陸燕夏,唐秀嬌,鄭成芳,王月琴

海南西部中心醫(yī)院：1.院感科；2.感染性疾病科；3.檢驗(yàn)科，海南儋州 571700

慢性乙型肝炎是消化科常見(jiàn)疾病，臨床表現(xiàn)為乏力、惡心、肝區(qū)疼痛等癥狀，隨著病情的進(jìn)展還可出現(xiàn)面色灰暗、蜘蛛痣、脾大等，嚴(yán)重者還會(huì)累及其他臟器，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1-2]。因此，對(duì)慢性乙型肝炎進(jìn)行早期篩查診斷對(duì)改善患者預(yù)后具有重要意義。肝組織活檢是臨床確診慢性乙型肝炎的金標(biāo)準(zhǔn)，但活檢屬于創(chuàng)傷性檢查，存在一定的腫瘤種植風(fēng)險(xiǎn)，有學(xué)者提出尋找與疾病相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)對(duì)疾病進(jìn)行診斷[3]。血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)屬于血管生成素蛋白家族，是一種與脂肪組織相關(guān)的蛋白，參與組織血管生成調(diào)節(jié)，在直腸癌等疾病中顯著升高[4]。血管黏附蛋白-1(VAP-1)是一種內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子，能調(diào)節(jié)免疫功能并介導(dǎo)炎性反應(yīng)，可通過(guò)蛋白酶水解為可溶性VAP-1(sVAP-1)參與血液循環(huán)，在肝臟疾病中具有多種功能。高遷移率族蛋白1(HMGB1)是一種非組蛋白核蛋白，能調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄，參與組織修復(fù)，可通過(guò)巨噬細(xì)胞等主動(dòng)釋放，與晚期糖基化終產(chǎn)物受體結(jié)合，從而促進(jìn)炎性反應(yīng)[5-6]。有研究顯示，HMGB1作為一種炎性反應(yīng)后期發(fā)展過(guò)程中的調(diào)節(jié)因子，與乙型肝炎的發(fā)生有密切關(guān)系，但血清ANGPTL2、sVAP-1與慢性乙型肝炎的關(guān)系尚不明確[7]。因此，本研究檢測(cè)了血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1在慢性乙型肝炎中的水平，并分析其診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年3月至2020年3月于本院進(jìn)行治療的94例慢性乙型肝炎患者作為病例組，其中男63例、女31例，年齡35～72歲、平均(50.14±3.52)歲，肝穿刺將患者分為無(wú)纖維化(S0期)15例、低纖維化(S1～S2期)46例、高纖維化(S3～S4期)33例，合并高血壓36例、糖尿病25例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)慢性乙型肝炎的診斷參照文獻(xiàn)[8]中的標(biāo)準(zhǔn)確診；(2)心、腦、腎等器官無(wú)明顯障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他原因引起的肝炎；(2)存在溝通障礙者；(3)患肝臟血管畸形、血管瘤；(4)日常生活能力喪失，完全依賴(lài)他人；(5)依從性較差者；(6)有凝血功能障礙及血液系統(tǒng)病變；(7)伴有間質(zhì)性肺炎或心功能不全。選擇同期于該院體檢的85例體檢健康者作為對(duì)照組，其中男45例、女40例，年齡為33～70歲、平均(50.07±3.32)歲。兩組研究對(duì)象性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

1.2方法 病例組患者于入組后第2天、對(duì)照組研究對(duì)象于體檢時(shí)采集清晨空腹靜脈血，以3 000 r/min離心10 min，離心半徑10 cm，提取上層血清后，置于-20 ℃的冷凍箱內(nèi)存儲(chǔ)以備檢測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平，使用的儀器為東芝GA800生化分析儀，試劑盒由深圳晶美生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平比較 病例組血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平比較

2.2慢性乙型肝炎不同肝纖維分期患者血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平比較 S0期患者血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平明顯低于S1～S2期、S3～S4期患者(P<0.05)，S1～S2期患者血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平明顯低于S3～S4期患者(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 慢性乙型肝炎不同肝纖維分期患者血清ANGPTL2、 sVAP-1、HMGB1水平比較

2.3病例組治療前后血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平比較 治療后病例組血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 病例組治療前后血清ANGPTL2、sVAP-1、 HMGB1水平比較

2.4血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1診斷慢性乙型肝炎的效能分析 ROC曲線(xiàn)分析顯示，血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1診斷慢性乙型肝炎的最佳截?cái)嘀捣謩e為6.06、382.83、50.17 ng/mL。見(jiàn)圖1、表4。

圖1 血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1診斷慢性乙型肝炎的ROC曲線(xiàn)

表4 血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1診斷慢性乙型肝炎的效能

3 討 論

慢性乙型肝炎是由于乙型肝炎病毒感染所致，是導(dǎo)致肝硬化、肝細(xì)胞癌的重要原因之一，現(xiàn)目前已成為威脅人類(lèi)健康的傳染性疾病[9]。目前，臨床治療慢性乙型肝炎以抗病毒為主，但藥物治療效果欠佳，只能抑制HBV復(fù)制，不能徹底殺滅病毒，因此尋找與疾病相關(guān)的血清標(biāo)志物，觀(guān)察其水平變化對(duì)疾病早期診斷具有重要意義。

有研究顯示，血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1在乙型肝炎中表達(dá)較高，參與了疾病的發(fā)展[10]。血清ANGPTL2屬于血管調(diào)節(jié)蛋白超家族，是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的惡性腫瘤相關(guān)血清標(biāo)志物，有高度的促血管生成活性，且在脂肪組織中高表達(dá)。有研究顯示，ANGPTL2正常表達(dá)有利于血管再生，表達(dá)異常則可造成慢性炎性反應(yīng)[11]。國(guó)外研究也顯示，ANGPTL2在2型糖尿病中表達(dá)異常，可能參與了疾病的發(fā)展[12]。本研究結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎患者血清ANGPTL2水平高于健康者，且其水平隨著肝纖維分期的升高而升高。有研究顯示，慢性乙型肝炎與炎癥關(guān)系密切，慢性乙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死，使體內(nèi)多種炎癥介質(zhì)表達(dá)上調(diào)[13]。

VAP-1是氨基脲敏感單胺脫氧酶，具有直接黏附和產(chǎn)生炎癥黏附級(jí)聯(lián)反應(yīng)的功能，被內(nèi)皮細(xì)胞的蛋白酶水解后形成sVAP-1[14]。sVAP-1是一種重要的促炎介質(zhì)，可維持炎性反應(yīng)所造成的免疫損傷，可通過(guò)激活過(guò)氧化酶的活性使機(jī)體產(chǎn)生毒害物質(zhì)，加重機(jī)體的炎癥損傷。目前已有研究證實(shí)，sVAP-1與糖代謝相關(guān)疾病、慢性阻塞性肺疾病等有關(guān)[15]。本研究結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎患者血清sVAP-1水平高于健康者，且其水平隨著肝纖維化分期的升高而升高，分析其機(jī)制可能是因?yàn)槁砸倚透窝椎陌l(fā)生導(dǎo)致肝功能發(fā)生損傷，而sVAP-1能反映肝臟炎性損傷及肝纖維化，因此推測(cè)其可能參與了慢性乙型肝炎的發(fā)生。

HMGB1屬于高遷移率族蛋白，同時(shí)也屬于炎癥細(xì)胞因子家族，具有致炎作用，當(dāng)細(xì)胞受損時(shí)，HMGB1可釋放到細(xì)胞外，引發(fā)單核巨噬細(xì)胞分泌促炎因子，在機(jī)體活動(dòng)中，HMGB1可引導(dǎo)機(jī)體發(fā)生有益的免疫反應(yīng)，緩解組織損傷[16]。有研究顯示，HMGB1與肝纖維化程度關(guān)系密切，可能參與了肝炎、肝癌等疾病的發(fā)生[17]。本研究結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎患者血清HMGB1水平高于健康者，且其水平隨著肝纖維分期的升高而升高，與劉潔等[18]研究結(jié)果相似。分析其機(jī)制可能是因?yàn)槁砸倚透窝椎陌l(fā)生可導(dǎo)致局部壞死，出現(xiàn)肝細(xì)胞大塊或片狀壞死，進(jìn)而造成肝臟損傷，而HMGB1水平升高可造成免疫反應(yīng)過(guò)激，發(fā)生較原發(fā)損傷更為嚴(yán)重的炎性反應(yīng)，從而引發(fā)組織嚴(yán)重?fù)p傷甚至器官衰竭，故而參與慢性乙型肝炎的發(fā)生。

本研究監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，治療后病例組患者血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1水平明顯降低。本研究結(jié)果還顯示：血清ANGPTL2診斷慢性乙型肝炎的AUC為0.764，最佳截?cái)嘀禐?.06 ng/mL；血清sVAP-1診斷慢性乙型肝炎的AUC為0.796，最佳截?cái)嘀禐?82.83 ng/mL；血清HMGB1診斷慢性乙型肝炎的AUC為0.873，最佳截?cái)嘀禐?0.17 ng/mL。這些結(jié)果再一次證實(shí)了血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1在慢性乙型肝炎診斷中具有較高價(jià)值。

綜上所述，血清ANGPTL2、sVAP-1、HMGB1在慢性乙型肝炎患者中水平異常，可作為診斷慢性乙型肝炎的有效指標(biāo)，值得進(jìn)一步探討。