錢芳

北京市宣武中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科 （北京 100050）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種多發(fā)于青年女性的可累及多臟器的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病，發(fā)病率較低，但危害性較大。據(jù)我國(guó)衛(wèi)生部門統(tǒng)計(jì)，該病在我國(guó)的發(fā)病率為（30.13～70.41）/10萬(wàn)，發(fā)病早期患者癥狀并不明顯，容易被忽略，直至病情嚴(yán)重時(shí)才被發(fā)現(xiàn)，對(duì)患者身體健康造成極大的危害[1]。隨著免疫學(xué)的持續(xù)發(fā)展以及臨床對(duì)SLE 研究的深入，發(fā)現(xiàn)SLE患者血清中存在較多的標(biāo)志性抗體，因此，早期開(kāi)展相應(yīng)抗體檢測(cè)對(duì)SLE 的診斷具有重要的意義。現(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域關(guān)于SLE 的檢測(cè)方法有病理檢查、抗可溶性抗原（extractable nuclear antigen，ENA）檢測(cè)等，其中，ENA 檢測(cè)是早期診斷SLE 效果較好的一種方法。為了進(jìn)一步驗(yàn)證ENA 檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值，本研究選取我院收治的49例SLE 患者及49名健康體檢者進(jìn)行了回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1月至2021 年1月我院收治的49例SLE患者作為試驗(yàn)組，另選取同期來(lái)醫(yī)院的49名健康體檢者作為對(duì)照組。試驗(yàn)組男8例，女41例；年齡22～48歲，平均（35.46±3.25）歲。對(duì)照組男9名，女40名；年齡24～47歲，平均（35.47±4.32）歲。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：試驗(yàn)組符合SLE 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；試驗(yàn)組診療資料完整；受試者或家屬自愿簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴腎衰竭等重癥疾??；精神異常；存在語(yǔ)言功能障礙。

1.2 方法

兩組均行ENA 檢測(cè)，具體流程如下。（1）采集樣本：采集受試者空腹外周靜脈非抗凝血（2.5±0.5）ml，以4 000 r/min 離心4 min，取血清，用于ENA 檢測(cè)，需要注意的是，待制備出血清樣本后，盡量立即對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，若無(wú)法第一時(shí)間檢測(cè)，則應(yīng)將其放置于-20 ℃的環(huán)境下存儲(chǔ)[2]。（2）選擇試劑：在進(jìn)行ENA 檢測(cè)時(shí)，選擇歐蒙公司生產(chǎn)的型號(hào)為DL-1590-1601-2G 的免疫印記試劑。（3）測(cè)定步驟：在反應(yīng)槽內(nèi)鋪設(shè)一層印跡膜，之后分別倒入1.5 ml 的樣本緩沖液，并添加15 μl 的待測(cè)血清，將其放置到搖床內(nèi)在室溫條件下均勻搖晃30 min，去除槽內(nèi)的液體，再次添加1.5 ml 的洗滌液，通過(guò)5 min 洗滌后，去除槽內(nèi)的液體，按照相同方法洗滌3次后，利用吸水紙將樣本中的液體吸出；在反應(yīng)槽內(nèi)加入1.35 ml 的緩沖液，并倒入150 μl 的酶聯(lián)試劑，利用上述相同的方式對(duì)樣本處理3次并吸干液體；在反應(yīng)槽內(nèi)滴加1.5 ml 的底物液，將其放置到搖床內(nèi)均勻搖晃10 min，對(duì)樣本進(jìn)行顯色處理，當(dāng)樣本質(zhì)控帶與陽(yáng)性區(qū)帶顯色清晰后，倒出槽內(nèi)液體，用蒸餾水清洗3次，1.5 ml/次，取出印跡膜，利用吸水紙去除其中附著的水分，當(dāng)印跡膜干燥后，用EUROLINE 軟件判讀結(jié)果，進(jìn)而得到最終的ENA 檢測(cè)結(jié)果[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性檢出率，并分析各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)診斷SLE 的效能，其中，ENA 檢測(cè)指標(biāo)包含抗狼瘡細(xì)胞抗體（抗Sm 抗體）、抗U1小核糖核蛋白抗體（抗nRnp/Sm 抗體）、抗干燥綜合征A 抗體（抗SSA 抗體）、抗干燥綜合征B 抗體（抗SSB 抗體）、抗核糖體P 蛋白抗體（抗Rib 抗體）、抗Robert52抗體（抗RO-52抗體）、抗硬皮病抗原70抗體（抗Scl-70抗體）、抗多發(fā)性肌炎/皮肌炎標(biāo)記抗體（抗Jo-1抗體）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性檢出率比較

試驗(yàn)組抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽(yáng)性檢出率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組其他抗體的陽(yáng)性檢出率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.2 各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)診斷SLE 的效能比較

與各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的診斷靈敏度比較，各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的診斷特異度更高，且除抗nRnp/Sm 抗體外，其他抗體的診斷特異度均為100.00%，見(jiàn)表2。

表2 各項(xiàng)ENA檢測(cè)指標(biāo)診斷SLE的效能比較（%）

3 討論

SLE 是一種發(fā)病率較低，但會(huì)對(duì)患者身體健康造成極大危害的自身免疫性疾病?，F(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域雖并未給出準(zhǔn)確的SLE 的發(fā)病原理，但認(rèn)為誘發(fā)該病的原因包括以下幾個(gè)方面。（1）基因遺傳：通過(guò)對(duì)SLE 患者家屬進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)近50%患者的近親家屬患有SLE 或其他免疫系統(tǒng)疾病，且在同卵雙胞胎中，若有一人患有SLE，則另一人患SLE 的概率近70%，而在異卵雙胞胎中，兩人均患SLE 的概率僅有4%左右；此外，與SLE 相關(guān)的遺傳基因有很多（共包含50余個(gè)），如DR2、DR3、C4AQ 等。（2）雌激素：通過(guò)對(duì)現(xiàn)有SLE 患者進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)大部分患者的年齡為20～40歲，其中，妊娠期女性更易患SLE，但具體原因并不清楚。（3）環(huán)境因素：長(zhǎng)期處于高紫外線的環(huán)境中，受紫外線的照射，人體免疫功能會(huì)出現(xiàn)損傷，可能誘發(fā)SLE。（4）藥物或感染：服用青霉素等藥物，或被鏈球菌等感染，均可能誘發(fā)SLE[4]。對(duì)于SLE 患者，輕則會(huì)出現(xiàn)一些輕微的癥狀，干擾生活，重則會(huì)對(duì)身體各個(gè)組織或系統(tǒng)造成損傷，危害身體健康，因此，及早明確診斷對(duì)疾病的治療具有重要的意義。

現(xiàn)代醫(yī)療領(lǐng)域針對(duì)SLE 的檢測(cè)方法有很多，其中ENA 是應(yīng)用效果較好的一種方法。在ENA 檢測(cè)中，抗Sm 抗體為主要的檢測(cè)指標(biāo)，其所作用的抗原是U 族小分子細(xì)胞核核糖核蛋白顆粒，通過(guò)檢測(cè)該抗體，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)癥狀并不明顯的SLE，此外，SLE 患者若出現(xiàn)了抗Sm 抗體陽(yáng)性，將會(huì)對(duì)人體的中樞神經(jīng)造成損傷[5]。有研究指出，SLE 患者出現(xiàn)抗Sm 抗體陽(yáng)性時(shí)，一般會(huì)出現(xiàn)明顯的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，對(duì)SLE 的初步診斷具有重要的意義[6]。本研究結(jié)果顯示，SLE 患者抗Sm 抗體的陽(yáng)性檢出率為30.61%，與以往研究結(jié)果相似[7]。

理論上，在檢測(cè)抗Sm 抗體的基礎(chǔ)上，還應(yīng)檢測(cè)抗nRnp/Sm 抗體。當(dāng)SLE 患者處于疾病活動(dòng)期時(shí)，通常會(huì)出現(xiàn)一定的抗nRnp/Sm 抗體，待病情改善后，該抗體不會(huì)立即消失，在1～3年后該抗體的檢測(cè)值才會(huì)顯示為0，且檢測(cè)出抗nRnp/Sm 抗體的患者很少會(huì)出現(xiàn)腎病。本研究中，SLE 患者抗nRnp/Sm 抗體的陽(yáng)性檢出率為18.37%，低于現(xiàn)有研究成果[8]，出現(xiàn)這一差異的原因可能與病例數(shù)、操作流程存在差異有關(guān)。

另外，有研究表明，通過(guò)對(duì)抗SSA 抗體檢測(cè)結(jié)果的判斷，可初步評(píng)估患者是否患有SLE[9]。本研究中，SLE 患者抗SSA 抗體的陽(yáng)性檢出率高于健康體檢者，證實(shí)了上述觀點(diǎn)。另有研究表明，SLE患者的抗RO-52抗體檢測(cè)多呈陽(yáng)性，而當(dāng)患者經(jīng)過(guò)治療完全康復(fù)后，該指標(biāo)則轉(zhuǎn)為陰性[10]。本研究中，SLE患者抗RO-52抗體的陽(yáng)性檢出率為46.94%，而健康體檢者為0，證實(shí)了上述觀點(diǎn)。

本研究最終結(jié)果顯示，試驗(yàn)組抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽(yáng)性檢出率均高于對(duì)照組，兩組其他抗體的陽(yáng)性檢出率比較無(wú)顯著差異；與各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的診斷靈敏度比較，各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的診斷特異度更高，且除抗nRnp/Sm 抗體外，其他抗體的診斷特異度均為100.00%。

綜上所述，相較于健康體檢者，SLE 患者行ENA 檢測(cè)的抗Sm 抗體、抗SSA 抗體與抗RO-52抗體的陽(yáng)性檢出率更高，且相較于其他診斷價(jià)值評(píng)估項(xiàng)，各項(xiàng)ENA 檢測(cè)指標(biāo)的診斷特異度更高。