劉端芳

新泰市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心婦女保健科，山東新泰 271200

宮頸癌又被稱為子宮頸癌， 是發(fā)生在宮頸部位的惡性腫瘤， 同時(shí)也是女性生殖道內(nèi)極為常見的婦科腫瘤[1]。人乳頭狀瘤病毒（HPV）是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一[2]。針對(duì)宮頸癌篩查可以進(jìn)一步防止癌病變， 對(duì)女性患者身體健康有重要作用[3]。 HPV E6/E7 mRNA 可以有效評(píng)估癌癥基因的活動(dòng)情況，同時(shí)對(duì)宮頸癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測有重要作用[4]。液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測（TCT）技術(shù)屬于目前針對(duì)宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查中關(guān)鍵性技術(shù)。 兩種技術(shù)均具有良好的宮頸癌篩查價(jià)值，而聯(lián)合HPV E6/E7 mRNA 與TCT 技術(shù)篩查應(yīng)用與單一技術(shù)篩查應(yīng)用相比篩查價(jià)值更高，準(zhǔn)確性更加理想， 同時(shí)更加具有較高的靈敏度， 特異度，對(duì)宮頸癌疾病篩查有較高的臨床價(jià)值[5-6]。 選取2020 年7 月—2021 年7 月于該院進(jìn)行宮頸癌篩查的1 528 例患者為研究對(duì)象， 分別使用HPV E6/E7 mRNA 聯(lián)合TCT 技術(shù)進(jìn)行篩查，探究其在宮頸癌篩查中的價(jià)值。 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院進(jìn)行宮頸癌篩查的1 528 例患者為研究對(duì)象，患者年齡 25~64 歲，平均（48.59±2.26）歲。參與該次醫(yī)學(xué)研究女性均在《知情同意書》簽字。 經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批同意后開展項(xiàng)目研究。 納入標(biāo)準(zhǔn)：①存在陰道分泌物；②白帶異常；③宮頸糜爛、腫物；④接觸性出血；⑤24 h 內(nèi)無性生活；⑥無宮頸放射性治療。 排除標(biāo)準(zhǔn)：①子宮切除者；②出現(xiàn)癌前病變史者；③合并其他腫瘤/癌癥者；④認(rèn)知異常者。

1.2 方法

對(duì)參與該次研究的患者均同時(shí)采集TCT 標(biāo)本以及HPV 標(biāo)本，標(biāo)本采集前叮囑患者不允許進(jìn)行陰道沖洗，同時(shí)也不允許進(jìn)行陰道內(nèi)藥物使用。采集方法：凱普宮頸細(xì)胞收集保存系統(tǒng)與去RNA 酶宮頸細(xì)胞保存系統(tǒng)采集宮頸細(xì)胞標(biāo)本各1 份； 同時(shí)使用陰道擴(kuò)張器進(jìn)行擴(kuò)張后， 采用無菌棉球?qū)m頸分泌物拭去，將TCT 檢測專用采樣裝置放置在患者宮頸鱗柱狀上皮交界處。 以順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3~5 圈后折斷采集器，將其采集樣本放置在細(xì)胞保存液中。

TCT 篩查：在篩查過程中涉及到的技術(shù)：膜式液基超薄細(xì)胞學(xué)和離心沉淀技術(shù)， 對(duì)采集后的宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行固定染色處理， 利用Bethesda 系統(tǒng)診斷宮頸細(xì)胞學(xué)。

按照TBS 國際癌癥協(xié)會(huì)診斷標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)非典型鱗狀細(xì)胞（ASCUS）、惡性病變（NILM）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）等進(jìn)行檢查，上述任一存在則判斷為陽性。

HPV E6/E7 mRNA 篩查：篩查過程中采用PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)， 對(duì) HPV E6/E7 mRNA 進(jìn)行篩查。篩查前通過將樣本進(jìn)行離心處理， 完成離心后將上層清液清除，加入裂解液及蛋白酶，在恒溫狀態(tài)下保持90 min 后將其取出震蕩。 利用信號(hào)放大對(duì)目的mRNA 進(jìn)行放大，同時(shí)加入催化劑實(shí)現(xiàn)病毒雜交，以此生成支鏈DNA 復(fù)合物，利用堿性磷酸酶進(jìn)行標(biāo)記，同時(shí)對(duì)其進(jìn)行發(fā)光值檢測， 當(dāng)相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度(RLUs)比≥1，這種情況下說明HPV E6/E7 mRNA 陽性。

聯(lián)合診斷陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)： HPV E6/E7 mRNA 篩查陽性，TCT 檢查為陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察病理切片陽性情況， 同時(shí)對(duì)比單一檢驗(yàn)及聯(lián)合檢驗(yàn)與病理診斷結(jié)果， 分析不同診斷方案診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。 符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（）來表示，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理切片陽性情況

經(jīng)過病理切片檢查，1 528 例患者宮頸癌篩查中，陽性例數(shù)108 例，陽性率7.07%，陰性例數(shù)1 420例，陰性率92.93%。

2.2 單項(xiàng)檢測、聯(lián)合檢查與病理檢查結(jié)果

聯(lián)合診斷對(duì)于宮頸癌篩查的靈敏度、 特異度及診斷符合率88.89%、96.34%、95.81%，對(duì)比單一診斷數(shù)據(jù)均更為理想，見表1、表2。

表1 單項(xiàng)檢測、聯(lián)合檢查與病理檢查結(jié)果

表2 不同診斷方案診斷效能對(duì)比（%）

3 討論

宮頸癌是現(xiàn)階段女性生殖道內(nèi)最為常見的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重地影響女性身體健康及生命安全。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，世界衛(wèi)生組織在2018 年通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)全球?qū)m頸癌發(fā)病率為13/10 萬， 死亡率7/10 萬， 而同期全球新發(fā)宮頸癌患者數(shù)量超過56.9萬，死亡患者數(shù)量超過31.1 萬[7-8]。 而近年來世界上宮頸癌的發(fā)病率及病死率有明顯的降低， 導(dǎo)致這種情況發(fā)生的主要原因是社會(huì)上加強(qiáng)了對(duì)宮頸癌疾病的健康教育，同時(shí)HPV 疫苗的接種以及宮頸癌篩查工作也大大降低了宮頸癌疾病發(fā)生[9]。盡管宮頸癌發(fā)生情況逐漸減少，但是相關(guān)研究表明，宮頸癌發(fā)病的平均年齡有低齡化、年輕化趨勢。我國宮頸癌發(fā)病最多年齡40~50 歲，峰值年齡60~70 歲。疾病的發(fā)生主要因HPV 感染導(dǎo)致，加之患者如果存在吸煙或者多個(gè)性伴侶， 而且性生活過早或者出現(xiàn)多孕多產(chǎn)以及免疫障礙，均會(huì)增加疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[10]。

疾病在發(fā)生初期癥狀并不明顯， 很容易導(dǎo)致女性忽視自身癥狀， 而局部癥狀主要表現(xiàn)為患者存在接觸性出血，白帶、陰道分泌物異常，除此之外還會(huì)伴隨著其他組織發(fā)生病變， 例如壓迫直腸， 侵犯膀胱、盆腔進(jìn)而造成尿頻，尿急，腹部疼痛等。為保障女性患者機(jī)體健康， 需要進(jìn)一步加大宮頸癌的臨床篩查工作， 通過宮頸癌篩查可以進(jìn)一步對(duì)患者宮頸病變程度及宮頸病變類型進(jìn)行判斷， 同時(shí)還可以為患者提供有效的救治服務(wù)[11-13]?，F(xiàn)階段臨床中針對(duì)宮頸癌篩查的方法主要為HPV 檢測、細(xì)胞學(xué)檢測、陰道鏡檢測及宮頸組織病理學(xué)活檢等方法[14]。 目前分析宮頸癌疾病出現(xiàn)原因主要是持續(xù)性感染高危型HPV病毒造成，HPV E6/E7 作為造成宮頸致癌因子重要內(nèi)容，E6 可以對(duì)抑癌P53 進(jìn)行抑制， 進(jìn)而起到細(xì)胞周期凋亡阻斷工作，除此之外，該物質(zhì)還可以進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤細(xì)胞異常增殖擴(kuò)散提高宮頸癌變風(fēng)險(xiǎn)。 E7同樣可以使細(xì)胞周期異常，促進(jìn)癌細(xì)胞增殖分化[15]。因此在宮頸癌篩查過程中通過HPV E6/E7 檢查可以進(jìn)一步判斷患者感染HPV 病毒后的嚴(yán)重情況，對(duì)于宮頸癌前病變以及相關(guān)疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測有重要作用。 液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測（TCT）是現(xiàn)階段臨床醫(yī)學(xué)中具有高精準(zhǔn)性，較為先進(jìn)的宮頸癌篩查技術(shù)。該種診斷方式需要細(xì)胞學(xué)醫(yī)師進(jìn)行診斷， 不同人員在診斷過程中很容易出現(xiàn)偏差導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，所以在針對(duì)患者疾病篩查過程中需要由2 名或者2 名以上醫(yī)生進(jìn)行檢查復(fù)核， 這樣可以進(jìn)一步提升疾病診斷準(zhǔn)確性[16]。

經(jīng)過病理切片檢查，1 528 例患者宮頸癌篩查中，陽性例數(shù)108 例，陽性率7.07%，陰性例數(shù)1 420例，陰性率92.93%；同時(shí)經(jīng)診斷效能分析，聯(lián)合診斷對(duì)宮頸疾病篩查的靈敏度、 特異度及診斷符合率分別為88.89%、96.34%、95.81%， 較單一診斷更加理想。 陳林龍[17]在其研究中也發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌篩查中采取HPV E6/E7 mRNA 聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測的診斷靈敏度為96.21%，特異度為74.00%；HPV E6/E7 mRNA 靈敏度為 84.26%， 特異度為 63.11%，TCT 檢驗(yàn)靈敏度為71.43%， 特異度為72.02%， 均是HPV E6/E7 mRNA+TCT 檢驗(yàn)效能更高， 這一結(jié)果與該次研究部分結(jié)果高度相似， 進(jìn)一步說明HPV E6/E7 mRNA+TCT 聯(lián)合篩查在宮頸癌篩查中的價(jià)值。

在宮頸癌疾病篩查中使用HPV E6/E7 mRNA檢驗(yàn)聯(lián)合TCT 技術(shù)篩查效果更加理想。 而且使用TCT 檢查可以實(shí)現(xiàn)宮頸癌疾病有效檢出， 在采集樣本后將其直接保存在細(xì)胞保存瓶中， 這樣在一定程度上提升細(xì)胞獲取率， 減少黏液組織及炎癥因子干擾，同時(shí)減少檢測次數(shù)。 薛春芬等[18]在研究中發(fā)現(xiàn)HPV E6/E7 mRNA、TCT 單獨(dú)檢測陽性率，TCT 更加理想， 而且針對(duì)宮頸癌早期病變同樣是兩種篩查方式靈敏度更高，研究結(jié)果與該次研究結(jié)果高度相似，進(jìn)一步說明了HPV E6/E7 mRNA 與TCT 聯(lián)合檢查在宮頸癌篩查中的實(shí)施價(jià)值。

綜上所述，宮頸癌篩查中HPV E6/E7 mRNA 聯(lián)合TCT 篩查效果更加理想，更加利于宮頸疾病診斷，值得臨床推廣使用。