ℃;載氣為氮?dú)?，流速?.0 ml·min-1;柱溫采用程序升溫，初始溫度為40 ℃，保持3min，以20 ℃·min-1升溫至240 ℃，保持10 min;進(jìn)樣體積為5 μl。

2.2 溶液的制備

溶劑 乙腈：水=50：50

對(duì)照品溶液 取環(huán)氧乙烷對(duì)照品、中間體對(duì)照品各適量，加溶劑稀釋制成每1 ml約含1 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

供試品溶液 取酒石酸美托洛爾適量，加溶劑稀釋制成每1 ml約含250 mg的溶液，作為供試品溶液。

2.3 專屬性試驗(yàn)

分別精密量取溶劑及對(duì)照品溶液各5 μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果表明，溶劑無(wú)干擾峰，對(duì)環(huán)氧乙烷及中間體測(cè)定無(wú)干擾，表明本法專屬性強(qiáng)。

2.4 線性關(guān)系試驗(yàn)

精密稱取中間體對(duì)照品約10 mg，置50 ml量瓶中，加乙腈定容至刻度，搖勻，分別精密量取上述溶液及環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.2 mg/ml）各1 ml置10 ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性貯備液;分別精密量取線性貯備液1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5 ml、3.0 ml、3.5 ml各置50 ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性1#～6#溶液，分別精密量取5 μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積A對(duì)濃度C繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。在表1所示線性范圍內(nèi)，各成分的峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

2.7 定量限與檢測(cè)限

取對(duì)照品溶液，加溶劑稀釋制成不同濃度的溶液，依法進(jìn)樣，當(dāng)環(huán)氧乙烷的濃度為0.400 μg·ml-1、中間體的濃度為0.409 μg·ml-1時(shí)，其信噪比約為10，即為其定量限;當(dāng)環(huán)氧乙烷的濃度為0.200 μg·ml-1、中間體的濃度為0.123 μg·ml-1時(shí)，其信噪比約為3，即為其檢測(cè)限。

2.9 回收率試驗(yàn)

精密量取“2.4”項(xiàng)下線性貯備液2.5 ml置10 ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為回收率試驗(yàn)用貯備液;取酒石酸美托洛爾（批號(hào)：20200101，環(huán)氧乙烷及中間體含量均為0）約1250 mg，共9份，精密稱定，置9個(gè)5 ml量瓶中，分別精密加入回收率試驗(yàn)用貯備液0.8 ml、1.0 ml、1.2 ml，各濃度分別配制3份，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

依法測(cè)定并計(jì)算回收率。結(jié)果表明，環(huán)氧乙烷的回收率為100.92%，RSD為2.57%（n=9）;中間體的回收率為100.23%，RSD為1.58%（n=9）。

2.10 樣品測(cè)定

稱取酒石酸美托洛爾（批號(hào)：20200101、20190807、20191024、20191116）各約1250 mg，精密稱定，置5 ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，依法測(cè)定環(huán)氧乙烷及中間體含量，結(jié)果顯示四批樣品中均未檢出環(huán)氧乙烷及中間體。

3 討論

結(jié)合酒石酸美托洛爾的合成路線，因工藝中使用的起始原料有可能會(huì)引入基因毒性雜質(zhì)環(huán)氧乙烷;重要中間體[1，2-環(huán)氧-3[4-（2-甲氧基乙基）苯氧基]丙烷]具有警示結(jié)構(gòu)單元，對(duì)人體有安全隱患;故兩者均按照基因毒性雜質(zhì)的控制策略進(jìn)行控制。按毒理學(xué)關(guān)注閾值1.5 μg/天以酒石酸美托洛爾每日最大劑量400 mg計(jì)算，環(huán)氧乙烷及中間體的限度均為3.75 ppm。

參考文獻(xiàn)：

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