劉 穎 任中海 張英麗

流行病學(xué)報(bào)道分析發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的發(fā)病率可超過850/10萬(wàn)人左右[1]。臨床上NSCLC的發(fā)生能夠?qū)е禄颊吆粑δ艿娘@著惡化，增加了肺癌患者遠(yuǎn)期病死和致殘的風(fēng)險(xiǎn)[2]。臨床上通過對(duì)于NSCLC的早期非創(chuàng)傷性檢測(cè)，能夠?yàn)榧膊〉脑缙谠\斷提供依據(jù)。血清腫瘤調(diào)控蛋白的檢測(cè)，能夠?yàn)閻盒阅[瘤的診斷提供參考。神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)是癌細(xì)胞骨戒結(jié)構(gòu)蛋白，其能夠在癌細(xì)胞異常分裂的過程中顯著釋放[3]；組織多肽抗原(TPA)是癌細(xì)胞膜糖蛋白成分，其能夠翻譯癌細(xì)胞的持續(xù)性自我擴(kuò)增狀態(tài)，反應(yīng)癌細(xì)胞的異常凋亡分解速度[4]；泌素釋放肽前體(ProGRP)不僅能夠影響到胃腸道激素的分泌，同時(shí)還能夠影響到癌細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)錄調(diào)控過程[5]。為了揭示NSE、ProGRP、TPA在肺癌患者中的表達(dá)情況，從而為臨床上肺癌的診斷提供參考，本次研究選取2018年8月～2020年5月本院經(jīng)病理學(xué)檢查確診的74例NSCLC患者，探討了NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)情況及其診斷學(xué)價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象

收集我院在2018年8月～2020年5月期間經(jīng)病理學(xué)檢查確診的74例NSCLC患者(NSCLC組)、選取同期在體檢中心獲取的60例健康成年人作為志愿者(對(duì)照組)。其中NSCLC組，年齡41～75歲，平均年齡(63.0±9.4)歲；性別：男性40例，女性34例；TNM分期：Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期26例、Ⅳ期8例；腫瘤直徑≥3 cm 31例、<3 cm 43例。對(duì)照組60例，年齡40～75歲，平均年齡(60.8±10.4)歲；性別：男性31例，女性29例。二組研究對(duì)象在上述的一般資料方面進(jìn)行比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

診斷標(biāo)準(zhǔn)：NSCLC患者診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)[6]；納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者年齡在19～75歲以內(nèi)；②經(jīng)胸部CT、MRI檢查及病理學(xué)檢查確診，病理學(xué)類型為腺癌或者鱗癌；③既往未接受放化療、免疫學(xué)治療；④對(duì)照組來(lái)源于本院體檢中心結(jié)果健康的自愿者；⑤本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肺部疾病等；②長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑者；③其他部位感染及其他系統(tǒng)的重大疾病；④類風(fēng)濕性疾病、免疫系統(tǒng)疾病患者。

1.3 檢測(cè)方法

采用患者靜脈血離心后取其上清液放入空白孔中，加入稀釋液、孵育、清洗等處理后，再加入TMB顯色底液(品牌：YSRIBIO ，由湖州英創(chuàng)生物科技公司生產(chǎn))、孵育后，倒入終止液3 min內(nèi)檢測(cè)OD450值，BioTek酶標(biāo)儀購(gòu)由美國(guó)伯騰儀器有限公司生產(chǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 NSCLC組和對(duì)照組血清NSE、ProGRP、TPA水平比較

NSCLC組患者血清NSE、ProGRP、TPA水平均高于對(duì)照組，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；見表1。

表1 兩組血清NSE、ProGRP、TPA水平比較

2.2 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測(cè)診斷NSCLC的價(jià)值

血清NSE診斷NSCLC的靈敏度為34.82%、特異度為81.66%、ROC曲線下面積AUC值為0.623；血清ProGRP診斷NSCLC的靈敏度為42.74%、特異度為84.09%、ROC曲線下面積AUC值為0.668；血清TPA診斷NSCLC的靈敏度為51.28%、特異度為89.63%、ROC曲線下面積AUC值為0.704；血清NSE、ProGRP、TPA水平聯(lián)合診斷NSCLC的靈敏度為93.20%、特異度為83.87%、ROC曲線下面積AUC值為0.879；見表2、圖1。

表2 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測(cè)對(duì)NSCLC的診斷價(jià)值

圖1 血清NSE、ProGRP、TPA水平檢測(cè)診斷NSCLC的ROC曲線

3 討論

NSCLC具有較高的總體發(fā)病率，其在不同類型的肺癌患者中，NSCLC的發(fā)病比例較高，其遠(yuǎn)期病死的風(fēng)險(xiǎn)也明顯上升[7]。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者的生存預(yù)后惡化較為明顯，多數(shù)NSCLC患者臨床確診時(shí)已處于疾病的中晚期[8]。而通過早期診斷NSCLC，能夠?yàn)榕R床上NSCLC的根治性手術(shù)治療提供契機(jī)，從而改善NSCLC患者的整體臨床預(yù)后?，F(xiàn)階段影像學(xué)檢查雖然能夠在NSCLC的診斷過程中發(fā)揮作用，但依靠胸部CT等檢查診斷NSCLC的靈敏度較低，其對(duì)于早期NSCLC診斷的可靠性仍然存在一定的局限。血清學(xué)方面的腫瘤指標(biāo)，能夠發(fā)揮其定量化和檢測(cè)便捷的特點(diǎn)，在惡性腫瘤的早期篩查和診斷過程中具有重要輔助參考價(jià)值。雖然癌胚抗原或者糖鏈蛋白能夠在NSCLC的診斷中發(fā)揮作用，但依靠癌胚抗原或者糖鏈蛋白診斷NSCLC的假陽(yáng)性率仍然較高[7]。本次研究通過對(duì)于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)分析研究，能夠?yàn)榕R床上肺癌的診斷提供新的研究指標(biāo)。

NSE是神經(jīng)特異性烯醇化酶，其主要表達(dá)于神經(jīng)組織、間質(zhì)成分等中，在癌細(xì)胞異常分裂的過程中，癌細(xì)胞內(nèi)骨架結(jié)構(gòu)蛋白的分解，能夠顯著促進(jìn)NSE的釋放[9]；ProGRP是胃泌素釋放前體物質(zhì)，其對(duì)于腫瘤細(xì)胞增殖調(diào)控的影響，能夠提高上皮來(lái)源惡性腫瘤細(xì)胞的DNA分裂速度。相關(guān)分子生物學(xué)的研究還認(rèn)為，ProGRP對(duì)于腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的改變，能夠提高中晚期腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)[10-11]；TPA是組織多肽抗原，其能夠在腫瘤細(xì)胞膜破碎的過程中顯著釋放，并能夠反應(yīng)癌細(xì)胞的增殖活躍狀態(tài)[12]。

本次研究通過對(duì)于NSCLC患者血清中NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)分析可見，在肺癌病例組患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)濃度明顯上升，高于健康對(duì)照成年組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，表明NSE、ProGRP、TPA的高表達(dá)均能夠影響到肺癌的病情進(jìn)展過程。NSE、ProGRP、TPA的高表達(dá)，主要考慮由于癌細(xì)胞增殖活性的增強(qiáng)、癌細(xì)胞浸潤(rùn)行為的惡化及癌細(xì)胞核DNA的異常分裂等有關(guān)，多種病理性途徑的激活，最終均能夠促進(jìn)NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)釋放。其他研究也表明，NSE的表達(dá)濃度在肺癌患者血清中可隨著患者病情的惡化而顯著升高，如果合并有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或者遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)傾向的患者，其NSE的表達(dá)濃度均明顯升高[13,14]。診斷學(xué)方面的分析可見，NSE、ProGRP、TPA在單獨(dú)診斷肺癌的過程中均具有一定的價(jià)值，NSE、ProGRP、TPA指標(biāo)超過血清中檢測(cè)臨界值時(shí)，其診斷NSCLC的靈敏度雖然較低，但其診斷的特異度可超過70%以上，可靠性較為明顯。但單獨(dú)NSE、ProGRP、TPA檢測(cè)的靈敏度較低，其原因主要由于單一的指標(biāo)檢測(cè)，難以對(duì)于不同類型來(lái)源的NSCLC均具有較高的特異性標(biāo)志作用。而通過聯(lián)合NSE、ProGRP、TPA進(jìn)行檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)其診斷的靈敏度可超過90%以上，診斷的特異度也有所上升，提示了聯(lián)合檢測(cè)的現(xiàn)實(shí)參考意義。這主要由于聯(lián)合不同指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，能夠避免單一指標(biāo)個(gè)體表達(dá)差異導(dǎo)致的診斷效能的下降。但有研究者認(rèn)為，通過NSE、ProGRP等指標(biāo)聯(lián)合診斷，其診斷NSCLC的靈敏度仍然不超過50%[15-16]，不同的研究之間數(shù)據(jù)差別較大，考慮由于入組病例數(shù)量及檢測(cè)方式的不同有關(guān)。

綜上所述，在NSCLC患者血清中，NSE、ProGRP、TPA的表達(dá)濃度明顯上升，同時(shí)NSE、ProGRP、TPA在聯(lián)合檢測(cè)的過程中，其可以顯著提高NSCLC的診斷效能。本次研究的現(xiàn)實(shí)意義在于探討了NSE、ProGRP、TPA的具體診斷臨界值。