王鯤

北大醫(yī)療魯中醫(yī)院檢驗科，山東淄博 255400

在臨床發(fā)展中，醫(yī)務人員是與患者進行直接接觸的主要人員，導致醫(yī)護人員的手表面微生物污染問題較為嚴重，患者很容易出現感染疾病的情況，不利于患者治療效果的增強，甚至會導致患者發(fā)生院內感染和多重耐藥菌感染等問題。在此基礎上，對醫(yī)護人員的手表明微生物進行檢測尤為重要。以往發(fā)展中，其通常是應用細菌培養(yǎng)法進行，可實現對醫(yī)護人員手部微生物的有效評估和檢測，但是該方法在實際使用過程中，不僅操作時間相對較長，而且進行操作的環(huán)境較為復雜，對檢測效果具有不良影響[1]。臨床中應用三磷酸腺苷生物熒光法，對于醫(yī)務人員的手表面微生物檢驗的效果顯著。該研究選擇2019年12月—2020年12月期間該院50名醫(yī)務人員為例，分析應用三磷酸腺苷生物熒光法的效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院職醫(yī)務人員50名，其中男21名，女29名；年齡23～50歲，平均（37.34±2.34）歲；護理人員28名，醫(yī)生13名，醫(yī)技人員9名。該研究通過醫(yī)院倫理委員會批準。

納入標準：醫(yī)護人員均為該院在職人員；依從性較好；知情相關研究并愿意參與其中。

排除標準：人員依從性較差，難以有效配合相關研究；人員與患者接觸較少。

1.2 方法

給予所有人員ATP熒光微生物檢驗技術，同時將微生物培養(yǎng)方法檢測技術進行應用。在具體實施過程中，主要使用Biotech BT-112D型生物熒光快速檢測儀，并使用BioThema 266-112型ATP生物檢測試劑盒，同時采用ATP提取劑、裂解液、熒光素梅和ATP標準品等。

對菌懸液進行制備，主要以金黃色葡萄球菌為主，將其單個金黃色葡萄球菌菌落進行應用，將其放置在普通的陰陽瓊脂培養(yǎng)基上，選取斜面進行接種，對其進行培養(yǎng)，需要將溫度控制在37℃，并在保溫箱中進行培養(yǎng)，連續(xù)培養(yǎng)24 h后，促進細菌懸液的制備，主要采用生理鹽水對其進行處理，將新鮮斜面上的培養(yǎng)物制作成細菌懸液，從而進行微生物培養(yǎng)法的檢測工作。

ATP生物熒光法檢測：應用Uitansnap ATP采樣器，對醫(yī)務人員的手指進行采樣，采樣部位為手指屈側，主要通過往返涂擦的方式完成采樣，隨后將所采樣的棉試紙插入到取樣器中，將其取樣器上方的塑料閥門進行折斷處理，對其反應液進行震蕩處理，在反應液得以充分反應后，將其放置到ATP生物熒光檢測儀中，使其在容器中反應15 s作用，隨后對其反應結果進行記錄分析，并對其檢測結果進行記錄。

微生物培養(yǎng)法檢測：將《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》作為主要操作規(guī)范，根據具體規(guī)章制度和行為規(guī)范，將采樣棉進行應用，蘸取采樣液，對醫(yī)務人員的指跟向指尖進行涂抹，往返操作，完成后，將其放置在無菌條件下，隨后剪短棉試紙，將其放入10 mL的采樣液中，促進其充分混勻，進行震蕩，隨后選取適量的洗脫液，將其放置在無菌的平皿中進行培育，培養(yǎng)溫度為37℃，采用恒溫培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為48 h，對其數據進行統(tǒng)計記錄。

結果換算：將得出的不同濃度的金黃色葡萄球菌懸液進行制備，制備劑量為50μL，將其放置在離心管中，保證為無菌容器，隨后在其中加入裂解液，裂解液的容量為50μL，將其溶液混勻，隨后放置在室溫環(huán)境中，靜置10 min左右，在其中加入熒光素，熒光素的劑量為400μL，將其快速混勻，隨后應用Biotech生物熒光快速檢測儀，對其RLU值進行第一次測定（M1），隨后在其中加入ATP標準品，劑量為10μL，進行第二次的RLU測定（M2），對其ATP含量進行測定，主要以5M1/(M2-M1)×105為主。

1.3 觀察指標

對兩種檢測方法的檢測結果進行判斷，在結果顯示為手部的細菌總數在10 cfu/cm2以下時為合格，在采用ATP生物熒光檢測法時，其結果顯示為1 amol/cm2以下時為合格。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件處理數據，計量資料符合正態(tài)分布以（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；計數資料以頻數和百分率（%）表示，組間差異比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 金黃色葡萄球菌群含量和ATP含量的關系分析

在其菌數增加時，ATP含量增加。見表1。

表1 金黃色葡萄球菌群含量和ATP含量的關系

2.2 兩種檢測方法的手衛(wèi)生評估情況

在完成相關工作后的醫(yī)護人員手衛(wèi)生檢測中，進行微生物培養(yǎng)，其菌數為（21.22±2.65）cfu/cm2，采用ATP生物法檢驗后，得出ATP含量為（1.82±0.32）amol/cm2，ATP生物檢驗法洗手前后合格率分別為26.00%和60.00%，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=11.791,P=0.001）,兩種檢驗方法的檢驗結果具有一致性，檢驗方法均有效。

表2 兩種檢測方法對洗手前后醫(yī)務人員手衛(wèi)生合格率情況的評估結果分析[n(%)]

3 討論

在醫(yī)院發(fā)展過程中，醫(yī)務人員的手部微生物污染情況較為常見，其很容易導致患者出現安全風險問題，在一定程度上增加了醫(yī)院的交叉感染發(fā)生率，對院內感染的影響較大。在這種情況下，促進醫(yī)院發(fā)展，將醫(yī)務人員的手部微生物污染情況進行評估尤為重要的[2]。醫(yī)務人員的手衛(wèi)生消毒是對醫(yī)院感染問題進行預防的主要措施，尤其針對基礎傳播疾病的預防來說，其衛(wèi)生消毒是一種經濟、方便的方法。在實際發(fā)展中，要想提高醫(yī)務人員的手部衛(wèi)生依從性，還需要醫(yī)院為醫(yī)務人員購買快速、簡單、有效的消毒液，并將其放置在手術間，物品間和門崗等位置，保證方便易取，并將吸收方法進行張貼，給予各種洗手提示，從而保證將醫(yī)務人員的手衛(wèi)生依從性進行有效提高[3]。但是根據相關研究數據結果顯示，醫(yī)務人員的洗手次數雖然得到了提高，但是其對應的細菌培養(yǎng)合格率卻相對較低，表明部分醫(yī)務人員在洗手的過程中，并不按照規(guī)范的洗手步驟操作，尤其針對急診，連臺手術時間相對緊迫，其感染風險更高。要想將醫(yī)務人員的手衛(wèi)生習慣進行強化，提高其手衛(wèi)生措施的執(zhí)行率和正確率，需要對患者的手衛(wèi)生質量進行評估[4-6]。在臨床發(fā)展中，對醫(yī)務人員的手部微生物情況進行評估檢測的主要方法為微生物培養(yǎng)法，這種傳統(tǒng)的細菌培養(yǎng)技術方法，雖可將手衛(wèi)生消毒后的細菌殘存量進行反映，但需要消毒專業(yè)人員的檢驗技能相當熟練，并且對應的培養(yǎng)時間較長，需要在48 h后才能出結果[7-8]，其在實際發(fā)展過程中，會受到患者自身因素的影響，導致其使用受到限制，對臨床應用造成不良影響。在我國醫(yī)學技術得以不斷發(fā)展的情況下，相關研究不斷深入，臨床逐漸應用ATP生物熒光法的檢測，對醫(yī)療器械、醫(yī)務人員和相關物體表面的微生物進行檢測[9-11]。

ATP熒光微生物檢測方法的主要使用原理為所有微生物機體內其ATP的可見程度不一，對其進行熒光素酶的催化，從而使其與ATP發(fā)生一定反應，表現為具有熒光的熒光素氧化產物[12]。與此同時，熒光強度會對體內ATP含量造成影響，在其出現升高情況時，表現為增強，從而可將人體的微生物含量進行有效反映，其也是對人體進行檢測的重要指標[13]。根據相關研究顯示，在將ATP熒光微生物檢測技術進行應用時，對應的ATP熒光微生物檢測方法在醫(yī)療器械清洗方面的效果較好，其與傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)方法進行比較時差異較小，表明ATP熒光微生物檢測方法的臨床應用價值較高[14]。研究顯示，將ATP熒光檢測方法進行應用，對人員洗手前后的合格率進行分析，分別為30.00%和60.00%，數據前后對比差異大，表明ATP熒光檢測法較好。其他學者將ATP熒光檢測法與微生物培養(yǎng)法分別使用，對其洗手前后的合格率進行分析，ATP熒光檢測法的合格率分別為26.00%和58.00%(P＜0.05），而微生物檢驗前后的合格率則分別為28.00%和44.00%（P＜0.05），表明ATP熒光檢測法效果顯著[15]。該研究應用該方法后，其結果顯示：金黃色葡萄球菌菌數表增加時，ATP含量增加。ATP生物檢驗法洗手前后合格率則分別為26.00%和60.00%（P<0.05）。表明ATP熒光微生物檢測方法的使用，在醫(yī)務人員手表面微生物的評估中意義顯著，檢出率較高，臨床應用可靠性較強，在將該檢測技術進行應用過程中，其檢測方法較為便捷，可實現快速取樣，而且檢測速度較快，反應速度快，具有較高的靈敏度，可縮短檢測時間，在臨床中的推廣價值較為顯著。與此同時，其技術的使用還改善和彌補24 h培養(yǎng)技術的滯后性，對臨床指導工作意義顯著。

外科、醫(yī)務人員的日常工作量相對較大，工作任務繁重，很容易導致手衛(wèi)生問題被忽視，進而會導致細菌的傳播。在一般情況下，行政人員與臨床的接觸相對較少，因此該科室的手衛(wèi)生感染發(fā)生率相對較低。因此，醫(yī)院的外科和醫(yī)技科室的醫(yī)務人員對應的手衛(wèi)生合格率較低。而行政科室最高。對人員展開現場調查，發(fā)現醫(yī)技科室的醫(yī)務人員常出現的手衛(wèi)生問題有不戴手套，完成工作后未按要求洗手等。根據研究數據顯示，偶爾進行洗手人員的手衛(wèi)生情況優(yōu)于未進行洗手人員的手衛(wèi)生。因此，醫(yī)院中洗手是對手衛(wèi)生進行控制的主要措施，降低人員的手表面微生物含量。在展開醫(yī)療操作的過程中，大量的病原微生物會通過醫(yī)護人員的手污染相關物品，從而容易導致感染問題的發(fā)生，而且容易將病原菌帶出醫(yī)院以外的環(huán)境中。在這種情況下，需要規(guī)范醫(yī)院對醫(yī)務人員的手衛(wèi)生，加強其行為控制，操作后按要求洗手，勤洗手，保證洗手規(guī)范性，從而保證人員手衛(wèi)生[16]。ATP熒光檢測儀是一種對醫(yī)院醫(yī)護人員進行手衛(wèi)生評估的主要方法，實用性較強，在當前發(fā)展中得到了廣泛認可且應用范圍較為廣泛，主要被應用在醫(yī)藥，生物學和食品工業(yè)等領域，在應用此技術時，其可為患者提供較為直觀的檢測結果，而且檢測速度較快，臨床應用靈敏度高。但實際發(fā)展中，此技術的應用也存在一定的不足，其技術結果并不能表示物體表面的存活細菌量，同時難以有效實現對細菌數量和菌株種類的判斷。在這種情況下，醫(yī)院在開展感染監(jiān)測工作的過程中，需要結合實際的監(jiān)測目的，選擇合理有效的。從而保證檢測方法的實施有效性，對醫(yī)務人員的手衛(wèi)生情況進行有效檢測，根據實際情況，為醫(yī)務人員制訂有效的管理策略，提高其洗手規(guī)范性等，從而保證降低醫(yī)院感染發(fā)生率。

綜上所述，在對醫(yī)務人員的手衛(wèi)生污染情況進行檢測過程中，應用三磷酸腺苷熒光微生物檢驗技術，其臨床應用價值顯著，檢驗準確率較高，可進行推廣使用。