李海燕 徐 芳 李 媛 李 娟

口腔鱗狀細胞癌的發(fā)病率具有較高的逐年上升趨勢，在長期吸煙或者高溫飲食的患者中，口腔鱗狀細胞癌的發(fā)病率可繼續(xù)上升[1]。分子生物學蛋白能夠在癌細胞的生物學行為調(diào)控過程中發(fā)揮作用，其對于癌細胞增殖、凋亡及分化的調(diào)控障礙，可以增加早期鱗狀上皮細胞異常病變的風險。其中磷酸酶及張力蛋白同源基因蛋白(PTEN)能夠通過影響到磷酸激酶的活性，影響癌細胞內(nèi)效應蛋白的磷酸化過程，最終降低癌細胞的自我持續(xù)增殖速度[2]；補丁蛋白(Ptch)是癌細胞轉錄調(diào)控相關蛋白，其對于遺傳物質(zhì)結構的修飾作用，能夠增加癌細胞DNA的異常分裂風險[3]。為了揭示PTEN、Ptch在口腔鱗狀上皮細胞癌患者中的表達情況，本次研究選取2017年1月至2020年3月我院保存的口腔鱗狀細胞癌組織標本78例，探討了相關蛋白的表達情況。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2020年3月我院保存的口腔鱗狀細胞癌組織標本78例，其中男性42例，女性36例；年齡31～66歲，平均年齡(48.27±8.99)歲；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期55例，Ⅲ～Ⅳ期23例；高分化38例，中低分化40例；有淋巴結轉移35例。納入標準：均經(jīng)病理學確診；臨床病理資料完整；術前無放化療等抗腫瘤治療史。排除標準：合并有其他惡性腫瘤者。同時選取正常口腔組織標本56例作為對照，兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 實驗方法

將石蠟切片，脫水、清洗、加入一抗、二抗、孵育、顯色、封片。

1.3 判斷標準

根據(jù)染色強度：淡黃色為1分、黃棕色為2分，棕褐色為3分；根據(jù)陽性細胞比例：<5%為0分，5%～24%為1分，25%～49%為2分，50%～74%為3分，>75%為4分。染色得分與陽性細胞得分之和≥3分為陽性表達。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 口腔鱗狀細胞癌和正?？谇唤M織中PTEN、Ptch表達情況

口腔鱗狀細胞癌中PETN陽性表達率明顯低于正常口腔組織(P<0.05)，而Ptch陽性表達率明顯高于正?？谇唤M織(P<0.05)，見表2。

表2 口腔鱗狀細胞癌和正?？谇唤M織中PTEN、Ptch表達(例，%)

2.2 PTEN、Ptch表達與患者臨床病理的關系

TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化和有淋巴結轉移口腔鱗狀細胞癌組織PETN陽性表達率明顯低于Ⅰ～Ⅱ期、高分化和無淋巴結轉移口腔鱗狀細胞癌組織(P<0.05)；TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移口腔鱗狀細胞癌組織Ptch陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移口腔鱗狀細胞癌組織(P<0.05)，見表3。

表3 PTEN、Ptch表達與患者臨床病理的關系(例，%)

2.3 相關性分析

口腔鱗狀細胞癌組織中PETN表達與Ptch表達呈負相關(γs=-0.655，P<0.05)，見表4。

表4 相關性分析/例

3 討論

口腔鱗狀上皮細胞的異常病變，主要由于長期物理性、生物性損傷修復過程中的基因突破有關。在癌基因異常累積的過程中，部分癌細胞增殖調(diào)控及凋亡體系的紊亂，最終能夠提高口腔鱗狀上皮癌的發(fā)生風險[4]?？谇击[狀上皮癌的發(fā)生，能夠顯著影響到患者的生活質(zhì)量，并能夠增加口腔癌患者遠期病死的幾率[5,6]。通過對于口腔鱗狀上皮癌發(fā)病過程中的基礎生物學機理的研究，能夠為臨床上口腔的病情評估、臨床預后隨訪提供參考。同時鑒于近年來免疫靶向治療在惡性腫瘤的整體性治療過程中發(fā)揮了重要的作用，本次研究通過對于口腔鱗狀上皮癌患者病灶組織中PETN與Ptch的表達分析，不僅能夠從另外的角度揭示口腔癌的發(fā)生機理，同時還能夠為臨床上口腔癌的免疫靶向治療提供新的作用靶點。

PETN作為抑癌基因相關家族成員，其對于癌細胞遺傳物質(zhì)的錯配修復作用，能夠顯著降低癌細胞基因錯配的風險。分子領域的分析研究還認為，PETN還能夠影響到癌細胞內(nèi)信號通路的上調(diào)程度，干預到MAPK或者PI3K信號通路的激活過程，最終影響到癌細胞DNA的擴增速度[7]；Ptch是補丁蛋白家族成員，其對于癌細胞轉錄調(diào)控上游結合蛋白的補丁作用，能夠提高癌細胞紡錘體或者細胞器的轉錄翻譯速度。Ptch作為細胞內(nèi)第二信使的修飾蛋白，其對于信號通路MAPK等的激活，能夠進一步影響到惡性腫瘤的發(fā)生過程。有少量的研究揭示了PETN蛋白在口腔癌患者病灶組織中的表達情況，認為在口腔癌患者中，PETN蛋白的表達濃度或者表達陽性率水平明顯下降[8-9]，但對于Ptch的分析研究較少。

通過對于PETN與Ptch蛋白的表達陽性率的分析可見，在口腔鱗狀細胞癌患者中，病灶組織中PETN蛋白的表達陽性率明顯下降，而Ptch蛋白的表達陽性率水平明顯上升，較良性口腔組織均具有統(tǒng)計學差異，表明PETN與Ptch蛋白在口腔癌患者中具有差異性表達的趨勢，這可能是因為 PTEN蛋白能調(diào)控細胞周期，PTEN 蛋白具有脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶的雙重活性，可使第二信使PIP3去磷酸化，進而阻斷相應的信號傳導系統(tǒng)；而Ptch蛋白是通過自分泌和旁分泌來調(diào)節(jié)新生血管形成，使腫瘤細胞發(fā)生上皮細胞-間質(zhì)轉化，刺激腫瘤細胞生長及誘導腫瘤轉移。PETN與Ptch蛋白的異常表達現(xiàn)象，主要由于口腔鱗狀細胞癌生物學特征的惡化，能夠影響到多種病理生理機制，影響到癌基因的錯配修復能力，最終影響到PETN與Ptch蛋白的合成和釋放。免疫組化染色可見，Ptch蛋白的染色具有不同的強度，在鱗狀細胞癌細胞異型性較為明顯，或者癌細胞形態(tài)不規(guī)則的區(qū)域，Ptch蛋白的染色強度較深，推測Ptch可能在口腔鱗狀細胞癌細胞生物學特征的調(diào)控方面發(fā)揮了作用[10]。有其他研究者也認為，在口腔癌患者中，PETN蛋白的表達濃度可隨著口腔癌細胞轉移風險的上升而下降，在合并局部頸部淋巴結或者局部腫塊較大的組織中，PETN蛋白的表達陽性率較低[11-15]。在不同的臨床病理特征的口腔癌患者中，可以發(fā)現(xiàn)在臨床終末期、發(fā)生了淋巴結轉移或者癌細胞分化程度較低的患者，其病灶組織中PETN蛋白的表達陽性率較低，表明PETN能夠影響到口腔鱗狀細胞癌的整體性病情進展，這主要由于PETN的下降能夠影響到癌基因的激活，提高了癌細胞的浸潤和轉移風險，最終促進了口腔癌臨床病理特征的進展；在有淋巴結組織轉移的患者中，Ptch蛋白的表達陽性率較高，表明Ptch也能夠顯著影響到口腔癌的病情進展，其中具體的機制不清，但考慮由于其能夠影響到鱗狀細胞上游轉錄啟動子TAAT盒子的激活程度，提高了癌細胞的轉錄過程，增加了癌細胞對于淋巴結內(nèi)皮組織的粘附能力[16-19]。

綜上所述，在口腔鱗狀細胞癌患者中，PETN蛋白的表達陽性率明顯下降，而Ptch蛋白的表達陽性率明顯上升，同時PETN與Ptch的表達能夠影響到口腔癌淋巴結轉移等病理特征的進展。本文的局限在于未深入探討PETN與Ptch的表達與口腔癌復發(fā)或者治療預后的關系。