朱樹嬌 張 輝 周 艷 董 俊 德艷艷 張永柱 仲召鑫 王 冉* 包紅朵*

(1.江蘇省食品質(zhì)量安全重點實驗室-省部共建國家重點實驗室培育基地，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營養(yǎng)研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估實驗室(南京)，南京210014；2.宜興天石飼料有限公司，宜興214200；3.江蘇恒豐強生物技術(shù)有限公司，南通226100；4.江蘇沿海地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，鹽城224002)

沙門氏菌病和大腸桿菌病是家禽養(yǎng)殖中最常見的疾病，給家禽生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟損失。除此之外，抗生素濫用導(dǎo)致的耐藥性問題，不僅通過動物的糞便污染環(huán)境，還可以通過食物影響人類健康，更與耐藥細(xì)菌的激增密切相關(guān)[1-2]。因此，家禽業(yè)迫切地需要有效的抗生素替代品來控制疾病的爆發(fā)。與抗生素相比，噬菌體具有高效滅菌和安全性的優(yōu)勢，它們特異性強，通常只作用于同一種屬的細(xì)菌，不會破壞腸道菌群的動態(tài)平衡[3]。目前，國內(nèi)噬菌體制劑在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用鮮有報道。在家禽養(yǎng)殖業(yè)中，可通過噬菌體降低肉雞腸道中沙門氏菌[4]、大腸桿菌[5]、彎曲桿菌[6]的數(shù)量，同時不影響其他腸道菌群。也有相關(guān)研究報道，噬菌體可替代抗生素，促進肉雞生長[7]。除此之外，噬菌體也可以作為一種生物防治劑，避免肉雞胴體感染沙門氏菌，保證食品安全[8]。越來越多的研究表明，噬菌體制劑具有綠色、無公害的優(yōu)勢，在飼料添加劑或畜禽疾病防控等方面具有潛在的應(yīng)用前景。

隨著飼料端禁抗政策的實施，市場中各種各樣的替抗產(chǎn)品不斷涌現(xiàn)。噬菌體作為細(xì)菌的天敵，也可以作為一種飼料添加劑使用，并且主要作用場所在腸道。腸道既是家禽飼糧養(yǎng)分消化吸收的重要器官，也是重要的免疫保護屏障[9]。腸道健康與家禽出欄率及優(yōu)質(zhì)肉品生產(chǎn)率密切相關(guān)。其中腸道微生物作為腸道的重要組成部分之一，在吸收營養(yǎng)、防御病原體等方面發(fā)揮著不可替代的作用[10]。宿主和腸道微生物之間的相互作用會直接影響腸道代謝[11]，此外，微生物菌群還通過競爭排斥過程中產(chǎn)生的抑菌或殺菌物質(zhì)來減少和防止腸道病原體的定植[12]。在我國家禽集約化養(yǎng)殖密度高及飼料營養(yǎng)搭配不科學(xué)的條件下，尤其是在禁用抗生素的后抗生素時代，家禽腸道問題日益突出，因此，眾多科研工作者熱衷于研究綠色、無公害的添加劑，來解決家禽腸道健康問題。因此，本試驗通過給肉雞飼喂大腸桿菌噬菌體和沙門氏菌噬菌體的復(fù)合制劑，研究復(fù)合噬菌體制劑對肉雞生長性能、腸道形態(tài)、腸道菌群及免疫功能的影響，以期為其在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

LB液體培養(yǎng)基、SM緩沖液、細(xì)菌內(nèi)毒素測定試劑盒、雞免疫球蛋白G(IgG)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒由南京建成生物研究所提供；多功能酶標(biāo)儀(Infinite M1000 PRO，瑞士)；尼康ECLIPSE 80i光學(xué)顯微鏡(Nikon H550L，日本)；超微量紫外分光光度計(Nanodrop 2000，美國)。

1.2 噬菌體復(fù)合制劑的制備

噬菌體復(fù)合制劑：有效成分為2株裂解性大腸桿菌噬菌體(BPEP2、BPEP3)和2株裂解性腸炎沙門氏菌噬菌體(BPT48、BPF13076)，以上噬菌體均分離純化自該雞場病雞糞便樣品，總效價為109PFU/mL，于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

制備方法：噬菌體BPEP2、BPEP3、BPT48、BPF13076與其對應(yīng)宿主EP2、EP3、T48、F13076[細(xì)菌生長至對數(shù)期，吸光度(OD)600 nm為0.5]以最佳感染復(fù)數(shù)的比例加入新鮮的LB液體培養(yǎng)基中，37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)6 h后，離心過濾，得到BPEP2、BPEP3、BPT48、BPF13076各10 L。通過切向流過濾技術(shù)用噬菌體保存液(SM緩沖液)置換出LB液體培養(yǎng)基，最后獲得BPEP2、BPEP3、BPT48、BPF13076各5 L。將BPEP2、BPEP3、BPT48、BPF13076按照體積比1∶1∶1∶1混合均勻，得到20 L噬菌體復(fù)合制劑，細(xì)菌內(nèi)毒素的含量測定值<1 EU/mL。

1.3 試驗設(shè)計

選擇14 000只體重(850±45) g的37日齡青腳麻雞，隨機分為2組，分別為對照組與試驗組，每組7個重復(fù)，每個重復(fù)1 000只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，并根據(jù)養(yǎng)殖場疫病防治對策，正常使用治療抗生素、抗球蟲藥和中藥等產(chǎn)品，試驗組飼喂基礎(chǔ)飼糧，并在飲水中添加噬菌體復(fù)合制劑，其他用藥情況與對照組相同。試驗組肉雞的飲水罐(體積100 L)中按體積比為1∶100添加噬菌體復(fù)合制劑，保證試驗組在2 h內(nèi)喝完，并保證飲用水中噬菌體的實際效價為107PFU/mL，連續(xù)飼喂6 d，間隔3 d，共循環(huán)3次。2組雞只均按常規(guī)的飼養(yǎng)管理方式進行飼養(yǎng)管理?；A(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型，參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)和試驗雞場營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1，試驗期為27 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 飼養(yǎng)管理

肉雞飼養(yǎng)試驗在南京益信家禽育種有限公司進行，采用地面散養(yǎng)，自由采食和飲水。飼養(yǎng)管理及免疫程序按常規(guī)方式進行。每日觀察試驗肉雞活動情況并記錄采食量及死淘數(shù)。

1.5 樣品采集和指標(biāo)檢測

1.5.1 生長性能

各組分別在試驗第7、16、25、27天，以重復(fù)為單位對空腹(自由飲水)12 h后的肉雞稱重，并準(zhǔn)確稱量和記錄采食量，計算試驗各階段的平均體重、平均日采食量及料重比。

1.5.2 免疫器官指數(shù)

各組分別在試驗第7、16、25天，從每個重復(fù)中隨機抽取5只稱重，然后進行頸靜脈放血處死后解剖，摘取胸腺、脾臟和法氏囊，并除去脂肪及結(jié)締組織，用濾紙吸干血水后進行稱重，計算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官鮮重(g)/
宰前活重(g)]×100[13]。

1.5.3 血清IgG含量

各組分別在試驗第7、16、25天，從每個重復(fù)中隨機抽取5只接近平均體重的試驗雞，頸靜脈放血處死，收集血液，將采集的血液靜止20 min后，3 200 r/min離心15 min，取上層血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒測定血清中IgG的含量。

1.5.4 小腸黏膜組織結(jié)構(gòu)

各組分別在試驗第7、16、25天，從每個重復(fù)中隨機抽取5只接近平均體重的試驗雞，頸靜脈放血處死后解剖，取相同部位的十二指腸、空腸、回腸，長2～3 cm，放入預(yù)先準(zhǔn)備好的4%多聚甲醛固定液中固定24 h后，乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、蘇木精-伊紅染色和中性樹膠封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察各段腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，并測量絨毛高度和隱窩深度。

1.5.5 腸道微生物擴增子測序分析

各組分別在試驗第7、16、25、27天，從每個重復(fù)中隨機抽取5只接近平均體重的試驗雞，頸靜脈放血處死，采集5個盲腸內(nèi)容物于滅菌EP管中，迅速置于液氮中保存，待測。樣品送到上海天昊生物科技有限公司，進行DNA提取，并使用Nanodrop檢測DNA樣品質(zhì)量檢測。以16S rRNA V3～V4區(qū)為目標(biāo)片段，擴增引物為341F(5’-CCTACGGGNGGCWGCAG-3’)和805R(5’-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3’)。將樣本PCR擴增產(chǎn)物進行文庫構(gòu)建，通過Illumina HiSeq 2×250平臺測序及數(shù)據(jù)分析。

1.6 統(tǒng)計分析

采用Excel 2010對試驗數(shù)據(jù)進行整理，用SPSS 16.0軟件中的獨立樣本t檢驗進行統(tǒng)計分析，以P<0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，P<0.01作為差異極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。菌群分析數(shù)據(jù)采用R繪圖進行。

2 結(jié)果與分析

2.1 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞生長性能影響

如表2所示，與對照組相比，61和63日齡，試驗組肉雞平均體重分別增加9.46%和9.70%(P>0.05)，整個過程的料重比減少了2.81%。

表2 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞生長性能的影響

2.2 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

如表3所示，與對照組相比，43日齡，試驗組肉雞胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)分別增加16.80%(P<0.05)和7.14%(P>0.05)；52日齡，試驗組肉雞法氏囊指數(shù)和胸腺指數(shù)分別增加8.55%(P>0.05)和7.37%(P>0.05)；61日齡，試驗組肉雞法氏指數(shù)增加了39.66%(P>0.05)。

表3 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞血清IgG含量的影響

如表4所示，與對照組相比，43、52及61日齡，試驗組肉雞血清中IgG含量分別增加15.85%(P>0.05)、29.54%(P>0.05)和1.45%(P>0.05)。

表4 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞血清中IgG含量的影響

2.4 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響

如表5所示，43、52及61日齡,試驗組的肉雞十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度均比對照組高，且差異顯著(P<0.05)；43及52日齡，試驗組的肉雞十二指腸、空腸、回腸的隱窩深度均比對照組深，且差異顯著(P<0.05)；43、52及61日齡，試驗組的肉雞十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度/隱窩深度均比對照組高，且差異顯著(P<0.05)。

表5 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

2.5 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞盲腸微生物α多樣性和β多樣性的影響

2.5.1 α多樣性分析

對肉雞盲腸食糜微生物16S rRNA進行HiSeq測序，得到2 204 912條優(yōu)質(zhì)序列，并且序列的長度集中在419～428 bp。從圖1發(fā)現(xiàn)，測序序列稀釋曲線趨于平坦，表明測序數(shù)據(jù)量足夠大，除此之外物種累計曲線趨于平緩，操作分類單元(OTU)數(shù)未顯著增加，表明樣品量充足，可保證數(shù)據(jù)分析的可靠性。

圖A：測序序列稀釋曲線；圖B：物種積累曲線。

圖2為盲腸食糜微生物的α多樣性，結(jié)果表明，與對照組相比，第3個周期的噬菌體處理對Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)、ACE指數(shù)均差異顯著(P<0.05)，但是Simpson指數(shù)和覆蓋度差異不顯著(P>0.05)。這說明飲用噬菌體復(fù)合制劑會對肉雞盲腸腸道菌群豐富度和多樣性產(chǎn)生一定的影響。

橫坐標(biāo)(PC1)和縱坐標(biāo)(PC2)為樣本間差異解釋度最大的2個主要成分，刻度是相對距離，無實際意義。圖中每個點代表1個樣本，點的不同顏色表示樣本所屬分組，分布越近的點表示樣本越相似。

2.5.2 β多樣性的分析

從圖3可以看出，基于OTU/ASV(擴增序列變體)豐度表和Euclidean距離，試驗組(P1、P2和P3)在主成分分析(PCA)圖中聚集到左上限，而對照組的樣本(C1、C2和C3)聚集到右下限，說明試驗組和對照組中肉雞盲腸腸道菌群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了不同的特征。進一步，基于偏最小二乘法判別分析(PLS-DA)發(fā)現(xiàn)，試驗組(P1、P2和P3)與對照組的樣本(C1、C2和C3)距離更遠，再次表明試驗組和對照組中肉雞盲腸腸道菌群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了不同的特征。

圖A：主成分分析；圖B：偏最小二乘法判別分析。Fig.A: PCA; Fig.B: PLS-DA.

2.6 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞盲腸微生物門水平上組成的影響

如圖4所述，對照組及試驗組肉雞盲腸菌群以擬桿菌門(Bacteroidetes)和厚壁菌門(Firmicutes)為主。與對照組相比，43日齡，試驗組肉雞盲腸食糜中Firmicutes相對豐度增加28.13%，并且Bacteroidetes相對豐度降低9.97%；52日齡，試驗組肉雞噬菌體盲腸食糜中變形菌門(Proteobacteria)相對豐度下降，并且螺旋菌門(Spirochaetes)相對豐度增加；61日齡，肉雞試驗組盲腸食糜中Proteobacteria、Firmicutes相對豐度下降，而Bacteroidetes相對豐度增加。

每個柱形為1個分組，縱坐標(biāo)為組內(nèi)相對豐度平均值，每個分組內(nèi)所有物種相對豐度平均值加和為1，圖中每種顏色對應(yīng)1個物種，對應(yīng)的物種見柱狀圖下方的顏色注釋。

2.7 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞盲腸微生物屬水平上組成的影響

如圖5所示，為探索噬菌體復(fù)合制劑對肉雞盲腸微生物屬水平的影響，本研究定義水平上相對豐度前8的菌群為優(yōu)勢菌群。在屬水平上，擬桿菌屬(Bacteroides)、巨單胞菌屬(Megamonas)、黏螺旋菌屬(Mucispirillum)、脫硫弧菌屬(Desulfovibrio)、考拉桿菌屬(Phascolarctobacterium)、瘤胃球菌屬(Ruminococcus)、副擬桿菌屬(Parabacteroides)、薩特氏菌屬(Sutterella)是試驗組和對照組占優(yōu)勢的細(xì)菌。43日齡，2組樣品各物種組成屬水平大致相當(dāng)。與對照組相比，52日齡，試驗組增加Parabacteroides、Desulfovibrio和Barnesiella在肉雞盲腸中的相對豐度，降低RFN20相對豐度；61日齡，試驗組增加Lactobacillus的相對豐度，降低RFN20相對豐度。

3 討 論

3.1 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞生長性能的影響

家禽腸道菌群在宿主健康與疾病、維持免疫屏障、抵御感染等方面發(fā)揮著不可替代的作用[14]。肉雞腸道具有獨特的微生物生態(tài)系統(tǒng)，與宿主保持動態(tài)平衡。腸道微生物穩(wěn)態(tài)可以促進肉雞生長及提高其生長性能，而腸道微生物菌群失衡可誘發(fā)腸炎，導(dǎo)致生長速度下降和死亡率增加，造成一定的經(jīng)濟損失[15]。葛龍等[16]研究發(fā)現(xiàn)，噬菌體一定程度上可以降低白羽肉雞料重比，提高免疫器官指數(shù)。本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，試驗組的料重比下降2.81%。本試驗的噬菌體復(fù)合制劑有效成分為大腸桿菌噬菌體與沙門氏菌噬菌體，可以專一性地殺滅大腸桿菌與沙門氏菌，降低腸道中有害菌的數(shù)量，因此猜測肉雞飲用噬菌體復(fù)合制劑后腸道中有害菌數(shù)量下降，間接有利于有益菌的生長繁殖，改善了腸道內(nèi)菌群的分布，從而提高了飼料報酬。

圖5 屬水平上的物種組成圖

除此之外，通過盲腸食糜微生物16S rRNA進行HiSeq測序，發(fā)現(xiàn)在門水平上，與對照組相比，43日齡，試驗組肉雞盲腸食糜中Firmicutes相對豐度增加28.13%，并且Bacteroidetes相對豐度降低9.97%。初步試驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飲用噬菌體復(fù)合制劑后，肉雞盲腸中菌群的相對豐度發(fā)生了一定程度的改變。宋穎超等[17]研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)irmicutes是影響黃羽肉雞飼料效率的優(yōu)勢菌門。Knarreborg等[18]研究發(fā)現(xiàn)，Bacteroidetes的某些成員能分解結(jié)合型膽汁酸，抑制肉雞生產(chǎn)性能。再結(jié)合本試驗的研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)肉雞料重比的改變與腸道中Firmicutes以及Bacteroidetes相對豐度的改變具有一定的相關(guān)性，但腸道菌群的改變對肉雞飼料轉(zhuǎn)化率的影響機制仍需進一步探討。

3.2 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞免疫功能的影響

免疫器官稱重是目前研究機體免疫水平的常用方法之一。免疫器官指數(shù)的變化，一定程度可以說明機體免疫體系狀況，在正常情況下，肉雞免疫器官指數(shù)的增加，一定程度上說明肉雞免疫體系越強[19]。于明等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑可改善肉仔雞免疫功能。本試驗對肉雞的胸腺、法氏囊及脾進行稱重，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，43日齡，試驗組肉雞胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)分別增加16.80%和7.14%；52日齡，試驗組肉雞法氏囊指數(shù)和胸腺指數(shù)分別增加8.55%和7.37%；61日齡，試驗組肉雞法氏囊指數(shù)加了39.66%。研究結(jié)果說明，噬菌體在一定程度上促進了免疫器官的發(fā)育，其作用機制與于明等[20]雖不同，但都一定程度上促進了免疫器官的發(fā)育。同時，與對照組相比，試驗組肉雞血清中IgG含量升高，一定程度上也反映了機體免疫功能的增強。也有研究發(fā)現(xiàn)飼糧中直接添加益生菌也可以促進肉雞免疫器官發(fā)育，提高免疫抗病能力[21]，這一研究結(jié)果與本試驗結(jié)果類似。雖然作用機制不同，但噬菌體依然可以達到與益生菌一樣的應(yīng)用效果。

3.3 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞腸道形態(tài)的影響

腸道形態(tài)是判斷腸道健康的重要依據(jù)之一[22]，其中絨毛高度/隱窩深度常用來反映小腸上皮細(xì)胞更新代謝的程度，可以綜合反映小腸功能狀態(tài)[23]。曾永娣[24]研究發(fā)現(xiàn)，400 mg/kg噬菌體能顯著提高仔豬十二指腸、空腸、回腸中絨毛高度/隱窩深度，進而提高仔豬腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸能力。本試驗結(jié)果同樣發(fā)現(xiàn)，噬菌體可以顯著提高肉雞十二指腸、空腸、回腸中絨毛高度/隱窩深度，可以改善腸道對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收能力，促進肉雞健康。

3.4 噬菌體復(fù)合制劑對肉雞腸道菌群的影響

本試驗通過第二代測序技術(shù)對試驗組與對照組之間處理后的肉雞盲腸食糜微生物16S rRNA基因序列進行高通量測序，取得了一批高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，保證了肉雞盲腸腸道菌群結(jié)果分析的可靠性。通過對α多樣性評估試驗組與對照組的肉雞盲腸腸道菌群豐富度和多樣性。與對照組相比，61日齡，試驗組Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)、ACE指數(shù)的測定值均差異顯著，但是Simpson指數(shù)和覆蓋度差異不顯著。這一結(jié)果表明，飲用噬菌體復(fù)合制劑會對肉雞盲腸腸道菌群豐富度和多樣性產(chǎn)生一定的影響，已在相關(guān)研究[25]中得到證實。除此之外，根據(jù)主成分分析發(fā)現(xiàn)，試驗組與對照組明顯分開，且不同組的生物學(xué)重復(fù)樣品各自聚在一起，說明噬菌體對盲腸腸道菌群結(jié)構(gòu)影響顯著。進一步，基于偏最小二乘法判別分析發(fā)現(xiàn)，試驗組與對照組的樣本距離更遠，再次表明噬菌體對肉雞盲腸腸道菌群影響顯著。因此，可以看出飲用噬菌體復(fù)合制劑會對肉雞的腸道菌群造成一定的影響。

本試驗在肉雞飲用噬菌體復(fù)合制劑后，從其腸道菌群在門及屬不同分類水平上分析噬菌體對腸道菌群的影響。其中Firmicutes、Bacteroidetes、Proteobacteria相對豐度占據(jù)前3位，其中Firmicutes與Bacteroidetes占比較高，該研究結(jié)果與以往黃羽肉雞的研究結(jié)果[17]相似。隨著飲用噬菌體復(fù)合制劑周期的增加，F(xiàn)irmicutes、Bacteroidetes、Proteobacteria在盲腸腸道中的相對豐度發(fā)生了一定程度的變化，其中Bacteroidetes相對豐度增加，而Firmicutes及Proteobacteria相對豐度減少。以往研究表明，飼喂抗生素制劑顯著降低Proteobacteria的相對豐度，而顯著增加Bacteroidetes相對豐度[26]。這與本試驗飲用噬菌體復(fù)合制劑變化趨勢一致。然而飲用噬菌體復(fù)合制劑后Bacteroidetes相對豐度增加，F(xiàn)irmicutes及Proteobacteria的相對豐度減少，這一趨勢與部分抗生素替代品飼喂結(jié)果[27]一致。值得注意的是Firmicutes、Bacteroidetes及Proteobacteria之間的互作關(guān)系在宿主飼料轉(zhuǎn)化率方面起到重要作用[17-18]。因此，可以發(fā)現(xiàn)飲用噬菌體復(fù)合制劑，會一定程度上影響肉雞腸道菌群，進而影響宿主的新陳代謝功能。

在屬水平上，8個優(yōu)勢細(xì)菌屬的相對豐度在肉雞飲用噬菌體復(fù)合制劑后發(fā)生了一定程度的變化。本研究發(fā)現(xiàn)，52日齡，試驗組可選擇性地促進Parabacteroides、Desulfovibrio和Barnesiella的相對豐度；61日齡，選擇性地促進Lactobacillus的相對豐度，這些細(xì)菌屬與宿主的新城代謝、腸道健康等密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，Parabacteroides通過腸道緊密連接蛋白表達的增加，來維持腸道屏障的完整，保障腸道健康[28]。也有研究報道，飼喂發(fā)酵飼料能顯著降低雞腸道中Desulfovibrio的數(shù)量，從而達到預(yù)防腸道疾病[29]。此外，Lactobacillus與雞體內(nèi)糖代謝、肌肉和個體生長發(fā)育呈顯著正相關(guān)[30]。同時Barnesiella可降低感染性病原菌在腸道中的定植[31]。以上菌屬均在飲用噬菌體復(fù)合制劑后發(fā)生一定程度的變化，說明肉雞在飲用噬菌體復(fù)合制劑后，對于改善腸道菌群以及促進機體健康等方面有著重要作用。

綜上所述，噬菌體復(fù)合制劑有利于肉雞生長性能和免疫功能的提高，并且可以改善腸道對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收能力，此外可以改善腸道菌群，促進肉雞腸道健康，為其在肉雞養(yǎng)殖業(yè)的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

4 結(jié) 論

綜上所述，通過飲用水添加噬菌體復(fù)合制劑有利于提高肉雞的生長性能和免疫功能，促進腸道發(fā)育，改善腸道菌群，保障肉雞腸道健康。因此，噬菌體復(fù)合制劑在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中具有潛在的應(yīng)用價值。