趙美蕓,王 璐
血?dú)夥治鰞x因操作方便簡(jiǎn)單、快速檢測(cè)、體積不大等優(yōu)點(diǎn),在臨床的重癥及急癥患者的生命體征監(jiān)護(hù)里使用頻繁。由于檢測(cè)技術(shù)不斷提升,大多數(shù)血?dú)夥治鰞x不但能夠?qū)ρ醴謮海≒ O2)、二氧化碳分壓(P CO2)及等血氧指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)以外,還能同時(shí)提供動(dòng)脈血的血鉀(K+)、血鈉(Na+)、血氯(Cl-)、血鈣離子(Ca2+)、血糖(glucose,Glu)、血紅蛋白(hemoglobin,Hb)、紅細(xì)胞比容(hematocrit,Hct)等項(xiàng)目指標(biāo),為臨床診斷和治療提供快速有效的證據(jù)。而相關(guān)文獻(xiàn)[1~3]報(bào)道,利用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器進(jìn)行檢測(cè)獲得的結(jié)果和利用血?dú)夥治鰞x進(jìn)行檢測(cè)獲得的結(jié)果有一定差異,且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用檢測(cè)系統(tǒng)不同,統(tǒng)計(jì)的差異也不一致。故筆者對(duì)同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院急診室ABL800血?dú)夥治鰞x(簡(jiǎn)稱ABL800)檢測(cè)項(xiàng)目與VTROS4600全自動(dòng)干式生化分析儀(簡(jiǎn)稱為VTROS4600)、XN-1000全自動(dòng)血液分析儀(簡(jiǎn)稱XN-1000)兩類分析儀的檢測(cè)結(jié)果展開了對(duì)比,從而為臨床血液標(biāo)本的檢測(cè)提供參考。
1.1.1 臨床材料
選擇2018年3月至6月在同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院急診、外科重癥監(jiān)護(hù)病房(surgery intensive care unit,SICU)及急診重癥監(jiān)護(hù)病房(emergency intensive care unit,EICU)治療的157例患者,其中男性88例,女性69例;年齡41~94歲,平均年齡67.65歲(標(biāo)準(zhǔn)差12.56歲)。同時(shí)進(jìn)行3項(xiàng)檢測(cè),分別是急診生化檢測(cè)、血常規(guī)檢測(cè)和動(dòng)脈血?dú)夥治觥?/p>
1.1.2 主要儀器與試劑
XN-1000(Sysmex,日本);ABL800(雷度米特,丹麥);VTROS4600(奧森多,美國(guó))。動(dòng)脈采血器(雷杜,瑞士);生化肝素鋰抗凝管(瑞琦,成都);乙二胺四乙酸二鉀(ethylene diamine tetraacetic acid dipotassium salt,EDTA-K2)抗凝真空采血管(瑞琦,成都)。試劑均采用原裝試劑盒、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。
1.2.1 儀器準(zhǔn)備
ABL800所有電極狀態(tài)OK,血色素模塊校準(zhǔn)(半年有效期內(nèi))通過,高、低雙水平室內(nèi)質(zhì)控通過后,方可進(jìn)行患者樣本的檢測(cè)。XN-1000檢測(cè)系統(tǒng)三水平室內(nèi)水平在控,VTROS4600檢測(cè)系統(tǒng)兩水平室內(nèi)質(zhì)控均在控方可進(jìn)行臨床樣本檢測(cè)。3臺(tái)儀器定期校準(zhǔn),同時(shí)K+、Na+、Cl-、Glu、Hct、Hb的年度室間質(zhì)評(píng)結(jié)果反饋都已經(jīng)合格,而且它們的項(xiàng)目偏倚都低于1/2 Tea;3臺(tái)儀器均完成儀器性能驗(yàn)證[4]。
1.2.2 標(biāo)本采集、處理與檢測(cè)
利用動(dòng)脈采血器對(duì)所有患者進(jìn)行動(dòng)脈血采集,采集量為2.0 mL;同時(shí)從人體的肘靜脈利用真空采血管進(jìn)行靜脈血采集,采集量為3 mL;同時(shí)采集2.0 mL EDTA抗凝靜脈血。所有采血均需在5 min內(nèi)完成,并且充分混勻后立即送檢[5]。避免劇烈振蕩,動(dòng)脈血樣本采樣后30 min在ABL800上完成血?dú)夥治鰴z測(cè),EDTA抗凝血在XN-1000上完成血常規(guī)項(xiàng)目檢測(cè),靜脈血3 mL樣本2 h內(nèi)在VTROS4600上完成急診生化項(xiàng)目檢測(cè)。
1.2.3 相關(guān)性分析
將VTROS4600、XN-1000兩類儀器檢測(cè)結(jié)果作為X軸的參比方法,將ABL800的檢測(cè)結(jié)果作為Y軸的待評(píng)方法,然后對(duì)將檢測(cè)結(jié)果作為數(shù)據(jù)的線性回歸方程進(jìn)行計(jì)算;與此同時(shí)建立另外兩個(gè)X軸和Y軸將其繪制成偏倚圖,其中X軸的值是VTROS4600或XN-1000和ABL800兩類儀器同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的平均值,而Y軸的值是上述兩類儀器同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果相減得到的值。
采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0進(jìn)行處理。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn),以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。選用Excel 2007軟件對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行偏倚及線性回歸相關(guān)性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
VTROS4600測(cè)定K+的結(jié)果比ABL800高,VTROS4600檢測(cè)Cl-、Glu結(jié)果低于ABL800,除Na+外,差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);XN-1000檢測(cè)Hct和Hb結(jié)果均比ABL800的低,除Hb外,Hct差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。
表1 ABL800與VTROS4600/XN-1000相同項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的比較Tab.1 Comparison of detection results of the same items between ABL800 and VTROS4600/XN-1000
回歸分析提示,ABL800與VTROS4600和XN-1000在檢測(cè)同一項(xiàng)目獲得的檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性良好。通過對(duì)6個(gè)項(xiàng)目(K+、Na+、Cl-、Glu、Hb、Hct)相對(duì)偏倚展開回歸分析發(fā)現(xiàn),ABL800檢測(cè)K+的偏倚與另兩檢測(cè)系統(tǒng)的均值呈負(fù)相關(guān)性,而Na+、Glu、Cl-、Hct和Hb的相對(duì)偏倚則均呈正相關(guān)性。其回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為:Y=0.932 4X+0.232 0、Y=0.874 2X+10.638 0、Y=1.003 0X+0.028 1、Y=0.946 0X-0.234 5、Y=1.024 5X-0.365 2、Y=1.012 6X-0.714 8,相關(guān)系數(shù)r分別為-0.956、0.872、0.997、0.928、0.925和0.934。
筆者研究顯示電解質(zhì)等生化項(xiàng)目在動(dòng)靜脈血之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]。ABL800提供的6個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目中除Na+和Hb外,K+、Cl-、Glu、Hct的檢測(cè)結(jié)果與VTROS4600和XN-1000的檢測(cè)結(jié)果差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。分析差異的原因主要來自兩方面,檢測(cè)儀器和檢測(cè)樣本種類的不同。①檢測(cè)儀器不同,方法學(xué)不同造成檢測(cè)結(jié)果的差異。ABL800電解質(zhì)項(xiàng)目采用直接離子選擇電極法(電位測(cè)量法),而VTROS4600的檢測(cè)方式是電極法;由于Glu和葡萄糖氧化酶發(fā)生反應(yīng)后會(huì)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),生成過氧化氫,此時(shí)Glu的檢測(cè)中,利用ABL800對(duì)過氧化氫生成之時(shí),電極電流的變化情況,來對(duì)動(dòng)脈血里所含有的Glu濃度進(jìn)行計(jì)算;由于人體血漿里的Glu會(huì)與己糖激酶發(fā)生反應(yīng),當(dāng)它們發(fā)生反應(yīng)的時(shí)候光密度會(huì)出現(xiàn)變化,利用VTROS4600根據(jù)光密度變化情況對(duì)它的濃度值進(jìn)行計(jì)算;在Hb的檢測(cè)里,ABL800選用分光光度儀測(cè)定總吸收光譜來測(cè)定總Hb濃度,其結(jié)果受血液其他蛋白、脂肪等物質(zhì)濃度變化的影響,利用Hb(g/dL)=0.31×Hct(%)對(duì)Hct值進(jìn)行計(jì)算;利用XN-1000,能夠使用Hb溶血?jiǎng)╯ulfolyser,SLS)對(duì)Hb進(jìn)行檢測(cè),而XN-1000里的Hct值為:Hct=MCV×RBC,其中:MCV(mean corpuscular volume)是指的人體中紅細(xì)胞體積的平均值;RBC(red blood cell)指的是紅細(xì)胞計(jì)數(shù);MCV、RBC均為實(shí)測(cè)值。②不同標(biāo)本類型及前處理對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。樣本類型不同,因?yàn)殪o脈血及動(dòng)脈血里一些物質(zhì)的濃度是不一樣的,如Glu,其濃度在動(dòng)脈血中比靜脈血更高(P<0.05);而生化樣本檢測(cè)在血液凝固和分離血漿時(shí)不可避免會(huì)造成少量RBC破壞,釋放到血漿中離子和酶K+濃度增高;離體樣本的繼續(xù)代謝影響pH,從而引起電解質(zhì)、Glu等物質(zhì)濃度的改變等;當(dāng)然還有抗凝劑的影響,血?dú)鈾z測(cè)采用先進(jìn)的固態(tài)肝素鋰抗凝,不會(huì)稀釋樣本,而血常規(guī)采用液體EDTA抗凝不可避免稀釋效應(yīng);生化樣本一般為肝素抗凝,當(dāng)血漿里陽離子和肝素里的陰離子多聚電解質(zhì)結(jié)合時(shí),血漿里K+、Na+、Mg+、Ca+等陽離子便會(huì)出現(xiàn)假性降低情況[1],差異的出現(xiàn)便是這些因素導(dǎo)致。③檢測(cè)結(jié)果受到的運(yùn)輸及儲(chǔ)存手段的影響。當(dāng)采集好血?dú)鈽?biāo)本以后,RBC會(huì)將Glu酵解,然后便有乳酸生成,此時(shí)導(dǎo)致pH及Glu會(huì)下降,而乳酸會(huì)上升,它甚至?xí)?duì)電解質(zhì)檢測(cè)結(jié)果造成影響,故建議血?dú)夥治隽⒓此蜋z,并于采樣后30 min內(nèi)完成檢測(cè)[5]。必要時(shí)放置于冰水浴送檢;另外標(biāo)本劇烈振蕩將引起RBC的破壞,導(dǎo)致K+濃度升高、Hct降低,所有樣本避免劇烈振蕩,生化樣本相對(duì)離心力1 000~1 200 r/min,離心時(shí)間5~10 min。
ABL800檢測(cè)6個(gè)項(xiàng)目不同醫(yī)學(xué)決定水平的X值(clinical decision level X,Xc)的相對(duì)偏倚分析。通過表1的線性回歸方程和相對(duì)偏倚[用系統(tǒng)誤差百分比(system error percent,SE%)表示,SE%=(Yc-Xc)×100/Xc={(b-1)×Xc+a}×100/Xc,其中:Yc為醫(yī)學(xué)決定水平下的Y值clinical decision level Y],計(jì)算各項(xiàng)目相應(yīng)醫(yī)學(xué)決定水平的相對(duì)偏倚,并與科室所用總誤差(total error,TE)標(biāo)準(zhǔn)作比較。當(dāng)Xc為115 mmol/L時(shí),Na+的SE%是1.01;當(dāng)Xc為135 mm/L時(shí),Na+的SE%是0.98;Xc為150 mmol/L時(shí),Na+的SE%是0.72。當(dāng)Xc為220 g/L時(shí),Hb的SE%是0.48;當(dāng)Xc為120 g/L時(shí),Hb的SE%是0.56;當(dāng)Xc為50 g/L時(shí),Hb的SE%是0.82,其SE%均低于WST403—2012《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)》及臨床血液學(xué)檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)里可允許總誤差(allowable total error,TEa)的一半,這表示在臨床上能夠接受這兩類項(xiàng)目的SE%,檢測(cè)結(jié)果相同;而K+、Cl-、Glu、Hct的SE%大于或部分大于TEa的1/2,其SE%臨床不可接受,說明檢測(cè)結(jié)果不一致,這4項(xiàng)須使用儀器廠家提供的參考區(qū),報(bào)告單應(yīng)有明確標(biāo)識(shí)提示臨床。
綜上所述,臨床上不能直接應(yīng)用血?dú)夥治鎏峁┑臋z測(cè)結(jié)果判定患者是否電解質(zhì)紊亂,但血?dú)夥治瞿芸焖倥袛嚯娊赓|(zhì)是否失衡和貧血,及時(shí)指導(dǎo)搶救。診斷依據(jù)還應(yīng)以常規(guī)儀器的檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn),血?dú)夥治鼋Y(jié)果非傳統(tǒng)項(xiàng)目,只能作為參考依據(jù);對(duì)重癥患者而言,快速、穩(wěn)定、可靠的生化檢測(cè)結(jié)果對(duì)臨床診療決策具有重要意義。動(dòng)脈血?dú)夥治鲇醚可?,檢測(cè)項(xiàng)目多,分析結(jié)果迅速,1~2 min就可出結(jié)果。筆者對(duì)血?dú)夥治鰞x的6個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目與VTROS4600和XN-1000的相同項(xiàng)目進(jìn)行了全面系統(tǒng)的比較分析,為臨床醫(yī)生尤其是重癥和急診搶救室使用動(dòng)脈血?dú)夥治鼋Y(jié)果提供了新的依據(jù)和方案[7]。