吳清 莫秀梅 陳達(dá)燦 晏烽根

摘要 濕，屬六氣之一。濕證是指具有濕之特性的各種不同證候。近年來(lái)，濕證是中醫(yī)證候研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)具有重要的科學(xué)研究?jī)r(jià)值，證候的構(gòu)建是中醫(yī)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的橋梁和紐帶。構(gòu)建能客觀體現(xiàn)及反映濕證的動(dòng)物模型是進(jìn)一步開展臨床和基礎(chǔ)研究的立足點(diǎn)。目前，已有很多的中醫(yī)濕證實(shí)驗(yàn)室研究報(bào)道，尤其在各種中醫(yī)濕證動(dòng)物模型的構(gòu)建及相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)?，F(xiàn)對(duì)中醫(yī)濕證的理論源流、濕證動(dòng)物模型分類及濕證模型檢測(cè)指標(biāo)及意義的研究進(jìn)展進(jìn)行探討，為中醫(yī)濕證動(dòng)物模型的建立及優(yōu)化研究提供參考及啟示，以期為濕證動(dòng)物模型的構(gòu)建及濕證生物學(xué)機(jī)制研究提供思路。

關(guān)鍵詞 中醫(yī);濕證;濕證動(dòng)物;動(dòng)物模型

Animal Models of Dampness Syndrome in Traditional Chinese Medicine：A Review

WU Qing，MO Xiumei，CHEN Dacan，YAN Fenggen

（Team of Atopic Dermatitis Clinical and Basic Science Research，State Key Laboratory of Dampness Syndrome of Chinese Medicine，The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine，Guangzhou 510120，China）

Abstract Dampness is one of the six climatic factors（wind，cold，heat，dampness，dryness and fire） which are pathogenic factors.Dampness syndrome is directly caused by dampness accumulation in the body.In recent years，the syndrome has been the hot spot and focus of research on traditional Chinese medicine（TCM） syndromes.Syndrome development serves as a bridge between TCM and modern medicine.It is the foundation for further clinical and basic research to develop animal models that can objectively reflect dampness syndrome.At the moment，there has been an explosion of research on dampness syndrome，especially the animal modeling and the detection of related indicators.This article aims to summarize the theories on dampness syndrome，classification of related animal models，and evaluation indicators and significance of the models，which is expected to serve as a reference for the modeling of dampness syndrome，optimization of related models，and study of the biological mechanism of the syndrome.

Keywords Traditional Chinese medicine; Dampness syndrome; Animals of dampness syndrome; Animal models

中圖分類號(hào)：R228文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2022.08.026

濕證的產(chǎn)生，可以外來(lái)也可內(nèi)生。外來(lái)因素包括居住卑濕及霧露雨濕等，內(nèi)生因素包括多食生冷及酒酪之品。不論內(nèi)濕及外濕，皆是脾氣虛弱以后，濕邪乘虛而入所致。濕邪作為重要的致病因素，歷代醫(yī)家對(duì)其致病機(jī)制的理解亦逐步加深。目前現(xiàn)存最早關(guān)于濕邪致病的記載可追溯到戰(zhàn)國(guó)時(shí)期的醫(yī)籍《五十二病方》，其嬰兒索痙篇中載有“索痙者，如產(chǎn)時(shí)居濕地久”表明生產(chǎn)時(shí)感受濕邪可致索痙病?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》進(jìn)一步豐富了對(duì)濕邪致病的認(rèn)識(shí)，其中《素問(wèn)生氣通天論篇第三》載“因于濕，首如裹”濕證之治療，《時(shí)病論》中倪松亭云：治濕之道非一，當(dāng)細(xì)察而藥之。濕在皮膚常見病證為脾虛濕蘊(yùn)，脾虛濕蘊(yùn)證即飲食不節(jié)或稟賦不耐，蘊(yùn)于肌膚所表現(xiàn)出來(lái)的皮損，大便稀溏，舌淡，苔白，脈細(xì)滑一類病證，本病證見于蛇串瘡、嬰兒濕疹/特應(yīng)性濕疹、黧黑斑、濕瘡。寒濕之邪乘虛而入，阻滯經(jīng)絡(luò)，流注關(guān)節(jié)、肌肉，致使氣血不通，不通則痛;寒濕為陰邪，故四肢疼痛、沉重、乏力。中醫(yī)認(rèn)為，風(fēng)寒濕合而為痹，造成風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。

正如《丹溪心法·中濕》所載“濕之為病，有自外入者，有自內(nèi)出者”，濕邪分為內(nèi)濕和外濕而致病。吳鞠通《溫病條辨·濕》有言“脾主濕土之質(zhì)，為受濕之區(qū)，故中焦?jié)癜Y最多”。說(shuō)明內(nèi)濕主要由于脾胃失司所致，外濕則由外界環(huán)境水濕之邪所致，內(nèi)濕與外濕二者不能完全區(qū)分，往往相互引動(dòng)而致病。

1 濕證動(dòng)物模型分類及其造模方法

中醫(yī)濕證的理論方法及臨床經(jīng)驗(yàn)需要運(yùn)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)方法來(lái)進(jìn)行探討及研究，故采用合適的動(dòng)物模型，尤其是建立標(biāo)準(zhǔn)化中醫(yī)證候（濕證）動(dòng)物模型是推動(dòng)中醫(yī)證候研究的重要環(huán)節(jié)。中醫(yī)證候的動(dòng)物模型應(yīng)以中醫(yī)理論為指導(dǎo)、構(gòu)建的模型癥狀應(yīng)符合中醫(yī)臨床癥狀、具有可重復(fù)及穩(wěn)定性為基本原則。此外，也可用相應(yīng)的藥物干預(yù)進(jìn)行反證治療。目前，已有中醫(yī)證候模型構(gòu)建的文獻(xiàn)報(bào)道，包括模型的建立方法、條件及檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行了相關(guān)的研究，現(xiàn)將該方面的研究進(jìn)展綜述如下。0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

1.1 內(nèi)濕證動(dòng)物模型

1.1.1 脾虛濕阻模型

陳浩等[1]用復(fù)合造模方法構(gòu)建了脾虛濕阻型大鼠模型，具體方法為：先以高脂飼料（含30%蛋白、10%含高膽固醇的動(dòng)物油脂、10%膽固醇、1%膽鹽）喂養(yǎng)SD大鼠1周，第7天開始每日在飼養(yǎng)高脂飼料的基礎(chǔ)上給予每只大鼠4 mL冰糖水灌胃（分2次，2 mL/次），每日讓大鼠游泳1次至耐力極限，其中冰糖灌胃共16 d，游泳21 d，造模時(shí)間共48 d。趙文曉等[2-5]及劉嘉琪等[6]的研究通過(guò)每日給予大鼠高脂低蛋白飼料和力竭游泳相結(jié)合的方法構(gòu)建了成功的脾虛濕困大鼠模型。具體操作方法為：模型組及各藥物組給予特制的高脂低蛋白飼料（AIN純化飼料基礎(chǔ)上減少酪蛋白含量，增加豬油和膽固醇制成），每天下午尾部以10%體質(zhì)量負(fù)重游泳，入水游至力竭即鼻尖沒入水中10 s停止，誘導(dǎo)6周，造模時(shí)間共8周。李堯[7]用苦寒瀉下聯(lián)合饑飽失常方法構(gòu)建了脾虛濕困大鼠模型，其具體造模方法為：每日早晚給大鼠灌胃大黃水煎液約2 mL[2 mL/（100 g·d）]，隔天禁食，飲水自由，造模時(shí)間共14 d。

1.1.2 脾虛水濕不化模型

王彥芳等[8]依據(jù)中醫(yī)勞倦聯(lián)合飲食傷脾理論成功構(gòu)建了脾虛水濕不化大鼠模型，具體造模步驟為：每日下午將大鼠放入溫度為（20±2）℃、深約50 cm的水中游泳，游泳時(shí)以10%體質(zhì)量尾部負(fù)重，游泳至鼻尖淹沒入10 s時(shí)表明大鼠已精疲力竭即停止游泳。造模期間以高脂低蛋白飼料（具體成分：15%豬油，5%玉米油，0.2%氯化膽堿，15%淀粉，47.5%蔗糖，5%纖維素，7%酪蛋白，0.5%膽固醇，0.3%蛋氨酸，3.5%多礦，1%多維）飼養(yǎng)大鼠，造模時(shí)間共6周。

趙文曉等[9]、王彥芳等[10]、劉阿娜等[11]、韓曉春[12]、趙宏偉等[13]、崔寧等[14]、李自輝等[15-16]給予雄性大鼠高脂低蛋白飼料（在AIN-76A純化飼料的基礎(chǔ)上減少酪蛋白含量，增加豬油和膽固醇配制而成，成分為蔗糖47.5%，氯化膽堿0.2%，纖維素5%，蛋氨酸0.3%，酪蛋白7%，淀粉15%，玉米油5%，多礦3.5%，豬油15%，多維1%，膽固醇0.5%）喂養(yǎng)，每日以10%體質(zhì)量進(jìn)行尾部負(fù)重游泳（水溫15～20 ℃，水深40～45 cm），大鼠鼻尖沒入水中10 s以上即判斷為力竭，停止游泳，造模時(shí)間共6周，成功構(gòu)建了脾虛水濕不化模型[15-16]。

1.1.3 痰濕證

張春仁[17]通過(guò)喂養(yǎng)小鼠60%高脂飼料和30%糖水成功構(gòu)建了內(nèi)濕因素誘導(dǎo)的痰濕證小鼠模型，其造模周期為3個(gè)月。周游[18]每日給予小鼠高脂飼料（具體配方為：50%基礎(chǔ)飼料、10%雞蛋、2%香油、20%豬油、5%奶粉、白砂糖5%、花生5%、鹽3%）食用構(gòu)建了痰濕證小鼠模型，造模時(shí)間共64 d。喻松仁等[19]通過(guò)給予大鼠高脂飼料喂養(yǎng)6周后成功構(gòu)建了痰濕證模型，其高脂飼料是在100 g基礎(chǔ)飼料中加入全脂奶粉和豬油各15 g、并加入10 g蛋黃粉、0.5 g豬膽鹽及適量濃縮魚肝油配制而成。姜凌宇等[20]、姜月華等[21]通過(guò)給予大鼠配制好的高脂飼料亦成功構(gòu)建了痰濕壅盛的大鼠模型，其高脂飼料中含有12%豬油、1%麻油、5%花生粉、10%雞蛋、5%奶粉、5%蔗糖及2%食鹽，此研究中痰濕壅盛證的大鼠模型造模時(shí)間為24周。楊海燕等[22-23]的研究通過(guò)給大鼠喂養(yǎng)高脂飼料8周成功構(gòu)建了痰濕證動(dòng)物模型，其所用高脂飼料含15%豬油、10%蛋黃粉、15%全脂奶粉和0.5%豬膽鹽。

1.1.4 濕熱證

王見文等[24]通過(guò)內(nèi)外因素誘導(dǎo)構(gòu)建了脾虛濕熱證小鼠模型，其具體構(gòu)建方法為：以80%基礎(chǔ)飼料、12%豬油、8%蜂蜜配制形成實(shí)驗(yàn)中所需的高脂高糖飼料，每日喂養(yǎng)小鼠以高脂飼料，連續(xù)誘導(dǎo)4周后對(duì)小鼠以0.3 mL/只的劑量H.pylori菌液灌胃，每次間隔時(shí)間為48 h，灌胃感染3次后定植8周，總共造模時(shí)間12周。

1.2 外濕證動(dòng)物模型

榮光莉等[25]通過(guò)外濕因素誘導(dǎo)了小鼠濕熱證模型，研究人員通過(guò)利用人工氣候箱聯(lián)合超聲波加濕器來(lái)控制造模因素溫度和相對(duì)濕度，白天12 h將溫度設(shè)定為，夜間將溫度設(shè)定為（33±2）℃、相對(duì)濕度設(shè)置為85%，夜間12 h將溫度設(shè)定為（20±2）℃、相對(duì)濕度設(shè)置為60%，造模時(shí)間持續(xù)14 d。周欣云等[26]將小鼠每日飼養(yǎng)于溫度設(shè)置為（21±1）℃，相對(duì)濕度設(shè)置為（90±5）%的高濕環(huán)境中12 h并以小鼠無(wú)卵蛋白飼料喂養(yǎng)，其余時(shí)間將小鼠飼養(yǎng)在正常環(huán)境中，從第15天起每日將小鼠置于密閉容器中并用生理鹽水霧化激發(fā)60 min，造模時(shí)間共21 d。謝俏俏[27]構(gòu)建了寒濕證大鼠模型，具體操作方法為：每日上午12時(shí)至下午4時(shí)將大鼠置于明暗周期為12 h/12 h的人工氣候室寒濕環(huán)境飼養(yǎng)，人工氣候室中溫度設(shè)置為（4±0.5）℃、濕度設(shè)置為（90±2）%，其余時(shí)間在溫度為18～22 ℃，相對(duì)濕度為50%～60%的常規(guī)環(huán)境飼養(yǎng)，造模時(shí)間共21 d。陳燕等[28]、徐詩(shī)畫[29]每日給予小鼠0.1 mg/kg皮下注射利血平，連續(xù)誘導(dǎo)14 d后構(gòu)建了外濕因素誘導(dǎo)的脾虛證模型。賴鵬華等[30]將小鼠放置于溫度設(shè)置為（33±0.5）℃、相對(duì)濕度設(shè)置為（95±5）%的人工氣候箱中4 d構(gòu)建了濕熱證小鼠模型。

1.3 內(nèi)濕合并外濕證動(dòng)物模型

1.3.1 痰濕壅盛模型

姜月華等[31]運(yùn)用內(nèi)外濕綜合因素造模方法構(gòu)建了痰濕壅盛模型，給予高脂飼料（含83.75%基礎(chǔ)飼料，15%脂肪，1.25%膽固醇）喂養(yǎng)C57BL/6Cnc小鼠，并將小鼠置于明暗周期12 h/12 h、溫度為20～22 ℃、相對(duì)濕度約60%的動(dòng)物房?jī)?nèi)，造模時(shí)間共25周。有研究通過(guò)先給予大鼠高脂飼料喂養(yǎng)15 d，后采用“勞倦過(guò)度+飲食不節(jié)+寒涼攻下”的多因素造模方法構(gòu)建了脾虛痰濕證大鼠模型[32-33]，具體方法為：使大鼠生活在裝有金屬隔板的鼠籠中（隔板下放置約3 cm作用的蒸餾水），每日讓大鼠在水中（深約30 cm，溫度為20 ℃）游泳20 min。0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

并且予大鼠高脂飼料喂養(yǎng)，單日予豬油灌胃（5 mL/kg），雙日給予等量4 ℃冷蒸餾水灌胃，造模時(shí)間共20 d。賈磊等[34]成功構(gòu)造成了痰濕壅盛證大鼠模型，具體造模方法為：使大鼠居住在相對(duì)濕度60%～70%的潮濕環(huán)境中，給予大鼠已配制好的高鹽高脂飼料（含12%豬油、2%食鹽、10%雞蛋、1%麻油、5%奶粉、5%花生、5%蔗糖）和生理鹽水供應(yīng)其自由飲用，造模時(shí)間共20周。

1.3.2 脾虛濕困模型

徐萌等[35]通過(guò)將大鼠飼養(yǎng)在溫度設(shè)置為（28±2）℃，相對(duì)濕度設(shè)置為（88±4）%的人工造模箱中飼養(yǎng)，單日禁食不禁水并給予每只大鼠2 mL 4 ℃冰水灌胃1次，雙日正常飲食并以4 mL豬油對(duì)大鼠灌胃1次，在以上基礎(chǔ)上每日上午9時(shí)至下午5時(shí)強(qiáng)迫大鼠站立在深為4 cm的水中，誘導(dǎo)造模時(shí)間共20 d。孫冬月和高慧[36]將大鼠飼養(yǎng)在裝有金屬隔板的定制鼠籠中，隔板下放置深約3 cm的水模擬潮濕的外環(huán)境，使大鼠站立在金屬隔板上，單日給大鼠劑量為10 mL/kg的豬油灌胃，雙日給予同等劑量4 ℃冷水灌胃，在以上基礎(chǔ)上每日強(qiáng)迫大鼠在深為25 cm的水中游泳20 min，誘導(dǎo)時(shí)間共7 d構(gòu)建了成功的濕困脾胃證大鼠模型。龔鵬飛等[37]的造模方法與孫冬月和高慧[36]相似，其具體操作方法為：將大鼠飼養(yǎng)于裝有金屬網(wǎng)隔板且網(wǎng)隔板下注入3 cm深水的潮濕環(huán)境中，隔日喂食的基礎(chǔ)上單日以劑量為20 mL/kg的豬油灌胃，雙日以同等劑量4 ℃冷水灌胃，模型誘導(dǎo)時(shí)間共12 d。徐雯等[38]構(gòu)建了濕阻中焦證大鼠模型，此研究先將大鼠放置于特制潮濕的鼠盒中喂養(yǎng)，具體為每個(gè)鼠盒中放置含有600 mL水的150 g墊料，每日定時(shí)將大鼠放入水溫27～30 ℃、水深為25 cm的水中游泳15 min，游泳完畢立即以25 mL/kg劑量灌胃豬油或者蜂蜜水，單日以豬油灌胃，雙日以30%蜂蜜水灌胃，誘導(dǎo)周期為7 d。陳海霞等[39]采用了與徐雯等[38]相似的復(fù)合造模的方法構(gòu)建了濕阻中焦證大鼠模型，其具體構(gòu)建方法如下：將大鼠放置于用塑料薄膜覆蓋的鼠籠中制造的高濕環(huán)境中飼養(yǎng)，其中的墊料以每100 g加500 mL水制造潮濕環(huán)境，每日將大鼠放入水深25 cm水桶中游泳15 min，游泳后立即予以豬油或蜂蜜灌胃，單日給予1.5 mL液態(tài)豬油灌胃，雙日給予30%蜂蜜灌胃，造模時(shí)間共7 d。楊旭等[40]、王琦越等[41]采用“久居濕地，饑飽失常，飲食不節(jié)，睡眠減少，情志不遂”的中醫(yī)理論復(fù)合造模方法構(gòu)建脾虛濕困證大鼠模型，具體方法如下：使大鼠居住在溫度設(shè)置為18～25 ℃，相對(duì)濕度在90%以上的自制造模箱內(nèi)，每日上午將大鼠放置于小站臺(tái)上站立以控制其睡眠時(shí)間為5 h，單日自由飲食飲水在禁食狀態(tài)下予以造模大鼠4 ℃冰水灌胃1次，雙日自由飲食基礎(chǔ)上予精煉豬油4 mL灌胃1次，造模時(shí)間持續(xù)20 d。姜小艷等[42]通過(guò)復(fù)合因素造模方法成功構(gòu)建了脾虛濕困大鼠模型，每日將大鼠置于2 cm水池中8 h（上午8時(shí)至下午4時(shí)）并控制其睡眠時(shí)間為8 h，單日禁食12 h并給予大鼠4 ℃冰水灌胃1次（2 mL/只），雙日給予充足飼料并以豬油灌胃1次（4 mL/只），連續(xù)20 d。李姿慧等[43]用與姜小艷等[42]相同的方法構(gòu)建了成功的脾虛濕困大鼠模型，陳芳[44]用與姜小艷等幾乎一樣的造模的方法建立了脾虛濕困濕熱證小鼠模型。賈育新等[45]采用復(fù)合造模方法構(gòu)建脾虛濕困證大鼠模型，具體方法如下：每日將大鼠放置于2 cm深的水中站立、游泳8 h，單日自由飲食飲水在空腹?fàn)顟B(tài)下予以造模大鼠精煉豬油2 mL灌胃1次，雙日禁食不禁水，造模時(shí)間持續(xù)21 d。有人使大鼠居住于造模箱內(nèi)（溫度設(shè)置為18～25 ℃，濕度設(shè)置為90%±5%并使其每日站在2 cm深的水中8 h（8：00—16：00）以控制大鼠睡眠時(shí)間，飲食方面單日禁食并給予大鼠冰水灌胃1次（2 mL/只），雙日自由飲食并對(duì)每只大鼠以4 mL豬油灌胃1次，造模時(shí)間20 d[46-47]。吳璐等[48]通過(guò)內(nèi)外濕因素結(jié)合的方法成功構(gòu)建了濕阻中焦大鼠模型，其具體造模方法為：將大鼠放置于裝有濕墊料（每150 g墊料加600 mL水）的籠中飼養(yǎng)，每日將大鼠水溫（28±2）℃、水深25 cm的玻璃缸中游泳15 min，游泳后給食物（25 mL/kg）;雙日自由飲食并給予30%蜂蜜灌胃，單日禁食但以豬油灌胃，自由飲水，造模時(shí)間共14 d。謝婧等[49-50]通過(guò)單日對(duì)小鼠進(jìn)行禁食，雙日在正常飲食的基礎(chǔ)上給每只小鼠灌胃0.3 mL白酒且讓其在跑步機(jī)上連續(xù)跑步30 min構(gòu)建了小鼠濕熱證模型，造模周期為56 d。

1.3.3 濕熱證模型

劉思邈等[51]以內(nèi)外濕誘導(dǎo)因素構(gòu)建了濕熱證小鼠模型，內(nèi)濕因素誘導(dǎo)是通過(guò)改變飲食結(jié)構(gòu)來(lái)實(shí)現(xiàn)，外濕因素主要通過(guò)改變環(huán)境中的溫度和濕度來(lái)改變。每日將小鼠放置于溫度設(shè)定為35 ℃，相對(duì)濕度設(shè)定為85%的人工氣候箱中8 h，在以普通飼料喂養(yǎng)小鼠的基礎(chǔ)上，上午以10 g/kg豬油灌胃，約半小時(shí)后再以10 mL/kg白酒（56度紅星二鍋頭）灌胃，并給予200 g/L濃度的蜜糖水供小鼠自由飲用，造模時(shí)間共持續(xù)14 d。王婷等[52]通過(guò)控制部分內(nèi)濕造模因素構(gòu)建了2種濕熱證小鼠模型，2種濕熱證模型其外濕因素相同，每日均將小鼠放置于體溫設(shè)置為（35±0.15）℃，相對(duì)濕度設(shè)置為80%～90%的人工氣候箱中12 h，其研究中所用高蛋白飼料配方比例為酪蛋白∶玉米淀粉∶大豆油∶纖維素∶復(fù)合礦物質(zhì)∶復(fù)合維生素=60∶24∶5∶5∶5∶1，每日提供給小鼠高蛋白飼料和20%糖水飲食，小鼠濕熱證模型A組單日以0.3 mL花生油脂灌胃，雙日以0.3 mL廣東米酒灌胃;小鼠濕熱證模型B組單日灌服20%番瀉葉藥液0.3 mL，雙日灌服廣東米酒0.3 mL;灌胃持續(xù)42 d，在造模第56天予以2組小鼠腹腔注射1 mg/kg劑量的脂多糖注射液完成濕熱證造模，總的造模時(shí)間為56 d。同課題組成員周祎青等[53]的研究應(yīng)用內(nèi)外濕因素結(jié)合誘導(dǎo)了濕熱證小鼠模型，每日在給予小鼠高蛋白飼料的基礎(chǔ)上將小鼠置于人工氣候箱中12 h，其中氣候箱中的溫度設(shè)置為（30±0.15）℃，相對(duì)濕度設(shè)置為80%～85%，每2天用白酒（0.3 mL/只）給小鼠灌胃1次后讓其跑步30 min，49 d后用超純水（10 mL/kg）連續(xù)灌胃7 d。有研究通過(guò)對(duì)人工氣候箱中環(huán)境和飲食結(jié)構(gòu)稍加改變亦建立了成功的濕熱證濕大于熱小鼠模型[49-50]，其具體建模方法為：每日在給予小鼠相同比例高蛋白飼料的同時(shí)置于人工氣候箱中12 h，具體溫度設(shè)置為：（32±0.15）℃和相對(duì)濕度設(shè)置為90%～95%，在上述操作基礎(chǔ)上每只小鼠單日以豬油0.3 mL灌胃，雙日以0.3 mL九江雙蒸酒（乙醇29.5度）灌胃，且讓小鼠每日跑步30 min，總的造模時(shí)間為56 d。其所構(gòu)建熱大于濕模型構(gòu)建方法在與濕大于熱組相同的人工氣候箱環(huán)境和條件下在第57天以1 mg/kg在小鼠腹腔注射大腸桿菌內(nèi)毒素脂多糖。傅書山等[54]應(yīng)用復(fù)合因素造模方法構(gòu)建了成功的濕熱證小鼠模型。具體為每日將造模小鼠放入溫度設(shè)置為35 ℃，相對(duì)濕度設(shè)置為85%的培養(yǎng)箱中8 h，供應(yīng)給小鼠高糖高脂飼料（具體配比不詳）和200 g/L蜂蜜水使其自由飲食，總的造模時(shí)間共2周。楊志軍等[55]通過(guò)綜合因素致濕的方法成功構(gòu)建了濕熱證大鼠模型，其具體造模方法為：每日將大鼠放置于人工氣候箱（溫度設(shè)為35 ℃，濕度設(shè)為95%）中2 h并以高糖高脂高糖飼料喂養(yǎng)（具體配比不詳），隔天交叉灌胃1次，予以56度二鍋頭白酒（5 mL/kg）或油脂蜂蜜混合物（19.5 m L/kg）。朱閩等[56]的研究應(yīng)用“高脂飲食+濕熱環(huán)境”的綜合因素造模方法成功構(gòu)建了濕熱證大鼠模型。具體方法為：按照向每公斤普通飼料中加入25 g膽固醇、100 g豬脂、80 g蛋黃粉的比例配制成高脂飼料，按每1 000 mL普通純凈水中加入56度米酒50 mL配制含乙醇飲用水，每日在給予以大鼠高脂飼料的基礎(chǔ)上單日給予含乙醇飲用水、雙日給予20%蜂蜜飲料，每日上午10時(shí)至下午14時(shí)將大鼠放入造模箱中4 h，其中造模箱中的溫度設(shè)置為（35±2）℃，濕度設(shè)置為（90±5）%，造模時(shí)間共12周。盛小燕等[57]的研究通過(guò)采用“高脂高糖飲食+人工熱氣候模擬倉(cāng)+生物因子”的方法成功構(gòu)建了成功的脾胃濕熱證大鼠模型。具體方法為：每日將大鼠置于溫度設(shè)置為（33±2）℃、相對(duì)濕度為（80±5）%的人工氣候箱中6 h（9時(shí)至15時(shí)），并且每日灌胃1次1×109 CFU/mL鼠傷寒沙門菌1 mL/100 g，連續(xù)灌胃2 d，造模時(shí)間共26 d。鄭鳳萍等[58]通過(guò)將大鼠放置于平均溫度（30±2）℃和濕度80%～95%的人工氣候箱中，并予以大鼠高脂、高糖飼料飲食構(gòu)建了大鼠大腸濕熱模型，造模時(shí)間共10 d。張娜娜等[59]成功構(gòu)建了脾胃濕熱大鼠模型，具體造模方法為：前10 d予以大鼠高脂飲食（高脂飼料由普通飼料添加20%豬油和8%蜂蜜配制而成）并隔日灌服白酒（10 mL/kg），再將大鼠放置于模擬高溫高濕環(huán)境的人工氣候箱中，相對(duì)濕度設(shè)置為95%、溫度設(shè)置為（32±2）℃ 8 d，第19天以0.1 mL/kg的劑量給大鼠灌胃大腸桿菌，24 h后再以0.05 mL/kg的劑量加強(qiáng)感染1次。最后7 d將大鼠移出置于自然環(huán)境中自由飲水、飲食，造模時(shí)間共27 d。0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

1.3.4 痰濕證

張婷婷等[60]的研究通過(guò)內(nèi)外濕因素綜合刺激構(gòu)建了裸小鼠痰證模型。該研究所用高脂飼料為自己配制，具體比例為52.2%基礎(chǔ)飼料、20%蔗糖、15%豬油、1.2%膽固醇、0.2%膽酸鈉、10%酪蛋白、0.6%磷酸氫鈣、0.4%石粉、0.4%預(yù)混料，該研究的具體造模方法為：每日給予小鼠高脂飼料喂養(yǎng)，上午將小鼠置于溫度設(shè)置為4 ℃、相對(duì)濕度設(shè)置為70%～75%的氣候箱中，第1天將小鼠放入造模箱中5 min，今后隨著動(dòng)物適應(yīng)能力逐漸增強(qiáng)將放置時(shí)間延長(zhǎng)至15 min，造模周期共14 d。

2 濕證模型檢測(cè)指標(biāo)及其意義

隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，對(duì)于模型的構(gòu)建及評(píng)價(jià)也越來(lái)越多采用現(xiàn)代生物學(xué)指標(biāo)包括蛋白、基因等水平上的評(píng)價(jià)。使模型的構(gòu)建更加客觀化、指標(biāo)化及標(biāo)準(zhǔn)化，促進(jìn)中醫(yī)證候模型的發(fā)展。目前已有多個(gè)指標(biāo)能反映動(dòng)物模型的部分特征，判定模型是否準(zhǔn)確及成功。相關(guān)的檢測(cè)指標(biāo)包括：細(xì)胞因子及相關(guān)蛋白等。

2.1 細(xì)胞因子

徐雯等[38]的研究結(jié)果表明與正常對(duì)照組比較濕阻中焦證大鼠模型血清中腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α）明顯升高（P<0.05）。郭月婷等[61]的研究結(jié)果表示與正常對(duì)照組比較脾虛水濕不化證模型大鼠血清中白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）-1、IL-2、Ig-G水平顯著降低（P<0.05或P<0.01）。劉思邈等[51]的研究結(jié)果顯示與正常對(duì)照組比較濕熱證小鼠模型血清中TNF-α顯著升高（P<0.01）。李姿慧等[43]的研究表明與正常組比較，脾虛濕困大鼠模型組血清TNF-α、IL-1β、IL-6顯著升高（P<0.01）。有研究表明內(nèi)外因素誘導(dǎo)的濕熱證、脾虛組小鼠模型與正常空白組小鼠比較其血清中TNF-α、干擾素（Interferon，IFN）-γ、內(nèi)毒素（脂多糖）水平顯著升高（P<0.01）[49，53]。鄭鳳萍等[58]的研究結(jié)果顯示大腸濕熱證大鼠模型與正常組比較其血清中IL-1β、TNF-α顯著增高（P<0.05），而與正常組比較較大腸濕熱證大鼠模型血清中IL-4、IL-10、Th1/Th2顯著降低（P<0.05）。張娜娜等[59]的研究結(jié)果也證明與正常組比較，脾胃濕熱證大鼠模型血清TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-4、顯著增高（P<0.05）。楊志軍等[55]的研究結(jié)果顯示與正常組比較濕熱證大鼠血清中IFN-γ、IL-4顯著升高（P<0.05）。王彥芳等[62]的研究表明脾虛水濕不化證大鼠模型與正常組比較血清中IFN-γ、IL-2顯著降低（P<0.01），而血清中IL-4顯著升高（P<0.05）。賈育新等[45]的研究顯示與正常組比較大鼠結(jié)腸組織內(nèi)TNF-α、TNF-α mRNA、IL-4、IL-4mRNA表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）。周游[18]的研究表明與正?？瞻捉M小鼠比較痰濕證小鼠模型其血清中IL-6水平顯著升高（P<0.01）。王見文等[24]的研究表明，與正常組小鼠比較，脾虛濕熱證小鼠模型血清中IL-6水平顯著增加（P<0.05）。趙文曉等[2]的研究表明與正常組比較脾虛濕困大鼠模型十二指腸組織中IL-6、IL-10陽(yáng)性面積百分比顯著升高（P<0.01）。喻松仁等[19]的研究顯示痰濕證大鼠與正常組比較其血清中TNF-α、IL-6、IL-17、IL-22水平顯著增高（P<0.01）。

2.2 相關(guān)蛋白檢測(cè)

2.2.1 水通道蛋白

徐萌等[35]的研究表明與正常對(duì)照組大鼠比較濕阻中焦證大鼠模型大鼠肝臟組織中水通道蛋白K+-Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)體（K+-Cl- Cotransporter，KCC）1、Na+-K+-2Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)體（Na+-K+-2Cl Cotransporter，NKCC）1水平明顯升高，KCC4水平明顯下降。陳海霞等[39]的研究表明濕阻中焦證大鼠模型與正常組比較腎小管中水孔蛋白（Aquaporin，AQP）2顯著增高（P<0.05）。徐雯等[38]的研究結(jié)果表明與正?？瞻捉M大鼠比較濕阻中焦證大鼠模型結(jié)腸組織中AQP3表達(dá)顯著升高（P<0.01），AQP4、AQP8表達(dá)顯著降低（P<0.01），而胃組織中僅有AQP3表達(dá)顯著升高（P<0.01）。吳璐等[48]的研究表明濕阻中焦證大鼠模型與正常組比較空腸組織中AQP3顯著降低（P<0.05）。楊志軍等[55]的研究結(jié)果顯示與正常組比較較濕熱證大鼠結(jié)腸組織中AQP3、AQP4、AQP8與調(diào)控AQP3、AQP4、AQP8表達(dá)的AQP3 mRNA、AQP4 mRNA、AQP8 mRNA顯著降低（P<0.05）。周祎青等[49]的研究表明濕熱證、脾虛有濕小鼠模型與正常對(duì)照組比較其結(jié)腸組織中AQP3表達(dá)增加（P<0.001），AQP4表達(dá)降低（P<0.001）。賴鵬華等[30]的研究表明與正常對(duì)照組比較濕熱證小鼠模型在造模12 h肺組織中AQP5表達(dá)升高。

2.2.2 免疫相關(guān)蛋白

李姿慧等[43]的研究表明與正常組比較，脾虛濕困型大鼠結(jié)腸組織中核因子κB p65蛋白高表達(dá)（P<0.01），與其相關(guān)的核因子κB p65 mRNA亦顯著升高（P<0.01），而結(jié)腸組織中的IκBα蛋白低表達(dá)（P<0.01），與其相關(guān)的IκBα mRNA亦顯著降低（P<0.01）。周祎青等[49]的研究表明濕熱證、脾虛有濕小鼠模型與正常對(duì)照組比較其結(jié)腸組織中核因子κB p65、Toll樣受體4表達(dá)顯著增加（P<0.001）。趙文曉等[2]的研究表明與正常組比較脾虛濕困大鼠模型血清中總蛋白、球蛋白水平顯著降低（P<0.05）。劉思邈等[51]的研究結(jié)果顯示與正常對(duì)照組比較濕熱證小鼠模型血清中IgA水平顯著升高（P<0.01），結(jié)腸黏膜組織中Sig A、核因子κB p65蛋白水平亦顯著升高（P<0.01）。王彥芳等[62]的研究表明脾虛水濕不化證大鼠模型與正常組比較血清中總蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、補(bǔ)體C3水平顯著降低（P<0.01）。謝俏俏[27]的研究表明，與空白組比較外濕因素干預(yù)所致的寒濕證大鼠模型血清中IgG-S、IgG-R、蛋白酶激活受體-2（Protease-activated-receptor，PAR-2）、胰蛋白酶顯著升高（P<0.05）。吳璐等[48]的研究表明濕阻中焦證大鼠模型與正常組比較血清中C反應(yīng)蛋白顯著增高（P<0.05）。王見文等[24]的研究表明，與正常組小鼠比較，脾虛濕熱證小鼠模型胃黏膜組織中熱激蛋白（Heat Shock Protein，HSP）60、環(huán)氧合酶-2水平顯著增加（P<0.05）。0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

2.2.3 氧化還原相關(guān)蛋白

黃慶芳等[46]的研究表明脾虛濕困大鼠模型與空白組比較大鼠血清中二胺氧化酶活性降低（P<0.05），結(jié)腸組織中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活性降低（P<0.05）。郝俊嶺[63]的研究結(jié)果顯示痰濕壅盛型大鼠與空白組比較血清中GSH-Px、SOD活性顯著降低（P<0.01）。盛小燕等[57]的研究結(jié)果表明脾胃濕熱證大鼠模型與空白組比較其血清中SOD活性降低（P<0.001），而模型組大鼠結(jié)腸組織中的Nrf2和HO-1表達(dá)顯著增加（P<0.001）。陳芳[44]的研究結(jié)果顯示與正常組比較較濕阻中焦證大鼠模型其肝臟組織中NKCC1蛋白表達(dá)明顯增加（P<0.01，P<0.01），鈉-葡萄糖耦聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)體（Sodium-glucose Linked Transporter，SGLT）1蛋白、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體（Glucose Transporter，GLUT）2的表達(dá)降低，3種蛋白磷酸化水平亦顯著降低（P<0.01）。中焦證大鼠模型肝臟組織中SGLT1 mRNA、GLUT2 mRNA、NKCC1 mRNA水平顯著降低（P<0.01）。

2.2.4 能量代謝相關(guān)蛋白

徐萌等[35]的研究表明與正常對(duì)照組大鼠比較濕阻中焦證大鼠模型大鼠肝臟組織中Na+-K+-ATP酶活性明顯降低。陳芳[44]的研究表明濕阻中焦證大鼠模型與空白對(duì)照組比較其肝臟中Na+-K+-ATP酶活性明顯降低（P<0.01）。黃慶芳等[46]的研究表明脾虛濕困大鼠模型與空白組大鼠比較結(jié)腸組織中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著降低（P<0.05）。楊旭等[64]的研究亦表明在肝臟組織中濕阻中焦證大鼠模型與正常組比較Na+-K+-ATP酶、呼吸鏈復(fù)合體I、呼吸鏈復(fù)合體IV、三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸活性顯著降低（P<0.01），而其肝臟組織中異檸檬酸脫氫酶、檸檬酸合酶、α-酮戊二酸脫氫酶活性明顯升高（P<0.01）。賈育新等[45]的研究表明脾虛濕困型大鼠模型與正常組比較結(jié)腸組織樣本中p38促分裂原活化的蛋白激酶（Mitogenactivated Protein Kinase，MAPK）及p38MAPK mRNA表達(dá)明顯增加（P<0.01）。

2.2.5 其他蛋白

黃慶芳等[46]的研究表明脾虛濕困大鼠模型與空白組比較大鼠結(jié)腸組織中閉合蛋白、透明緊密連接（Zona Occludens，ZO）-1蛋白表達(dá)降低（P<0.05）。張娜娜等[59]的研究結(jié)果也證明與正常組比較，脾胃濕熱證大鼠模型血清中環(huán)氧合酶-2顯著增高（P<0.05）。與正常組大鼠比較痰濕證大鼠模型下丘腦組織中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子（Signal Transduction and Activator of Transcription，STAT）3 mRNA和蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.01）。榮光莉等[25]的研究表明與正常組小鼠比較外濕因素誘導(dǎo)的濕熱證小鼠模型回腸組織中胱天蛋白酶1水平降低（P<0.01）。陳燕等[28]的研究表明與空白對(duì)照組比較，脾虛證小鼠模型胃肝脾和結(jié)腸組織中調(diào)控有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽（Organic Anion-Transporting Polypeptide，OATP）2b1蛋白表達(dá)的OATP2b1 mRNA表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）。徐詩(shī)畫等[29]的研究表明與肝癌組小鼠比較，脾虛證肝癌組小鼠模型胃組織中OATP2a1蛋白、OATP4a1蛋白、OATP2b1蛋白、OATP1b2蛋白及OATP2a1mRNA、OATP4a1 mRNA、OATP2b1 mRNA表達(dá)明顯增加（P<0.05）。賴鵬華等[30]的研究表明與空白組比較濕熱證小鼠模型在造模24 h肺組織中黏蛋白5AC表達(dá)升高。洪仲思等[65]的研究結(jié)果表明與空白組大鼠比較濕證大鼠模型脾和大腸OATP3a1的基因相對(duì)表達(dá)量下降（P<0.05）。

3 小結(jié)

目前濕證動(dòng)物模型多采用Balb/c、C57BL/6小鼠和Wister大鼠等不同品系作為主要的研究動(dòng)物，造模方法大體可分為外濕因素、內(nèi)濕因素以及內(nèi)外濕因素聯(lián)合應(yīng)用造模。對(duì)于外濕因素多數(shù)研究采用人工氣候箱模擬外濕環(huán)境，從文獻(xiàn)綜述可知其溫度、相對(duì)濕度及放置時(shí)間的條件差異較大。對(duì)于內(nèi)濕因素而言，多數(shù)研究采用改變模型動(dòng)物飲食結(jié)構(gòu)來(lái)構(gòu)建內(nèi)濕證模型，如通過(guò)提供自行配制或定制的高脂高糖或高蛋白飼料、含糖或含蜂蜜的飲用水飼養(yǎng)而構(gòu)建內(nèi)濕證模型，不同條件方法差異較大?？烧J(rèn)為基于臨床中醫(yī)證候本身的復(fù)雜性內(nèi)外濕因素綜合造模是比較合適的濕證動(dòng)物模型，具體的實(shí)驗(yàn)條件還須進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

4 討論

濕證動(dòng)物模型因涉及多因素，多指標(biāo)及指標(biāo)檢測(cè)可重復(fù)性較差，其次各個(gè)造模因素如外濕因素溫度、相對(duì)濕度、誘導(dǎo)時(shí)間、內(nèi)濕造模因素飼料的具體配比等無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，后期研究應(yīng)在前人研究的基礎(chǔ)上通過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)摸索，比較各指標(biāo)、條件差異結(jié)合臨床癥狀予以確定?，F(xiàn)階段中醫(yī)證候動(dòng)物模型尚未成熟，需要不斷完善。而且濕證動(dòng)物模型并無(wú)規(guī)范統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，從上述研究各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)可以發(fā)現(xiàn)濕邪致病幾乎涉及人體所有系統(tǒng)，這與濕邪致病范圍廣的致病特點(diǎn)相符，正如書中所載“夫濕乃重濁之邪，其傷人最廣”（陸子賢《六因條辨》），今后應(yīng)不斷探索在前期工作基礎(chǔ)上深入研究探索出規(guī)范的造模條件以及能客觀反映濕證的特異性生物學(xué)指標(biāo)，以期能夠服務(wù)于臨床，為證候診斷以及臨床中治療方法的評(píng)價(jià)提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1]陳浩，劉志勇，侯吉華，等.脾虛濕阻型單純性肥胖動(dòng)物模型建立及客觀性評(píng)價(jià)[J].江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，31（6）：84-86，112.0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

[2]趙文曉，季旭明，王媛，等.黃芪多糖對(duì)脾虛濕困大鼠內(nèi)分泌、免疫相關(guān)因子的影響[J].世界中醫(yī)藥，2020，15（3）：385-387，391.

[3]趙文曉，李軍山，張亞楠，等.黃芪多糖對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠抗疲勞能力的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2019，30（6）：1320-1321.

[4]趙文曉，于鎮(zhèn)瑋，崔寧，等.黃芪多糖對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠血清GAS、CCK、VIP及尿D木糖排泄率的影響[J].山東中醫(yī)雜志，2019，38（6）：573-576.

[5]趙文曉，崔寧，季旭明，等.黃芪及其拆分組分對(duì)脾虛水濕不化大鼠礦物質(zhì)吸收相關(guān)基因表達(dá)譜的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017，32（11）：5064-5067.

[6]劉嘉琪，王秋紅，匡海學(xué).防己與茯苓配伍對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017，32（10）：4400-4403.

[7]李堯.不同白術(shù)飲片對(duì)脾虛濕困證大鼠胃腸功能及腸道菌群的影響[D].濟(jì)南：山東中醫(yī)藥大學(xué)，2019.

[8]王彥芳，季旭明，韓曉春，等.薏苡仁多糖不同組分對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠結(jié)腸VIPR1和AQP3表達(dá)的影響[J].中藥藥理與臨床，2018，34（2）：43-47.

[9]趙文曉，崔寧，季旭明，等.基于十二指腸全基因表達(dá)譜研究模型大鼠脾虛濕阻的分子機(jī)制[J].遼寧中醫(yī)雜志，2017，44（9）：1816-1819.

[10]王彥芳，季旭明，韓曉春，等.薏苡仁多糖不同組分對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠血清VIP、ADH、ALD的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2017，35（5）：1119-1121.

[11]劉阿娜，趙文曉，鞏麗麗，等.黃芪黃酮干預(yù)脾虛水濕不化大鼠血漿代謝組學(xué)研究[J].分析化學(xué)，2017，45（4）：537-544.

[12]韓曉春.薏苡仁不同拆分組分對(duì)脾虛水濕不化證大鼠影響及分子機(jī)制研究[D].濟(jì)南：山東中醫(yī)藥大學(xué)，2017.

[13]趙洪偉，劉樹民，張寧，等.玄參對(duì)脾虛水濕不化大鼠模型的影響及其肝臟代謝組學(xué)分析[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2017，23（20）：82-89.

[14]崔寧，趙文曉，韓冰冰，等.基于因子分析的大鼠脾虛水濕不化模型評(píng)價(jià)研究[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2016，22（1）：35-37，65.

[15]李自輝，張寧，李建華，等.玄參干預(yù)脾虛水濕不化大鼠的脾臟代謝組學(xué)研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2020，31（8）：960-968.

[16]李自輝，張寧，趙洪偉，等.基于血清代謝組學(xué)探究玄參對(duì)脾虛水濕不化大鼠的利水作用機(jī)制[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2018，20（8）：1381-1392.

[17]張春仁.高脂高糖飲食誘導(dǎo)的痰濕證小鼠代謝和生殖特征的研究[D].廣州：廣州醫(yī)科大學(xué)，2018.

[18]周游.內(nèi)生痰濕在膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎小鼠發(fā)病中的作用研究[D].沈陽(yáng)：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[19]喻松仁，舒晴，白洋，等.溫膽湯對(duì)肥胖痰濕證大鼠相關(guān)炎癥因子及JAK2/STAT3通路關(guān)鍵分子STAT3表達(dá)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2019，25（6）：39-44.

[20]姜凌宇，姜月華，楊傳華，等.半夏白術(shù)天麻湯對(duì)痰濕壅盛型高血壓模型大鼠下丘腦蛋白質(zhì)組學(xué)的影響[J].中醫(yī)雜志，2017，58（13）：1139-1144.

[21]姜月華，邵琳琳，李曉，等.基于蛋白質(zhì)組學(xué)探討痰濕壅盛高血壓大鼠下丘腦對(duì)高脂飲食應(yīng)答的改變[J].遼寧中醫(yī)雜志，2019，46（10）：2212-2216，后插8.

[22]楊海燕，程紹民，喻松仁，等.肥胖痰濕證模型大鼠脂肪組織代謝相關(guān)基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)及溫膽湯的干預(yù)作用[J].中醫(yī)雜志，2020，61（8）：706-710.

[23]楊海燕，喻松仁，夏循禮，等.痰濕證肥胖大鼠腎周脂肪基因甲基化特征及溫膽湯干預(yù)的影響（英文）[J].Digital Chinese Medicine，2019，2（2）：72-85.

[24]王見文，張怡，鄭育卿，等.自擬芪連溫膽湯對(duì)HAG脾虛濕熱證型小鼠胃黏膜Hsp60、COX-2及血清IL-8水平的影響[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2017，17（99）：27-30，32.

[25]榮光莉，鄭裕華，陳頌，等.嶺南濕熱證中腸道組織自噬、線粒體DNA含量和MAVS通路介導(dǎo)炎癥的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2019，37（12）：2884-2887，后插4.

[26]周欣蕓，周龍甫，陳欣，等.高濕哮喘動(dòng)物模型的建立[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2018，35（3）：59-63.

[27]謝俏俏.阿里紅對(duì)寒濕證大鼠血清和尿液的核磁共振代謝組學(xué)研究[D].烏魯木齊：新疆醫(yī)科大學(xué)，2020.

[28]陳燕，胡浩，戴敏，等.基于脾虛肝癌小鼠Oatp2b1的表達(dá)探討“因濕致瘀”的內(nèi)涵[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2017，28（6）：1407-1409.

[29]徐詩(shī)畫，羅浩軒，項(xiàng)婷，等.脾虛內(nèi)環(huán)境對(duì)誘導(dǎo)型肝癌小鼠胃組織中oatp2a1、oatp2b1、oatp4a1、oatp1b2表達(dá)的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2019，37（10）：2358-2362.

[30]賴鵬華，單曉梅，盧大為，等.三仁湯對(duì)濕熱應(yīng)激小鼠肺組織黏蛋白5AC、水通道蛋白1、水通道蛋白5表達(dá)的影響[J].中醫(yī)雜志，2017，58（5）：410-413.

[31]姜月華，陶燕楠，亓英姿，等.基于UPLC-MS探討痰濕壅盛型高血壓病小鼠血漿代謝組學(xué)特點(diǎn)[J].中華中醫(yī)藥雜志，2020，35（5）：2671-2676.0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254

[32]聶鈺松.平陳湯對(duì)脾虛痰濕型肥胖大鼠干預(yù)作用的研究[D].長(zhǎng)沙：湖南中醫(yī)藥大學(xué)，2019.

[33]樊新榮，聶鈺松，顏苗，等.脾虛痰濕型肥胖大鼠模型制備方法的探索[J].陜西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，42（3）：68-72，111.

[34]賈磊，楊雨民，周蕓慧，等.半夏白術(shù)天麻湯對(duì)痰濕壅盛型高血壓大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病雜志（連續(xù)型電子期刊），2019，7（10）：7-8，10.

[35]徐萌，黃秀深，李曉紅，等.平胃散對(duì)濕阻中焦證大鼠肝臟水通道蛋白SLC12家族影響的研究[J].中藥藥理與臨床，2017，33（6）：7-9.

[36]孫冬月，高慧.香薷揮發(fā)油對(duì)濕困脾胃證模型大鼠的作用[J].中成藥，2017，39（12）：2441-2448.

[37]龔鵬飛，于歡，翟瑩瑩，等.多指標(biāo)評(píng)價(jià)米泔水漂蒼術(shù)對(duì)濕盛困脾脾虛大鼠的藥效作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2017，23（24）：36-40.

[38]徐雯，王楠，丁浩然，等.廣藿香對(duì)濕阻中焦證大鼠胃腸功能的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2017，42（23）：4649-4655.

[39]陳海霞，陳祥勝，孫雄杰，等.蒼術(shù)炒焦前后正丁醇部位對(duì)濕阻中焦證大鼠水鹽代謝影響[J].遼寧中醫(yī)雜志，2018，45（11）：2390-2392.

[40]楊旭，王琦越，黃秀深.基于G蛋白偶聯(lián)—PLC—IP3信號(hào)途徑探討濕阻脾胃證模型ICC Ca2+調(diào)節(jié)機(jī)制及平胃散干預(yù)作用[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2017，28（1）：48-50.

[41]王琦越，楊旭，王吉娥，等.基于Na+-K+-ATP酶活性變化評(píng)價(jià)濕阻中焦證Cajal間質(zhì)細(xì)胞模型的研究[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2017，23（5）：630-633.

[42]姜小艷，謝偉昌，李健，等.理腸湯對(duì)脾虛濕困型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸道微生態(tài)及腦腸肽的影響[J].上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，32（3）：72-75.

[43]李姿慧，蔡榮林，孫娟，等.參苓白術(shù)散對(duì)脾虛濕困型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織NF-κB p65，IκBα，IκKβ蛋白及mRNA表達(dá)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2020，26（19）：108-113.

[44]陳芳.平胃散對(duì)濕阻中焦證水調(diào)激素和水轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白影響的研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[45]賈育新，畢殿勇，段永強(qiáng)，等.參苓白術(shù)散對(duì)脾虛濕困型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸p38MAPK及TNF-α、IL-4的干預(yù)作用[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2018，46（5）：11-17.

[46]黃慶芳，龔夢(mèng)鵑，陳艷芬，等.藿香正氣口服液對(duì)濕困脾胃證大鼠腸屏障功能的作用研究[J].中國(guó)中藥雜志，2020，45（9）：2144-2150.

[47]龔夢(mèng)鵑，李春苑，巫圣乾，等.藿香正氣口服液干預(yù)濕困脾胃證大鼠的血清和糞便代謝組學(xué)研究[J].中草藥，2017，48（14）：2889-2894.

[48]吳璐，賴艷，王瑩，等.高通量測(cè)序技術(shù)研究蠶沙對(duì)濕阻中焦證大鼠腸道菌群的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2020，45（3）：623-630.

[49]謝婧，周祎青，鄭鋒玲，等.溫病濕熱證動(dòng)物模型中炎癥因子與水通道蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2018，36（9）：2163-2166.

[50]謝婧.溫病濕熱證“濕熱交蒸”實(shí)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[51]劉思邈，唐艷萍，武文靜，等.中藥對(duì)濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎小鼠NFκB p65及免疫功能的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2017，23（5）：518-522.

[52]王婷，鄭鋒玲，駱歡歡.嶺南溫病濕熱證小鼠模型的建立及腸道菌群的研究分析[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2017，35（6）：1361-1365.

[53]周祎青，鄭裕華，陳頌，等.連翹對(duì)嶺南濕熱模型小鼠的作用及其腸道菌群變化的研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2019，30（6）：678-685.

[54]傅書山，朱磊，王瓊，等.清腸化濕方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎濕熱證小鼠NLRP6蛋白及相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2020，40（5）：582-588.

[55]楊志軍，王娟娜，王棟才，等.相惡藥對(duì)黃芩生姜配伍前后對(duì)大鼠濕熱模型的清熱燥濕作用的比較[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2019，35（17）：1898-1901.

[56]朱閩，徐楠，荀建寧，等.建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性前列腺炎濕熱證病證結(jié)合小鼠模型探討[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2018，36（3）：531-534.

[57]盛小燕，葉勇峰，丁懿寧，等.清熱祛濕涼茶對(duì)脾胃濕熱證大鼠血清中NO、SOD和MDA水平以及結(jié)腸中Nrf2/HO-1表達(dá)影響[J].中南藥學(xué)，2019，17（10）：1631-1636.

[58]鄭鳳萍，羅巨利，王愛華.清熱燥濕方保留灌腸對(duì)大腸濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型Th1/Th2的影響[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2019，17（27）：181-182.

[59]張娜娜，崔璀，張振巍.燥濕和胃方對(duì)脾胃濕熱證大鼠HPA軸、炎癥因子及免疫功能的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2019，36（13）：1633-1638.

[60]張婷婷，李云英，郭強(qiáng)中，等.痰證裸小鼠模型的建立及評(píng)價(jià)[J].遼寧中醫(yī)雜志，2017，44（4）：842-844.

[61]郭月婷，樊慧，徐瑞豪，等.桑白皮水煎總提物對(duì)脾虛水濕不化大鼠模型的影響[J].中國(guó)新藥雜志，2017，26（17）：2070-2075.

[62]王彥芳，韓曉春，王媛，等.參苓白術(shù)散對(duì)脾虛水濕不化模型大鼠健脾功效的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2019，37（1）：60-63.

[63]郝俊嶺.半夏白術(shù)天麻湯對(duì)痰濕壅盛型高血壓大鼠血壓及血清MDA、SOD、GSH-Px水平的影響[D].呼和浩特：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，2019.

[64]楊旭，王琦越，劉淵，等.從“脾主化”角度探討濕阻中焦證大鼠線粒體能量代謝路徑的影響及平胃散的干預(yù)作用[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2019，30（6）：1305-1308.

[65]洪仲思，翁澤濱，鄭曉濱，等.基于濕濁大鼠多臟腑有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)肽3a1表達(dá)的濕濁轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017，32（9）：3968-3971.

（2021-03-23收稿 本文編輯：楊覺雄）

本期編輯：徐穎

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目（82004364）;廣東省自然科學(xué)基金博士啟動(dòng)項(xiàng)目（2017A030310122）;廣東省中醫(yī)藥防治難治性慢病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目（2018B030322012）;廣東省重點(diǎn)領(lǐng)域研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2020B1111100010）;2020廣東省科技創(chuàng)新戰(zhàn)略專項(xiàng)資金（粵港澳聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室）項(xiàng)目（2020B1212030006）;省部共建中醫(yī)濕證國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)（SZ2021ZZ17）作者簡(jiǎn)介：吳清（1992.04—），女，博士研究生在讀，研究方向：特應(yīng)性皮炎的臨床與基礎(chǔ)研究，E-mail：20194110157@stu.gzucm.edu.cn通信作者：陳達(dá)燦（1962.07—），男，碩士，主任醫(yī)師，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合防治特應(yīng)性皮炎，Tel：（020）81887233，E-mail：cdc@gzucm.edu.cn;晏烽根（1986.10—），男，博士，副研究員，研究方向：中醫(yī)藥治療特應(yīng)性皮炎的臨床與基礎(chǔ)研究，E-mail：fenggen_yan@gzucm.edu.cn0F125AE5-A82F-48EB-AF36-84E50412E254