李文硯，趙 靜，周彩霞，黃麗君，蔣娟娟，周 婧，韋 優(yōu)，盧美瑛

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，南寧，532415)

植物外源激素是一類由人工合成且具有生理調(diào)節(jié)功能的植物生長調(diào)節(jié)劑，可以控制植物生長發(fā)育等[1]。赤霉素(GA)是生長調(diào)節(jié)類激素，在植物種子萌發(fā)等生理過程中有重要調(diào)節(jié)作用[2-3]。GA可有效打破種子休眠，促進種子萌發(fā)[4]，然而不同植物種子對于外源GA的敏感性不同[5]，因此探索適宜濃度的GA對促進種子萌發(fā)具有重要意義[6]。

蛋黃果LucumanervosaA.DC是山欖科蛋黃果屬(果欖屬)多年生常綠果樹，因其果肉含水量較少，粉質(zhì)狀，果肉似煮熟的雞蛋黃，故得名蛋黃果[7]。蛋黃果原產(chǎn)于古巴和南美洲熱帶地區(qū)，近年來，我國各熱帶地區(qū)都有種植，部分地區(qū)已形成較大規(guī)模的種植。蛋黃果具有適應(yīng)性強，病蟲害少，樹姿優(yōu)美，果形美觀等特點，其果皮黃色，果肉營養(yǎng)豐富，富含植物多糖、淀粉、粗蛋白、維生素C以及多種人體必需的氨基酸和微量元素等[8]，具有幫助消化、降脂減壓、美容養(yǎng)顏等功效，愈加受到消費者喜愛。除鮮食外，蛋黃果還可加工成果醬、奶油、飲料和果酒等[9]，具有良好的國內(nèi)外市場及特色農(nóng)業(yè)、生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展?jié)搫?。早期蛋黃果常實生繁殖，故進入結(jié)果期較遲且遺傳變異性較大。嫁接繁殖可保持品種原有優(yōu)良性狀，促其生長一致，可確保早產(chǎn)豐產(chǎn)。嫁接育苗的前提是實生種苗(砧木)的繁育；但蛋黃果常規(guī)沙床催芽育苗方法往往出現(xiàn)種子發(fā)根出芽慢(約90 d)，萌發(fā)率低(約60 %)，根系不發(fā)達，造成移栽成活率低等問題，嚴(yán)重影響蛋黃果后續(xù)嫁接繁育工作的開展。因此，探究外源激素對蛋黃果種子萌發(fā)特性的影響，提高種子萌發(fā)率，提升種子的發(fā)芽勢，縮短種子成苗時間，對培育健壯蛋黃果實生苗和后續(xù)開展蛋黃果的繁育工作具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

“仙桃1號”蛋黃果種子,赤霉素(GA3)、吲哚-3-乙酸(IAA)、2，4-表油菜素內(nèi)酯(EBL)、6-芐氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA),紗布、濾紙電子天平、游標(biāo)卡尺、燒杯、托盤、人工氣候培養(yǎng)箱等。

1.2 方法

1.2.1 蛋黃果種子的收集 2021年1月底在廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所蛋黃果種質(zhì)資源圃(北緯22°20′22″，東經(jīng)106°47′11″)，采摘成熟度一致的蛋黃果[10-11]果實，約10 d果實后熟后將種子剝離。挑選成熟飽滿的蛋黃果種子，先用大量清水沖洗種子表面，再用少量75%乙醇溶液浸泡40～60 s消毒，最后用蒸餾水沖洗3次，晾干備用。

1.2.2 不同濃度GA3處理 先進行種子萌發(fā)預(yù)試驗，篩選最適植物生長調(diào)節(jié)劑種類及濃度，供試植物生長調(diào)節(jié)劑包括GA3、IAA、EBL、6-BA與 NAA，發(fā)現(xiàn)除GA3外，IAA、EBL、6-BA 的促萌發(fā)作用均不顯著，而NAA具反向作用。預(yù)試驗發(fā)現(xiàn)較低濃度GA3具有促種子萌發(fā)的效果，因此分別設(shè)置0、60、80、100、120、150 mg/L GA3溶液處理，浸泡蛋黃果種子24 h后，取出種子放置于鋪放有3層濕潤紗布的塑料托盤中，每個濃度梯度重復(fù)3次，每重復(fù)種子30粒，每天在托盤中噴灑適量蒸餾水，各處理放置于28 ℃，濕度80%人工氣候培養(yǎng)箱，每天光照12 h+無光照12 h。參考段義忠[12]及呼鳳蘭[13]的方法并調(diào)整，以蛋黃果種子露白1.5～2.0 mm為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，處理后10 d統(tǒng)計發(fā)芽勢，20 d統(tǒng)計萌發(fā)率，30 d用游標(biāo)卡尺測量胚根與胚芽長度。發(fā)芽勢(%)=培養(yǎng)10 d后萌發(fā)種子數(shù)/90×100，萌發(fā)率(%)=培養(yǎng)20 d后萌發(fā)種子數(shù)/90×100，發(fā)芽指數(shù)=∑(每天萌發(fā)種子數(shù)/相應(yīng)的萌發(fā)天數(shù))。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù)差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 對種子萌發(fā)率和發(fā)芽勢的影響

從表1可知，使用較低濃度GA3浸種后，蛋黃果種子萌發(fā)率和發(fā)芽勢均呈上升趨勢，在濃度達到100 mg/L時，發(fā)芽勢和萌發(fā)率均達到最高，分別為(57.80 ±1.91)%和(92.53±1.33)%。之后，隨著GA3濃度增加，蛋黃果種子發(fā)芽勢和萌發(fā)率反而呈下降趨勢，150 mg/L處理的種子發(fā)芽勢為(35.53±3.87)%，與對照相似；萌發(fā)率為(71.13±5.10)%，略高于對照，但無顯著性差異。

2.2 對發(fā)芽指數(shù)的影響

從表1可知，GA3濃度0～100 mg/L時，種子發(fā)芽指數(shù)與GA3濃度呈正相關(guān)，即GA3濃度的增加，發(fā)芽指數(shù)隨之上升；GA3濃度為100 mg/L時，發(fā)芽指數(shù)最大，達到9.62±0.33，顯著高于其他處理；此后隨著GA3濃度增加發(fā)芽指數(shù)顯著降低；對照、60 mg/L及150 mg/L處理的種子發(fā)芽指數(shù)間無顯著性差異。

2.3 對胚根及胚芽生長的影響

從表1可知，種子胚根與胚芽的長度隨GA3濃度增加而增長；濃度達到100 mg/L時，胚根及胚芽的長度均達到最高，分別為(34.74±1.83)mm和(14.43±1.43)mm，均極顯著和顯著高于對照、60 mg/L及80 mg/L處理，而這3個處理的胚根及胚芽長無顯著性差異。之后，隨著GA3濃度增加，胚根及胚芽的伸長受到明顯抑制，呈快速下降趨勢，濃度為150 mg/L時種子胚根及胚芽長度均為最低值，分別為(25.96 ±1.46)mm和(8.90±0.94)mm。

表1 不同濃度赤霉素(GA3)處理對“仙桃1號”蛋黃果種子萌發(fā)的影響

3 結(jié)論與討論

低濃度GA3可打破種子休眠，促進其萌發(fā)，高濃度GA3則抑制種子萌發(fā)[14-16]，但GA3濃度的高低是針對特定作物而言，不同作物種子的最適GA3濃度存在較大差異。如魚腥草種子萌發(fā)的最佳GA3處理濃度為250 mg/L，該處理濃度下魚腥草種子的發(fā)芽時間縮短、萌發(fā)率和發(fā)芽勢均達85%，均優(yōu)于對照[17]；而900 mg/L GA3則是解除桃種子休眠的最適濃度[18]。本試驗結(jié)果表明，蛋黃果種子在低濃度GA3(60～150 mg/L)浸種處理后，蛋黃果種子萌發(fā)率與發(fā)芽勢呈明顯正相關(guān);濃度達到100 mg/L時，萌發(fā)率和發(fā)芽勢均達到最高，說明蛋黃果種子活力較強。發(fā)芽指數(shù)是種子活力指標(biāo)，試驗結(jié)果看出，蛋黃果種子經(jīng)100 mg/L GA3處理后，種子活力達到峰值；而濃度從120 mg/L開始，種子發(fā)芽指數(shù)開始下降；濃度為150 mg/L時，種子發(fā)芽指數(shù)下滑劇烈，說明了蛋黃果種子對赤霉素有較強的敏感性。

赤霉素對于蛋黃果種子胚根及胚芽的伸長亦有較大的影響。GA3濃度為60～100 mg/L時，隨著GA3濃度升高，種子胚根及胚芽的伸長越長，幼苗的生長越好；當(dāng)GA3濃度為100 mg/L時，蛋黃果種子的胚根及胚芽長度均達到最大。說明100 mg/L GA3處理能增加種子萌發(fā)率及種子活力，還能顯著加快種子的成苗速度。

使用GA3浸種處理后，蛋黃果種子發(fā)芽勢、萌發(fā)率、發(fā)芽指數(shù)、胚根長及胚芽長均有不同程度的提高，當(dāng)濃度為100 mg/L時，各項指標(biāo)達到最高值；隨著GA3濃度的繼續(xù)提升，蛋黃果種子萌發(fā)率及幼苗伸長開始顯著下降。說明適宜濃度的GA3促進蛋黃果種子萌發(fā)，高濃度GA3反而具有抑制作用。本試驗僅研究單一植物生長調(diào)節(jié)劑不同濃度對蛋黃果種子萌發(fā)的影響，因此后續(xù)研究中從多種植物生長調(diào)節(jié)劑組合著手，以期更全面地了解植物生長調(diào)節(jié)劑對蛋黃果種子萌發(fā)的作用機制。