魯 輪，張成中 （. 安徽省質(zhì)量和標(biāo)準(zhǔn)化研究院, 安徽 合肥 3000；. 海軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院, 上海 00433）

《中國(guó)藥典》2020 年版[1]于2020 年12 月30 日正式實(shí)施[2]。作者在執(zhí)行《中國(guó)藥典》2020 年版（一部）的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)藥材和飲片顯微鑒別標(biāo)準(zhǔn)存在較多問(wèn)題，收載的顯微標(biāo)準(zhǔn)正文存在整體不統(tǒng)一、項(xiàng)目規(guī)定不合理、個(gè)別標(biāo)準(zhǔn)收錄有誤、重要顯微特征遺漏等現(xiàn)象，影響藥材、飲片的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行。由于中藥材內(nèi)部結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，不同藥材內(nèi)部組織構(gòu)造多具有特異性，據(jù)此可以將不同來(lái)源的中藥材區(qū)分開(kāi)，從而達(dá)到鑒別中藥真?zhèn)渭皟?yōu)劣的目的?！吨袊?guó)藥典》作為顯微鑒別的法定標(biāo)準(zhǔn)，科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)、準(zhǔn)確的顯微鑒別標(biāo)準(zhǔn)對(duì)中藥質(zhì)量控制意義重大。目前，可見(jiàn)王雨青等[3]開(kāi)展的2020 年版《中國(guó)藥典》收載的多基原中藥材的性狀、顯微、理化、分子等方面研究。以及孟虎彪[4]整理近20 年中國(guó)知網(wǎng)中公開(kāi)發(fā)表的34 種道地藥材的性狀特征、顯微特征、生態(tài)特征和遺傳特征數(shù)據(jù)文獻(xiàn)，并將上述特征數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。但國(guó)內(nèi)尚無(wú)對(duì)2020 年版《中國(guó)藥典》藥材和飲片顯微鑒別做全面研究的報(bào)道。

因此，作者參考國(guó)內(nèi)中藥顯微權(quán)威文獻(xiàn)及結(jié)合日常顯微鑒別實(shí)驗(yàn)，對(duì)《中國(guó)藥典》2020 年版（一部）藥材和飲片顯微標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全面梳理，對(duì)顯微項(xiàng)目整體不統(tǒng)一、項(xiàng)目規(guī)定不合理、標(biāo)準(zhǔn)收錄有誤、重要顯微特征遺漏等方面進(jìn)行研究與探索，旨在修訂不合理指標(biāo)、改正錯(cuò)誤內(nèi)容、統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目，進(jìn)而保證顯微標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)用性、科學(xué)性與規(guī)范性，提高《中國(guó)藥典》顯微標(biāo)準(zhǔn)的可執(zhí)行性。2020 年版《中國(guó)藥典》正文頁(yè)碼在文中以“P”表示。2020 年版《中國(guó)藥典》在下文中簡(jiǎn)稱藥典。

1 顯微標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確性的商榷

1.1 收錄有誤

棕櫚【鑒別】（1）項(xiàng)下 “外側(cè)薄壁細(xì)胞含細(xì)小的草酸鈣簇晶”，飲片“棕櫚炭”【鑒別】（1）項(xiàng)下“含草酸鈣方晶”，前后矛盾。參照中藥草酸鈣結(jié)晶鏡檢方法[5]，對(duì)結(jié)晶的成分進(jìn)行驗(yàn)證，加稀鹽酸加熱后不溶解，加硫酸無(wú)針晶析出，偏光顯微鏡下觀察，無(wú)草酸鈣晶體偏光現(xiàn)象，可以判定此特征并非草酸鈣晶體。

柏子仁【來(lái)源】項(xiàng)下描述“秋、冬二季采收成熟種子，曬干，除去種皮，收集種仁”，表明藥材已除去種皮，但【鑒定】項(xiàng)下描述“種皮表皮細(xì)胞長(zhǎng)條形，常與含棕色色素的下皮細(xì)胞相連”，存在前后矛盾。

生姜為單子葉植物的根莖，不存在次生構(gòu)造，木栓層為次生構(gòu)造，而藥典卻將木栓層收載入生姜顯微標(biāo)準(zhǔn)（表1）。

表1 顯微特征收錄有誤品種

1.2 描述有誤

麥冬【鑒別】（1）項(xiàng)下“韌皮部束16～22 個(gè)”，國(guó)家藥典委員會(huì)編寫(xiě)的《中華人民共和國(guó)藥典中藥材顯微鑒別彩色圖鑒》附圖的麥冬橫切面韌皮部束為15 個(gè)[6]，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，麥冬橫切面韌皮部束可達(dá)23 個(gè)，建議藥典將麥冬項(xiàng)下顯微鑒別的韌皮部束限度進(jìn)行重新修訂。郁金【鑒別】（1）項(xiàng)下的描述是“中柱韌皮部束與木質(zhì)部束各40～55 個(gè)”，與文獻(xiàn)記載[7]存在較大差異。紫蘇葉藥材【鑒別】（1）項(xiàng)下“非腺毛…直徑16～346μm”，徐國(guó)鈞等[8]研究表明，紫蘇葉非腺毛直徑27～72μm。經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，紫蘇葉非腺毛直徑與徐國(guó)鈞等研究相符。其他藥材，如蓖麻子等也存在描述錯(cuò)誤的問(wèn)題（表2）。

表2 顯微特征限度問(wèn)題品種

1.3 重要特征遺漏

山茱萸【鑒別】（1）項(xiàng)下收載了山茱萸果皮表皮細(xì)胞、中果皮細(xì)胞、草酸鈣簇晶、石細(xì)胞4 種顯微特征，根據(jù)山茱萸科植物的特征山茱萸粉末應(yīng)含有菊糖[8-9]，經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，山茱萸中含有較多菊糖，且特征明顯、易觀察。此外，根據(jù)實(shí)驗(yàn)觀察及比對(duì)權(quán)威文獻(xiàn)[8-10]，對(duì)藥典中收載品種的粉末顯微鑒別進(jìn)行研究，整理遺漏專屬性強(qiáng)的粉末顯微特征的品種達(dá)30 余種（表3）。

表3 重要粉末特征遺漏品種

2 顯微標(biāo)準(zhǔn)可行性的探討

2.1 橫切面顯微特征缺乏執(zhí)行性

經(jīng)整理發(fā)現(xiàn)，本版藥典中藥橫切面顯微鑒別中收載了10 個(gè)菊糖、2 個(gè)橙皮苷結(jié)晶和70 個(gè)淀粉粒特征。此類特征遇熱不穩(wěn)定，在實(shí)際制片過(guò)程中，多使用徒手切片，再用水合氯醛加熱透化，而加熱后很難觀察到此類特征。若不加熱，由于徒手切片所制成的片較厚，透光性不高，也難以觀察到此類特征（表4）。

表4 橫切面顯微收載遇熱不穩(wěn)定顯微特征品種

2.2 顯微特征不具有專屬性

土茯苓顯微鑒別項(xiàng)下收載了粉末顯微，市場(chǎng)上常見(jiàn)其混偽品白土茯苓及云南土茯苓，而土茯苓與上述兩種混偽品在粉末顯微上并無(wú)明顯區(qū)別，故粉末顯微無(wú)法將土茯苓真?zhèn)螀^(qū)別，而橫切面組織顯微區(qū)別很明顯，土茯苓為有限外韌維管束，白土茯苓及云南土茯苓為周木維管束[11,12]。另有海風(fēng)藤、降香[13]等具有類似問(wèn)題（表5）。

表5 收載顯微特征不具有專屬性品種

2.3 顯微特征不易區(qū)分

洋金花（P279）顯微鑒別項(xiàng)下，共描述了花萼非腺毛、花冠裂片邊緣非腺毛、花絲基部非腺毛4 種非腺毛，且文字描述上較相似。經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，在粉末顯微中，很難區(qū)分4 種非腺毛，影響標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行。此種情況還存在于麥芽（P156）中，藥典收載了麥芒非腺毛、稃片表皮非腺毛和鱗片非腺毛；蔓荊子（P379）收載了花萼非腺毛及外果皮非腺毛。

3 顯微標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范性的探討

3.1 顯微特征描述不統(tǒng)一

谷芽【鑒別】項(xiàng)下“稃片表皮細(xì)胞淡黃色，回行彎曲，壁較厚，微木化，孔溝明顯”，而麥芽【鑒別】（1）項(xiàng)下 “稃片外表皮表面觀長(zhǎng)細(xì)胞與2 個(gè)短細(xì)胞（栓化細(xì)胞、硅質(zhì)細(xì)胞）交互排列；長(zhǎng)細(xì)胞壁厚，緊密深波狀彎曲，短細(xì)胞類圓形，有稀疏壁孔長(zhǎng)細(xì)胞壁厚，緊密深波狀彎曲”。同樣的顯微特征，一個(gè)描述為“回行彎曲”，一個(gè)描述為“深波狀彎曲”，同為中國(guó)藥典一部收載，應(yīng)在描述上統(tǒng)一。瓜蔞【鑒別】（1）項(xiàng)下，描述的是厚壁細(xì)胞（厚壁細(xì)胞較大，多單個(gè)散在，棕色，形狀多樣），而栝樓子【鑒別】（1）項(xiàng)下則描述為星狀細(xì)胞（星狀細(xì)胞淡棕色、淡綠色或幾無(wú)色，呈不規(guī)則長(zhǎng)方形或長(zhǎng)圓形，壁彎曲，具數(shù)個(gè)短分枝或突起，枝端鈍圓）（表6）。

表6 顯微特征描述的不統(tǒng)一品種

3.2 顯微特征描述不明確

在顯微鑒別中，木纖維和韌皮纖維是可以區(qū)分開(kāi)的，而且二者的形態(tài)差別較大，但在本版藥典中，存在著只描述纖維的狀況，未明確是木纖維還是韌皮纖維。如地榆【鑒別】（1）項(xiàng)下只描述纖維，從橫切面顯微看藥典描述的是“木纖維”，從粉末顯微看藥典描述的疑似“韌皮纖維”。其他如白芍、蒼術(shù)等也有類似問(wèn)題（表7）。

表7 顯微特征描述不清

還有多來(lái)源品種顯微特征描述不明確，不同來(lái)源的種間顯微特征差異不區(qū)分，本版藥典收載的中藥材及飲片收載較多的多來(lái)源品種，其中存在著顯微相近或不同等多種情況，而藥典中對(duì)顯微不同的多來(lái)源品種存在使用同一標(biāo)準(zhǔn)的情況。蒼術(shù)來(lái)源于茅蒼術(shù)或北蒼術(shù)，顯微標(biāo)準(zhǔn)收載的纖維實(shí)為木纖維，其中北蒼術(shù)有韌皮纖維，而茅蒼術(shù)無(wú)韌皮纖維。黃連項(xiàng)【鑒別】（1）項(xiàng)下，描述“髓部均為薄壁細(xì)胞，無(wú)石細(xì)胞”，賈敏如等[14]、楊靖雯[15]研究報(bào)道，味連根莖橫切面髓部確有石細(xì)胞，單個(gè)散在或數(shù)個(gè)成群，由于數(shù)量稀少，故在橫切面上有時(shí)看不到，且在石蠟切片中，特別是干藥材根莖髓部組織很容易脫落（表8）。天南星等多基源品種及其炮制品同樣存在顯微特征描述不足或錯(cuò)誤之處，甚至出現(xiàn)自相矛盾的情況[16]。

表8 多來(lái)源品種顯微特征描述不明確品種

4 討論

中藥顯微鑒別以其操作簡(jiǎn)單、方便、快捷的特點(diǎn)，以及準(zhǔn)確、可靠、專屬性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果而廣泛應(yīng)用于中藥材和飲片的鑒別，對(duì)于鑒別中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣具有重要意義。藥典是強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，其顯微鑒別標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)具備內(nèi)容準(zhǔn)確、邏輯嚴(yán)密、表達(dá)清晰、可執(zhí)行性強(qiáng)等基本特性，在實(shí)際執(zhí)行過(guò)程中發(fā)現(xiàn)藥典顯微鑒別標(biāo)準(zhǔn)存在較多的顯微特征收錄錯(cuò)誤、描述錯(cuò)誤、重要特征遺漏、部分顯微標(biāo)準(zhǔn)可操作性差等問(wèn)題。

藥典顯微鑒別標(biāo)準(zhǔn)是中藥檢驗(yàn)的法定依據(jù)，其標(biāo)準(zhǔn)的不規(guī)范、不統(tǒng)一、內(nèi)容錯(cuò)誤及部分標(biāo)準(zhǔn)缺乏執(zhí)行性，必將增加中藥檢驗(yàn)人員及監(jiān)管人員的工作阻力。在顯微標(biāo)準(zhǔn)的制定中，第一，須展開(kāi)藥材市場(chǎng)調(diào)研，掌握流通的藥材常見(jiàn)混偽品情況，并據(jù)此開(kāi)展顯微鑒別研究，參考國(guó)內(nèi)外專業(yè)文獻(xiàn)，制定專屬性顯微標(biāo)準(zhǔn)，做到標(biāo)準(zhǔn)專屬性強(qiáng)，重要顯微特征不遺漏且描述準(zhǔn)確。第二，制定的標(biāo)準(zhǔn)須符合國(guó)內(nèi)中藥企業(yè)的實(shí)際情況，在國(guó)內(nèi)大多數(shù)中藥企業(yè)無(wú)石蠟切片機(jī)或冷凍切片機(jī)的情況下，減少收錄橫切面菊糖、淀粉粒、橙皮苷結(jié)晶等穩(wěn)定性重現(xiàn)性不足的顯微特征。第三，中藥顯微特征描述具有較大的主觀性，其描述常常不統(tǒng)一，作為科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃幍洌鋬?nèi)容需規(guī)范統(tǒng)一，避免在執(zhí)行過(guò)程中產(chǎn)生誤解。

致謝：本文在寫(xiě)作過(guò)程中得到安徽中醫(yī)藥大學(xué)周建理老師、北京大學(xué)李耀利老師、天士力醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司肖寒老師以及廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所黃清泉老師的指導(dǎo)，在此表示感謝！