林爽

乙型肝炎主要表現(xiàn)為肝臟炎性病變,屬傳染性病癥,是多器官傳染性疾?。?］。該病發(fā)病與季節(jié)無關(guān),常為散發(fā),目前是世界性流行類疾?。?］。臨床主要表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛、上腹部不適、食欲減退、惡心等。隨著乙型肝炎逐步發(fā)展,部分患者會進(jìn)展為肝硬化、原發(fā)性肝細(xì)胞癌、肝衰竭,嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量和生命安全。研究顯示,把握檢測乙型肝炎最佳時機(jī),掌握肝炎治療進(jìn)展、病毒復(fù)制情況對于該病臨床治療具有重要作用［3］。傳統(tǒng)檢測多采用ELISA 法診斷乙型肝炎病毒(HBV)感染,通過血清檢測評價特異性抗體、抗原在血清內(nèi)狀況,來判斷機(jī)體感染情況。隨著醫(yī)療技術(shù)持續(xù)發(fā)展以及生物學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)步,FQ-PCR 技術(shù)在臨床疾病診斷中得到廣泛應(yīng)用,尤其在乙型肝炎診斷中,可有效顯示HBV 活性和復(fù)制性情況,為臨床治療和預(yù)后評價做出科學(xué)指導(dǎo),但由于其無法準(zhǔn)確判斷乙型肝炎病毒的脫氧核糖核酸(HBV-DNA)感染狀態(tài),單獨應(yīng)用存在一定缺陷［4］?；诖?本次研究本院對收治的部分乙型肝炎患者采用FQ-PCR 聯(lián)合ELISA 檢測,結(jié)果顯示,與單一檢測手段相比,聯(lián)合檢測準(zhǔn)確率更高。具體情況報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 在本院2020 年4 月～2021 年3 月收治的乙型肝炎患者中選取180 例納入本次研究,根據(jù)檢測方法不同分為對照1 組(59 例)、對照2 組(59 例)及觀察組(62 例)。觀察組,男39 例,女23 例；年齡20～80 歲,平均年齡(49.57±10.24)歲。對照1 組,男31 例,女28 例；年齡21～79 歲,平均年齡(49.04±10.46)歲。對照2 組,男32 例,女27 例；年齡20～81 歲,平均年齡(50.21±10.35)歲。三組患者的一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本院倫理委員會審核批準(zhǔn)了本次研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：180 例納入者均知曉本次研究,并簽署了同意書；均符合乙型肝炎相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：精神疾病者；惡性腫瘤者；血液系統(tǒng)存在疾病者；患相關(guān)性代謝系統(tǒng)疾病。

1.2 方法 清晨取患者空腹靜脈血,經(jīng)3000 r/min 離心10 min 后,對血清實施分離,置于4 ℃條件下保存?zhèn)溆?。對? 組行FQ-PCR 檢測,對照2 組行ELISA檢測,觀察組行FQ-PCR+ELISA 檢測。

ELISA 檢測：檢測HBV 血清標(biāo)注物,全自動酶標(biāo)儀選擇上?？迫A生物工程股份有限公司(型號為ST-360),ELISA 試劑源自上海科化生物股份有限公司,所需試劑均源于同一生產(chǎn)公司,確保無菌操作,對乙型肝炎各項指標(biāo)實施檢測,包括乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)、乙型肝炎E 抗體(HBeAb)、乙型肝炎E 抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗體(HBsAb)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。

FQ-PCR 檢測：應(yīng)用美國ABI 公司的熒光定量分析儀(型號為ABI7500Fast)展開檢測,FQ-PCR 診斷試劑盒源自中山大學(xué)達(dá)安基金股份有限公司。對HBVDNA 實施定量檢測,以試劑操作說明書為依據(jù)執(zhí)行整體操作。HBV-DNA>10×102IU/ml,即為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 比較三組診斷結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為96.77%,對照1 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為84.75%,對照2 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為81.36%。觀察組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率明顯高于對照1 組與對照2 組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。對照1 組與對照2 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 三組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率比較［n(%)］

3 討論

在臨床上,乙型肝炎屬于病毒性肝炎,傳染性較強(qiáng),主要病毒為HBV。在我國約9300 萬人攜帶HBV,HBV 長期在機(jī)體內(nèi)潛伏,部分?jǐn)y帶者因體內(nèi)HBV 被激活而致?。?］。該癥的特點在于傳播途徑廣、傳染率高、病情遷延不愈、起病緩慢等,多數(shù)患者早期癥狀均不明顯,發(fā)現(xiàn)時疾病已發(fā)展至晚期,需接受持續(xù)治療,患者身體痛苦增加,經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)加重。早期接受及時、高效的診斷,并施以有效、正確的治療,可避免病情持續(xù)惡化,能有效延長患者的生存時間［6］。但因治療時大量應(yīng)用抗病毒藥物,顯著增加了HBV 變異株的數(shù)量,造成傳統(tǒng)檢測HBV 血清學(xué)的難度增加,檢測可重復(fù)性、準(zhǔn)確性、敏感性缺陷較大［7-10］。

ELISA 為HBV 感染傳統(tǒng)檢測手段,其優(yōu)勢在于價格低、檢測時間短、特異度與靈敏度較高、方法簡單等［11-13］,通過對血清內(nèi)特異性抗原、抗體實施有效檢測來判斷是否感染HBV,也可反映HBV 免疫應(yīng)答狀態(tài)。但檢測結(jié)果易受到多種因素影響,如標(biāo)本保存、血清分離、加樣有無氣泡、濺出、孵育時間、方式、洗板情況等。該項檢測還需應(yīng)用特殊設(shè)備,且難以對病毒感染程度、數(shù)量實施定量分析,且在急診初篩、門診、無償獻(xiàn)血中并不適用,難以準(zhǔn)確反映HBV 傳染風(fēng)險、感染復(fù)制情況。

FQ-PCR 法為DNA 探針雜交、PCR 技術(shù)的融合,可經(jīng)檢測閉管、熒光技術(shù)直接對PCR 過程中熒光信號的變化實施探測,能對HBV 感染程度實施定性、定量分析,在選擇治療方案、判斷預(yù)后效果中具有重要指導(dǎo)意義。FQ-PCR 可以將HBV-DNA 水平定量、可靠、真實、準(zhǔn)確的反映出來。該手段可直接檢測HBV-DNA 的水平,將HBV 傳染性、復(fù)制水平、存活、活動性直觀體現(xiàn)出來。但HBV-DNA 難以判斷其感染狀態(tài)。所以,臨床部分學(xué)者提出實施FQ-PCR 聯(lián)合ELISA 檢測。

許嬌［9］研究顯示,與單一檢測手段相比,FQPCR 聯(lián)合ELISA 檢測的價值更高。本次研究結(jié)果顯示：觀察組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為96.77%,對照1 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為84.75%,對照2 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率為81.36%。觀察組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率明顯高于對照1 組與對照2 組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。對照1 組與對照2 組診斷乙型肝炎的準(zhǔn)確率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。提示相較于單一檢測,聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確性更高,與相關(guān)研究［10］結(jié)果基本相符,進(jìn)一步證實了本文可信度。

綜上所述,實施FQ-PCR 聯(lián)合ELISA 檢測,在早期診斷乙型肝炎中作用顯著,可使診斷準(zhǔn)確率提高,值得應(yīng)用。