文│李紅艷（貴州省綏陽(yáng)縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

蔣宗仁（貴州省綏陽(yáng)縣畜牧漁業(yè)站）

在長(zhǎng)期實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，畜禽血液采集后，如果畜禽血清分離期間所處的環(huán)境溫度過(guò)低，畜禽血清分離數(shù)量將會(huì)很少，溫度過(guò)低甚至?xí)辜t細(xì)胞破裂并濕氣內(nèi)容物釋放入血漿，使血清發(fā)生溶血現(xiàn)象，也會(huì)使血液中比紅細(xì)胞比重小的纖維蛋白原不能聚集，發(fā)生凝固不全，形成膠凍狀樣品。這些狀態(tài)和現(xiàn)象都會(huì)影響獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷、檢驗(yàn)、檢測(cè)等分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，也會(huì)延誤畜禽疫病的即時(shí)防控、處置。而相關(guān)資料顯示，適宜的環(huán)境溫度（25～37℃）能增加畜禽血清的自然析出。但在畜牧獸醫(yī)工作中，畜禽血清分離時(shí)所處溫度環(huán)境多在自然環(huán)境中，或者在裝有試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，或者在養(yǎng)殖場(chǎng)戶室內(nèi)，這些溫度環(huán)境很可能達(dá)不到所需溫度要求。而且優(yōu)質(zhì)畜禽血清分離的質(zhì)量和數(shù)量除了溫度適宜外，也需要數(shù)小時(shí)的分離時(shí)間（Δt≥1.5小時(shí)），在上述溫度環(huán)境中，等待畜禽血清分離，然后再去采集其他養(yǎng)殖場(chǎng)戶的畜禽血液樣品或運(yùn)輸?shù)浇訕拥攸c(diǎn)極不現(xiàn)實(shí)，這會(huì)給畜牧獸醫(yī)工作者的采樣、送樣、檢測(cè)、監(jiān)測(cè)工作帶來(lái)諸多不便。

一、操作方法

1.當(dāng)環(huán)境溫度t≤10℃時(shí)，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前選用2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，讓箱內(nèi)溫度逐步升高，然后再將采集血液放入箱內(nèi)。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時(shí)后，應(yīng)重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。再重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)1.5～2小時(shí)后，疫苗冷藏箱內(nèi)溫度又降到25℃左右，此時(shí)再重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時(shí)后，應(yīng)重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)的溫度已降到25℃左右。再重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)2～2.5小時(shí)后，疫苗冷藏箱內(nèi)溫度又降到25℃左右，此時(shí)再重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時(shí)后，重新?lián)Q4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，如上級(jí)部門在短時(shí)間內(nèi)需帶走血清，或者畜牧獸醫(yī)工作者在短時(shí)間內(nèi)急需檢測(cè)血清樣品，則在畜禽血液采集前直接將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時(shí)后，重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，因?yàn)檫m度高溫能加快畜禽血清的分離，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥1.5小時(shí)后用移液器提取血清即可。

2.當(dāng)10℃≤環(huán)境溫度≤20℃時(shí)，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，讓箱內(nèi)溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內(nèi)。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時(shí)后，應(yīng)重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。在重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)2～2.5小時(shí)后，疫苗冷藏箱內(nèi)溫度又降到25℃左右，此時(shí)再重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時(shí)后，應(yīng)重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已經(jīng)降到25℃左右。再重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)2～2.5小時(shí)后，疫苗冷藏箱內(nèi)溫度又降到25℃左右，此時(shí)再重新?lián)Q3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時(shí)后，應(yīng)重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前直接用4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時(shí)后，重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥1.5小時(shí)后用移液器提取血清即可。

3.當(dāng)20℃≤環(huán)境溫度≤25℃時(shí)，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，讓箱內(nèi)溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內(nèi)。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時(shí)后，重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。再重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)1.5～2小時(shí)后，疫苗冷藏箱內(nèi)溫度又降到25℃左右，此時(shí)再重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時(shí)后，應(yīng)重新更換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，此時(shí)疫苗冷藏箱內(nèi)溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。

（3）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前，直接將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時(shí)后，重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，讓疫苗冷藏箱內(nèi)溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥1.5小時(shí)后用移液器提取血清即可。

4.當(dāng)25℃≤環(huán)境溫度≤33℃時(shí)，如果不急需分離畜禽血清，直接將血液放在只有泡沫試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥4小時(shí)后用移液器提取血清即可。如果畜禽血液在疫苗冷藏箱內(nèi)靜置過(guò)夜，第二天再用移液器提取，血清質(zhì)量和數(shù)量更佳。如果急需分離畜禽血清，直接用2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶試管架的疫苗冷藏箱內(nèi)，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時(shí)后，重新?lián)Q2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內(nèi)，讓疫苗冷藏箱內(nèi)溫度維持在37℃左右。然后等畜禽血液進(jìn)入疫苗冷藏箱內(nèi)Δt≥1.5小時(shí)后用移液器提取血清即可。

二、注意事項(xiàng)

（1）裝有畜禽血液的疫苗冷藏箱在運(yùn)輸途中應(yīng)輕拿輕放，盡量避免劇烈晃動(dòng)，否則會(huì)使紅細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)釋放入血漿，并引發(fā)溶血現(xiàn)象，降低血清質(zhì)量，影響畜禽血清學(xué)試驗(yàn)分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

（2）為避免燙壞血液、血清，裝有100℃開水的礦泉水瓶應(yīng)和采集的血液樣品保持5厘米以上的距離。

（3）為了使析出的畜禽血清質(zhì)量和數(shù)量更佳，如果不急需帶走血清或用于緊急血清學(xué)檢測(cè)，畜禽血液盡量放在疫苗冷藏箱內(nèi)靜置過(guò)夜，第二天再用移液器提取血清。

三、小結(jié)

該畜禽血清分離方法簡(jiǎn)單易行、使用靈活、能隨機(jī)應(yīng)變所處環(huán)境溫度，為畜禽血液采樣人員隨時(shí)可以在不同采樣地點(diǎn)間移動(dòng)，采集更多畜禽血液樣品提供方便，提高了工作效率。該方法幾乎無(wú)經(jīng)濟(jì)成本卻能產(chǎn)生更高質(zhì)量和數(shù)量的澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物、稍黏稠的優(yōu)質(zhì)畜禽血清，提高了畜禽血清析出效率，為畜禽血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷、檢測(cè)、檢驗(yàn)提供了更可靠的原料保證，加快了畜禽動(dòng)物疫病檢測(cè)、監(jiān)測(cè)進(jìn)程，使檢測(cè)、監(jiān)測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)、更及時(shí)、更快速地應(yīng)對(duì)和處置畜禽疫情。