婁 俊 易 韻 儲(chǔ)小燕 鐘琳琳 王 超

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見惡性腫瘤，在全球患病致死率居高位[1]。目前臨床治療方案以化療藥物、手術(shù)及靶向藥物等聯(lián)合的綜合治療。本研究通過流式細(xì)胞儀檢測卵巢癌患者外周血T細(xì)胞亞群在整個(gè)治療過程中的變化，觀察其免疫功能變化規(guī)律，為臨床提供有價(jià)值的文獻(xiàn)資料。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年3月至2021年3月收治的70例均經(jīng)手術(shù)病理檢查證實(shí)的卵巢癌患者為研究對象，年齡為37～75歲，平均(57.9±8.39)歲，F(xiàn)IGO分期Ⅰ期6例，Ⅱ期7例，Ⅲ期38例，Ⅳ期19例。患者治療以化療加手術(shù)治療為主。本研究治療時(shí)段分為：治療早期、治療中期、治療后期；以手術(shù)為節(jié)點(diǎn)，手術(shù)前化療和手術(shù)為治療早期，手術(shù)后3個(gè)周期化療為治療中期，最后3個(gè)周期化療為治療后期。療效差是指患者腫瘤CA125下降不理想、上升和(或)影像學(xué)檢查提示病情進(jìn)展；復(fù)發(fā)患者指再次因卵巢惡性腫瘤復(fù)發(fā)入院；療效好是指患者規(guī)范完成治療療程，定期復(fù)查病情穩(wěn)定、無復(fù)發(fā)；本研究間隔時(shí)長≤2年。以上所有患者無免疫系統(tǒng)疾病，未服用免疫相關(guān)制劑，未行放療。

1.2 檢測方法

所有入組患者晨起空腹抽靜脈血5 ml，以肝素抗凝。紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞，隨后使用流式細(xì)胞儀檢測。觀察記錄CD3、CD4、CD8的數(shù)據(jù)，分析各淋巴細(xì)胞亞群情況；本實(shí)驗(yàn)CD3、CD4、CD8數(shù)據(jù)正常范圍分別為：770～2860個(gè)/μl、414～1440個(gè)/μl，238～1250個(gè)/μl。操作嚴(yán)格按照試劑盒儀器說明書進(jìn)行。各項(xiàng)數(shù)據(jù)上傳于數(shù)據(jù)庫。

1.3 治療方法

入組患者為卵巢癌初診患者，有意愿納入研究對象，經(jīng)我院卵巢癌規(guī)范化治療，手術(shù)方案根據(jù)患者術(shù)中探查具體情況，中晚期患者在第2～3個(gè)周期新輔助化療后手術(shù)，化療方案以紫杉醇類加鉑類經(jīng)典方案。有病理確診，如病理檢查提示其他性質(zhì)腫瘤給予剔除。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具顯著性。

2 結(jié)果

2.1 不同臨床分期卵巢癌外周血淋巴細(xì)胞亞群水平的比較

治療前早中期(Ⅰ、Ⅱ期)與晚期(Ⅲ、Ⅳ期)卵巢癌患者血CA125水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而不同臨床分期患者在年齡、淋巴細(xì)胞亞群數(shù)值、白細(xì)胞數(shù)量、堿性磷酸酶以及C-反應(yīng)蛋白水平比較無顯著性差異(P>0.05)，見表1。

表1 不同臨床分期卵巢癌患者各項(xiàng)指標(biāo)的比較

2.2 治療期間患者外周血淋巴細(xì)胞亞群水平變化

表2表明：在不同治療時(shí)期外周血CD3、CD4、CD8和白細(xì)胞數(shù)量、CA125數(shù)值，各組間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，治療前期CD4/CD8比值與治療中、后期比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表2 治療期間CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、白細(xì)胞、堿性磷酸酶、CA125水平對比

2.3 療效差、復(fù)發(fā)患者和療效好患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化

療效差者或復(fù)發(fā)者外周血淋巴細(xì)胞數(shù)呈下降趨勢或持續(xù)低下狀態(tài)，其比例與療效好患者比較有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 療效差、復(fù)發(fā)與療效好者淋巴細(xì)胞數(shù)變化(例，%)

3 討論

治療卵巢癌手段以化療結(jié)合手術(shù)為主綜合治療，化療作為卵巢癌必備治療方式，目前國際上公認(rèn)的上皮性卵巢癌化療一線方案為TP方案，即紫杉類化合物聯(lián)合鉑類抗腫瘤化療。兩類化療藥物作用機(jī)制:前者屬于植物類細(xì)胞周期特異性藥物，作用于細(xì)胞M期，加強(qiáng)微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，導(dǎo)致形成非功能性微管束，破壞腫瘤細(xì)胞有絲分裂；后者鉑類化療藥屬于細(xì)胞周期非特異性藥物，直接破壞DNA并阻止其復(fù)制的藥物。TP化療對卵巢癌患者雖然能起到殺死腫瘤細(xì)胞和防止復(fù)發(fā)，但機(jī)體正常細(xì)胞對化療藥物的耐受性不可忽視。卵巢癌分期手術(shù)和腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)為卵巢癌治療的首選，是有效治療手段。有文章報(bào)道[2]惡性腫瘤外周血T淋巴細(xì)胞亞群隨著腫瘤病情的進(jìn)展，體內(nèi)CD4、CD4/CD8比值降低，通過手術(shù)后癌細(xì)胞減少，體內(nèi)可能存在的免疫抑制因子失活，CD4、CD4/CD8比值上升至正常水平。本實(shí)驗(yàn)研究顯示患者治療早期因腫瘤細(xì)胞抑制和減負(fù)，機(jī)體免疫系統(tǒng)得已重建并提升；而治療晚期可能因多次化療導(dǎo)致機(jī)體整體免疫系統(tǒng)受損并對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抑制作用。

T淋巴細(xì)胞作為一種胸腺依賴性淋巴細(xì)胞，T細(xì)胞活化及其細(xì)胞因子表達(dá)在抗腫瘤免疫效應(yīng)中發(fā)揮重要作用[3]。外周血T淋巴細(xì)胞目前研究多為CD3、CD4、CD8，CD3起到傳遞抗原信息并激活T細(xì)胞，CD4為協(xié)助并增強(qiáng)免疫能力，CD8為殺傷T細(xì)胞，直接識別、殺傷異常細(xì)胞，且具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，CD4/CD8比值的恒定維持著細(xì)胞免疫反應(yīng)的平衡。免疫功能低下存在于內(nèi)在因素及外在因素，包括自身免疫系統(tǒng)缺陷，腫瘤對免疫系統(tǒng)的抑制及長期應(yīng)用藥物對免疫細(xì)胞的殺傷。從研究資料圖表卵巢癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化進(jìn)行分析，入院中晚期卵巢癌患者因自身?xiàng)l件因素免疫系統(tǒng)存在不同程度下降；患者經(jīng)化療后，從圖表免疫系統(tǒng)CD3、CD4、CD8、CD4/CD8的數(shù)值來分析，前期治療過程中能有效改善及恢復(fù)免疫系統(tǒng)，早前階段化療能促進(jìn)免疫系統(tǒng)修復(fù)；后期化療對患者免疫系統(tǒng)可能有一定損傷，大部分患者在第5個(gè)周期化療后患者免疫系統(tǒng)急劇下降，且臨床觀察發(fā)現(xiàn)多周期化療后藥物累積毒副反應(yīng)加重，白細(xì)胞減少、胃腸反應(yīng)程度、肝腎功能受損等相應(yīng)提升。大量文獻(xiàn)報(bào)道[4]，給予多次化療患者聯(lián)合生物免疫治療，治療效果更好，患者依從性更強(qiáng)，能有效提高患者治療率，對患者生活質(zhì)量也能起到積極作用。因此我們可以得出結(jié)論，卵巢癌晚期患者在需要行化療同時(shí)，建議可適當(dāng)予免疫支持治療，CA125下降理想且能穩(wěn)定保持，在提高患者療效同時(shí)還能助于改善其機(jī)體免疫系統(tǒng)。

有部分研究報(bào)道[5]，卵巢癌病情嚴(yán)重程度與免疫系統(tǒng)受損程度呈正相關(guān)，病情越晚，免疫功能越差。本實(shí)驗(yàn)研究所述，入院檢測卵巢癌患者免疫功能低下，病情早晚與她們的免疫狀態(tài)無明顯相關(guān)性，治療后免疫淋巴細(xì)胞存在改變，通過測定不同治療時(shí)段的卵巢癌患者外周血免疫細(xì)胞數(shù)值，了解卵巢癌免疫功能狀態(tài)，為治療評判療效可提供參考，也為今后腫瘤免疫治療時(shí)機(jī)選擇提供數(shù)據(jù)支持。免疫治療[6]在腫瘤患者運(yùn)用前景廣泛，方式多樣，目前單用免疫檢查點(diǎn)抑制劑單克隆治療，如PD-1或PD-L1，效果欠佳，聯(lián)合化療、靶向藥物治療已取得一些臨床數(shù)據(jù)，有部分?jǐn)?shù)據(jù)是可喜的，表明免疫治療有治療意義所在；研究[7]進(jìn)一步還表明，PD-1聯(lián)合PAPPi抑制劑治療發(fā)現(xiàn)對于BRCA突變、重組缺陷患者來說效果更好。還有更多研究實(shí)驗(yàn)在探索免疫治療藥物對卵巢癌患者的療效中，我們臨床醫(yī)師期待更多驚喜。