張蕾 徐倚天 劉俐君 趙小波 楊青 李清竹 李成 高嵩 黎丁箕

(達(dá)州市動物疫病預(yù)防控制中心，四川 達(dá)州 635000)

禽流感(Avian influenza，AI)是由A型流感病毒引起的多種禽類易感的傳染病。禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)根據(jù)血凝素(HA)抗原性的不同可分為H1～H18亞型，其中由H5和H7亞型毒株引起的稱之為高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza，HPAI)，病死率可達(dá)100%，被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為須報告動物疫病[1]，被我國列為優(yōu)先防控和重點防范的一類動物疫病[2]，并采取強(qiáng)制免疫的預(yù)防措施。1997年香港首次出現(xiàn)禽流感感染人并致人死亡的事件[3]，此后AIV感染人的事件時有發(fā)生，表明AIV除了可以感染禽類，還可以跨越種間屏障對人類的生命安全造成威脅[2]。近年來，HPAI病毒毒株變異加快，疫情形勢嚴(yán)峻復(fù)雜[4]，四川省境內(nèi)也有報道發(fā)生高致病性禽流感疫情[5]，嚴(yán)重威脅著達(dá)州市養(yǎng)禽業(yè)。為及時掌握達(dá)州市家禽高致病性禽流感免疫效果，達(dá)州市動物疫病預(yù)防控制中心隨機(jī)采集了全市124個場點的1316份雞血清和480份水禽(鴨、鵝)血清進(jìn)行高致病性禽流感免疫抗體監(jiān)測，為科學(xué)防控達(dá)州市高致病性禽流感提供可靠依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本

收集2021年來自達(dá)州市124個場點(包括規(guī)模場、散養(yǎng)戶、市場)的1796份家禽血清，其中雞血清1316份，水禽血清480份。

1.2 主要試劑

禽流感病毒H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)以及H7(Re3株)亞型血凝抑制試驗抗原，均來自哈爾濱國生生物科技有限公司。

1%雞紅細(xì)胞懸液，無菌采集3只無禽流感抗體的健康公雞心臟血，與等體積阿氏液混勻后按常規(guī)方法制備。

1.3 檢測方法

參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》(GB/T 18936-2020)中的血凝試驗和血凝抑制試驗(HA-HI試驗)進(jìn)行操作。

1.4 結(jié)果判定

根據(jù)《國家動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃(2021—2025年)》要求，免疫合格個體的判定標(biāo)準(zhǔn)為抗體滴度≥24，免疫合格群體的判定標(biāo)準(zhǔn)為免疫合格個體數(shù)量占群體總數(shù)的70%(含)以上。

2 結(jié)果

2.1 不同毒株HPAI免疫抗體檢測結(jié)果

2021年，全市共檢測場點124個，3種毒株免疫抗體均合格的場點105個，合格比例為84.68%，其中H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)、H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為86.29%、93.55%、97.58%。共檢測血清1796份，H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)、H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為91.09%、94.82%、97.55%。3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率均為H7亞型(Re3株)最高，H5亞型(Re-12株)次之，H5亞型(Re-11株)最低。

2.2 不同場點類型HPAI免疫抗體檢測結(jié)果

由表1可知，規(guī)模場、散養(yǎng)戶、市場分別檢測場點54個、47個、23個，免疫合格場點的比例分別為88.89%、76.60%、91.30%，其中H5亞型(Re-11株)免疫合格場點的比例分別為88.89%、80.85%、91.30%，H5亞型(Re-12株)免疫合格場點的比例分別為94.44%、89.36%、100%，H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為98.15%、95.74%、100%。由表2可知，規(guī)模場、散養(yǎng)戶、市場分別檢測血清樣品1100份、531份、165份，其中H5亞型(Re-11株)免疫抗體合格率分別為91.55%、89.27%、93.94%，H5亞型(Re-12株)免疫抗體合格率分別為95.09%、93.79%、96.36%，H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為98.00%、96.42%、98.18%。

表1 不同場點類型HPAI免疫抗體合格場點比例

表2 不同場點類型HPAI免疫抗體合格率

3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率從高到低均為市場、規(guī)模場、散養(yǎng)戶。而相同場點類型的免疫合格場點比例最低的均為H5亞型(Re-11株)，免疫抗體合格率從高到低均為H7亞型(Re3株)、H5亞型(Re-12株)、H5亞型(Re-11株)。

2.3 不同動物種類HPAI免疫抗體檢測結(jié)果

由表3可知，雞、水禽分別檢測場點86個、38個，免疫合格場點的比例分別為87.21%、78.95%，其中H5亞型(Re-11株)免疫合格場點的比例分別為88.37%、81.58%，H5亞型(Re-12株)免疫合格場點的比例分別為95.35%、89.47%，H7亞型(Re3株)免疫合格場點的比例分別為97.67%、97.37%。由表4可知，雞、水禽分別檢測血清樣品1316份、480份，其中H5亞型(Re-11株)免疫抗體合格率分別為92.10%、88.83%；H5亞型(Re-12株)免疫抗體合格率分別為95.52%、92.92%；H7亞型(Re3株)免疫抗體合格率分別為97.95%、96.46%。

表3 不同動物種類HPAI免疫抗體合格場點比例

表4 不同動物種類HPAI免疫抗體合格率

3種毒株的免疫合格場點比例和免疫合格率均為雞高于水禽，相同動物種類的免疫合格場點比例和個體合格率從高到低均為H7亞型(Re3株)、H5亞型(Re-12株)、H5亞型(Re-11株)。

3 討論

目前，我國尚未有治療禽流感的特效藥物[6]，因此，禽流感的預(yù)防環(huán)節(jié)顯得尤為重要。做好家禽免疫是防控禽流感最有效的措施，而反映免疫情況的重要依據(jù)是抗體檢測[5]。因禽流感主要流行毒株發(fā)生變化，2021年達(dá)州市開始使用重組禽流感病毒(H5加H7)三價滅活疫苗(H5N1 Re-11株加Re-12株，H7N9-Re3株)疫苗進(jìn)行免疫。本次研究從檢測總體結(jié)果上看，達(dá)州市高致病性禽流感H5亞型(Re-11株)、H5亞型(Re-12株)和H7亞型(Re3株)免疫合格場點比例均超過85%，免疫抗體合格率均在90%以上，表明2021年達(dá)州市高致病性禽流感總體上已建立較好的免疫保護(hù)屏障。

從毒株上來看，高致病性禽流感免疫合格場點比例和免疫抗體合格率均為H7亞型(Re3株)最高，H5亞型(Re-12株)次之，H5亞型(Re-11株)最低。這可能與不同疫苗毒株有不同的免疫原性有關(guān)[7]。

從場點類型上看，無論是免疫合格場點比例還是免疫抗體合格率，都是市場最高，規(guī)模場次之，散養(yǎng)戶最低。造成此現(xiàn)象的原因可能是規(guī)模場生物安全意識較高，飼養(yǎng)管理規(guī)范，專業(yè)技術(shù)水平較高，大多數(shù)堅持程序化免疫[4]，而農(nóng)村散養(yǎng)戶的防疫意識還相對較為淡薄，飼養(yǎng)管理水平欠缺，不能按規(guī)定的日計劃免疫等[8]。

從動物種類上看，雞的免疫抗體水平高于水禽，這可能是由于養(yǎng)殖戶對水禽的重視免疫程度不夠強(qiáng)[5]、水禽本身對禽流感疫苗的免疫應(yīng)答反應(yīng)性稍低等原因造成[9]，也有可能是水禽體內(nèi)含有一些非特異性凝集因子，對雞紅細(xì)胞有非特異性凝集的作用，導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低[10]。

4 建議

達(dá)州市家禽高致病性禽流感整體免疫效果良好，但有個別場點免疫抗體不達(dá)標(biāo)，存在零星散發(fā)禽流感疫情的風(fēng)險。在今后的高致病性禽流感防控工作中，重點關(guān)注水禽、散養(yǎng)戶的免疫和抗體水平監(jiān)測，對群體免疫不達(dá)標(biāo)場點要及時加免和補(bǔ)免，強(qiáng)化免疫屏障；加大高致病性禽流感防控的宣傳培訓(xùn)和技術(shù)指導(dǎo)，增強(qiáng)防疫意識，提升生物安全管理水平；增加水網(wǎng)密集地、活禽販運戶、活禽宰殺點等重點區(qū)域HPAI的監(jiān)測頻次和數(shù)量，進(jìn)一步擴(kuò)大風(fēng)險監(jiān)測點。同時，達(dá)州市處在候鳥遷徙線路的輻射范圍內(nèi)，野生鳥類資源豐富，作為禽流感病毒的天然儲存庫，野生鳥類在禽流感防控中的地位不容小覷[11]，要重視養(yǎng)殖場內(nèi)防鳥設(shè)施的配備，加強(qiáng)野鳥棲息地等鳥類的監(jiān)測力度[12]，有效降低疫情發(fā)生風(fēng)險。