張紅占

摘要：口蹄疫在全球范圍內(nèi)都危害極大，目前國(guó)內(nèi)主要是通過(guò)疫苗注射的方式預(yù)防動(dòng)物口蹄疫的流行和感染。疫苗佐劑常和疫苗一起注射到動(dòng)物體內(nèi)，可增強(qiáng)疫苗的免疫功能，提高機(jī)體對(duì)口蹄疫的免疫力。該文介紹了幾種使用廣泛的疫苗佐劑，簡(jiǎn)單綜述了口蹄疫疫苗的研究概況。

關(guān)鍵詞：口蹄疫;疫苗;佐劑

中圖分類(lèi)號(hào)：S852.52文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2022.01.071

General Situation of Research on Adjuvant of Foot-and-Mouth Disease Vaccine

ZHANG Hongzhan

（Tongshi Animal Husbandry and Veterinary Station，Animal Husbandry Development Promotion Center，Pingyi County，Pingyi Shandong 273307，China）

Abstract：Foot-and-mouth disease is extremely harmful all over the world. At present，the prevalence and infection of animal foot-and-mouth disease is mainly prevented by vaccination in China. Vaccine adjuvants are often injected into animals together with vaccines，which can enhance the immune function of the vaccine and improve the body's immunity to foot-and-mouth disease. This article introduces several widely used vaccine adjuvants and briefly reviews the research status of foot-and-mouth disease vaccines.

Keywords：foot-and-mouth disease，vaccine，adjuvant

0引言

口蹄疫是一類(lèi)全球范圍內(nèi)暴發(fā)的流行病，養(yǎng)殖中主要通過(guò)注射疫苗進(jìn)行預(yù)防，通過(guò)注射抗原（如滅活性病毒）刺激機(jī)體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，提高機(jī)體內(nèi)抗體的濃度和質(zhì)量，從而提高機(jī)體免疫力。而疫苗佐劑可以延長(zhǎng)抗原在機(jī)體內(nèi)存活時(shí)間，主要起輔助作用。

1口蹄疫疫苗佐劑概況

自1947年，鋁鹽佐劑首次被證明可促進(jìn)口蹄疫疫苗發(fā)揮作用以來(lái)，各種新型的口蹄疫疫苗佐劑相繼出現(xiàn)，這些佐劑對(duì)于疫苗發(fā)揮免疫功能具有重要的作用。各種疫苗佐劑的作用方式和作用功效也有很大不同，且種類(lèi)繁多、功能齊全。目前應(yīng)用比較廣泛的有復(fù)合氫氧化鋁佐劑、CpG佐劑、細(xì)菌內(nèi)毒素佐劑、Th佐劑和中草藥類(lèi)佐劑，還有一些佐劑正在研究中，或者是可以用于佐劑的物質(zhì)，也能提升疫苗的免疫效果，如Avidine、鉀明磯佐劑、蜂膠佐劑等。

2口蹄疫疫苗佐劑種類(lèi)

2.1復(fù)合氫氧化鋁佐劑

復(fù)合型氫氧化鋁佐劑于2012年成功申請(qǐng)專(zhuān)利，它的配方包括20 mg/mL的氫氧化鋁佐劑、200 μg/mL的Polyl：C、200 μg/mL的R848。Polyl：C和R848均屬于免疫增強(qiáng)劑。李冬等[1]發(fā)現(xiàn)，此類(lèi)佐劑注射小鼠21 d時(shí)，產(chǎn)生了高達(dá)1：512的抗體效價(jià)，脾臟中的T淋巴細(xì)胞占比達(dá)21.2%，這說(shuō)明此類(lèi)佐劑具有增強(qiáng)動(dòng)物免疫力、降低口蹄疫發(fā)病率的作用。

2.2CpG佐劑

CpG佐劑也稱(chēng)CpG-ODA佐劑，是一類(lèi)寡聚脫氧核甘酸，作為一種新型的口蹄疫疫苗佐劑，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。據(jù)報(bào)道，CpG佐劑通過(guò)促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖，刺激機(jī)體產(chǎn)生穩(wěn)定性更高的抗體在豬口蹄疫疫苗注射中發(fā)揮重要的作用[2]。研究表明，與對(duì)照相比（2 mL口蹄疫高端疫苗），在0.5 mL的高端疫苗中加入相同濃度的CpG佐劑后，母體產(chǎn)生抗體的時(shí)間變短，免疫后2～4周后產(chǎn)生抗體的陽(yáng)性率也較對(duì)照高，這表明CpG佐劑可輔助機(jī)體在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生高陽(yáng)性率的抗體。

2.3細(xì)菌內(nèi)毒素佐劑

細(xì)菌內(nèi)毒素也可作為一種口蹄疫疫苗佐劑發(fā)揮作用，但是細(xì)菌內(nèi)毒素有毒，使用前需要用輻射等方法脫去細(xì)菌內(nèi)毒素的毒性。研究表明，細(xì)菌內(nèi)毒素經(jīng)輻射去毒后按照一定比例添加到滅活的口蹄疫疫苗中，可提高機(jī)體內(nèi)的抗原活性，從而提高機(jī)體免疫力。

2.4Th佐劑

T細(xì)胞組合型Th表位肽可幫助疫苗緩慢釋放，延長(zhǎng)疫苗作用時(shí)間，提高疫苗功效?？谔阋呤且环N小PNA病毒，Th佐劑（3D蛋白也稱(chēng)RNA聚合酶）是一種細(xì)胞表位肽。王世紅[3]發(fā)現(xiàn)，利用分子生物學(xué)技術(shù)純化如115和Th157，得到重組蛋白，并構(gòu)建載體在大腸桿菌中原位表達(dá)，并抽取豬的前腔靜脈血，進(jìn)行免疫試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加Th115佐劑或Th157佐劑的試驗(yàn)組較對(duì)照產(chǎn)生了更多的抗體，增殖了更多的T淋巴細(xì)胞。

2.5中草藥類(lèi)佐劑

中草藥類(lèi)口蹄疫疫苗佐劑因安全性高、綠色、毒副作用小、功能強(qiáng)大等優(yōu)點(diǎn)，使用頗多。

2.5.1黃芪多糖和人參皂昔Rb1

黃芪多糖和人參皂昔Rb1都屬于中藥成分，其中黃芪多糖是從中藥黃芪中提取出來(lái)的葡萄糖和阿拉伯糖聚合物，具有免疫調(diào)節(jié)的功能，參與機(jī)體細(xì)胞免疫過(guò)程。有報(bào)道稱(chēng)，紅芪紅糖（RHPS）以及黃芪多糖（APS）可增強(qiáng)小鼠的免疫力;人參皂昔Rb1是人參的主要部分，可提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，參與體液免疫和細(xì)胞免疫過(guò)程。

2.5.2白術(shù)提取物

白術(shù)是菊科藥用植物白術(shù)的根和莖，其提取物可作為佐劑提高機(jī)體對(duì)口蹄疫的免疫力。據(jù)報(bào)道，白術(shù)的各部分提取物，如白術(shù)多糖、脂類(lèi)和油類(lèi)等，可在細(xì)胞水平和轉(zhuǎn)錄水平上發(fā)生免疫反應(yīng)，對(duì)小鼠預(yù)防口蹄疫有不同程度的積極作用，其中與生理鹽水的對(duì)照相比，白術(shù)多糖可提高小鼠血清中抗體的濃度，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖，提高機(jī)體免疫水平，白術(shù)油類(lèi)和脂類(lèi)對(duì)增強(qiáng)小鼠免疫力的作用不明顯。此外，也有報(bào)道證明口服白術(shù)煎的水（100 g白術(shù)加入25倍水煎成）也可以增強(qiáng)口蹄疫疫苗的免疫功能。

其他的中藥類(lèi)佐劑還包括玄參、麥冬、甘草、黨參、丹參素和硫酸軟骨素等。

2.6鉀明礬佐劑

鉀明磯是一種沒(méi)有顏色和氣味的晶體，能溶于水。其已經(jīng)用于多種疫苗的研究，其中包括口蹄疫疫苗。在用于疫苗佐劑時(shí)，常將鉀明磯配制成含量為10%的溶液。

2.7蜂膠佐劑

蜂膠是養(yǎng)蜂業(yè)的一種副產(chǎn)品，其本質(zhì)是一種樹(shù)脂類(lèi)物質(zhì)，其中含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括多種氨基酸、多糖類(lèi)和大量的微量元素。其是一種具有生物活性的物質(zhì)，能起到免疫增強(qiáng)作用。其作用主要是通過(guò)提升巨噬細(xì)胞的作用，依次來(lái)促進(jìn)機(jī)體對(duì)抗體的免疫應(yīng)答能力，而且其免疫后的效果要明顯優(yōu)于氫氧化鋁佐劑苗。而且應(yīng)用蜂膠佐劑制成的疫苗接種豬后完全不會(huì)出現(xiàn)任何異常反應(yīng)。而且應(yīng)用蜂膠佐劑疫苗具有其自身的優(yōu)勢(shì)，接種動(dòng)物不會(huì)出現(xiàn)紅、腫等局部反應(yīng)，也不會(huì)出現(xiàn)嘔吐和精神不振等生理反應(yīng)。采用蜂膠制成的疫苗能更快地產(chǎn)生抗體，更早地產(chǎn)生保護(hù)力，我國(guó)養(yǎng)蜂業(yè)非常發(fā)達(dá)，因此蜂膠的產(chǎn)量也是大，蜂膠疫苗將會(huì)有廣闊的市場(chǎng)前景。

2.8Quil A佐劑

Quil A是一種植物皂甘，通常是通過(guò)從南美皂樹(shù)的樹(shù)皮中提取，其全稱(chēng)為三萜皂昔。應(yīng)用Quil A作為佐劑能提升口蹄疫疫苗的效果。通過(guò)試驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)在O型口蹄疫的疫苗中添加Quil A后能提升VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體以及細(xì)胞因子的水平，還可以增加了T淋巴細(xì)胞的增長(zhǎng)速度，從而提升疫苗的免疫效果。

2.9聚肌胞

聚肌胞是一種具有抗病毒效果的物質(zhì)，其呈現(xiàn)雙螺旋結(jié)構(gòu)，通過(guò)摩爾堿基相互配對(duì)后成為一種穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，現(xiàn)在已經(jīng)用它作為一種免疫佐劑進(jìn)行研究，在多種病毒疫苗中用作佐劑，如禽流感、口蹄疫等。聚肌胞能提升巨噬細(xì)胞的吞噬作用，還能增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷作用，在動(dòng)物體內(nèi)夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生大量的干擾素。其本身對(duì)一些病毒就有殺滅效果，如口蹄疫病毒和腦心肌炎病毒等，所以其作為病毒類(lèi)疫苗的佐劑具有很好的效果。

2.10脂質(zhì)體

脂質(zhì)體可分為3種，分別是陽(yáng)離子脂質(zhì)體、陰離子脂質(zhì)體和中性脂質(zhì)體。脂質(zhì)體主要用于DNA疫苗，是將脂質(zhì)體制作成為包囊，將DNA分子包裹后被宿主的細(xì)胞所吞噬，而后基因能在細(xì)胞內(nèi)得到充分表達(dá)，從而可以刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，起到良好的免疫效果。這類(lèi)疫苗通常應(yīng)用冷凍干燥法或者逆向蒸發(fā)法，有時(shí)可以將兩種方法結(jié)合使用。

3結(jié)束語(yǔ)

口蹄疫疫苗佐劑應(yīng)用極為廣泛，且疫苗佐劑在預(yù)防和控制口蹄疫病毒繁殖和傳播過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。大部分的疫苗都是由滅活的病毒和免疫增強(qiáng)佐劑構(gòu)成的。機(jī)體免疫系統(tǒng)主要包括體液免疫和細(xì)胞免疫兩方面，疫苗佐劑發(fā)揮功能也是從這兩個(gè)方面，比如，黃芪多糖參與機(jī)體細(xì)胞免疫過(guò)程，人參皂昔Rb1參與體液免疫和細(xì)胞免疫過(guò)程等。大多數(shù)佐劑研究都是在小鼠和豬體內(nèi)進(jìn)行的，能達(dá)到良好的增強(qiáng)免疫效果。疫苗佐劑應(yīng)用廣泛，且有著廣闊的發(fā)展前景。

參考文獻(xiàn)

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