羅付成，唐 華

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，重慶 400042)

結(jié)直腸癌(CRC)是常見癌癥之一。據(jù)2020年全球癌癥統(tǒng)計，CRC發(fā)生率在所有癌癥中占10.0%，成為第三大常見腫瘤，其死亡率僅次于肺癌，是癌癥死亡的主要原因之一[1]。微衛(wèi)星狀態(tài)對CRC的發(fā)展、預(yù)后及輔助治療均具有重要的指導(dǎo)作用。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫密切相關(guān)。T淋巴細(xì)胞亞群的生物功能具有多樣性，常作為判定機(jī)體細(xì)胞免疫功能優(yōu)劣的指標(biāo)[2]，也是影響CRC患者預(yù)后的主要因素之一，其可提供關(guān)于CRC疾病進(jìn)展的潛在重要信息[3]。但外周血T淋巴細(xì)胞亞群與微衛(wèi)星狀態(tài)的關(guān)系尚不清楚，相關(guān)研究甚少。本研究擬通過分析微衛(wèi)星狀態(tài)與CRC的臨床病理特征、外周血T淋巴細(xì)胞的關(guān)系，了解不同微衛(wèi)星狀態(tài)CRC患者免疫狀態(tài)，以期為CRC患者的預(yù)后提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2020年12月本院收治的825例CRC患者，根據(jù)微衛(wèi)星狀態(tài)分為微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定(MSI-H)組(90例)和微衛(wèi)星穩(wěn)定/微衛(wèi)星低度不穩(wěn)定(MSS/MSI-L)組(735例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)明確診斷為CRC，均由術(shù)后病理證實；(2)術(shù)前均行外周血淋巴細(xì)胞亞群水平檢測；(3)術(shù)后均采用多重聚合酶鏈反應(yīng)-毛細(xì)管電泳法檢測微衛(wèi)星狀態(tài)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往腸癌病史或其他惡性腫瘤病史；(2)術(shù)前有化療、放療及免疫治療史；(3)有損害免疫功能的病史，如乙型肝炎、梅毒等。(4)近期有明確感染史；(5)多原發(fā)CRC。

1.2方法 回顧性收集患者臨床資料，包括年齡、性別及術(shù)前糖類抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、外周血淋巴細(xì)胞亞群水平，以及術(shù)后病理特征，如腫瘤部位、腫瘤分化程度、腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)檢出數(shù)等。比較2組臨床病理特征及外周血淋巴細(xì)胞亞群水平。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS26.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。計數(shù)資料以率或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher精確檢驗。計量資料以M(P25，P75)表示，組間比較采用曼-惠特尼U檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.12組臨床病理特征比較 2組在年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤病理類型、腫瘤分化程度、腫瘤TNM分期及淋巴結(jié)檢出數(shù)方面比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),在CEA、CA19-9水平方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組臨床病理特征比較

2.22組外周血淋巴細(xì)胞亞群水平比較 2組外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而CD4+/CD8+值及自然殺傷細(xì)胞、自然殺傷T細(xì)胞水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 2組外周血淋巴細(xì)胞亞群水平比較[M(P25，P75)]

3 討 論

CRC的發(fā)生是由遺傳、環(huán)境等多種因素相互作用引起多基因改變的復(fù)雜過程，其中MSI是CRC發(fā)生的重要分子途徑之一[4]。7%～15%的CRC患者表現(xiàn)為MSI-H。本研究中，MSI-H患者占比10.9%(90/825)，與文獻(xiàn)一致[5-6]。MSI-H在不同腫瘤TNM分期中表現(xiàn)不同，MSI-H在Ⅱ期CRC中(20%)更為常見，在Ⅲ期(12%)和Ⅳ期(4%)CRC中相對少見[7]。MSI-H的CRC患者常具有較為特殊的臨床病理特征，如CRC多發(fā)于右半結(jié)腸、低分化、富含黏液及印戒細(xì)胞成分[8-9]。本研究結(jié)果顯示，MSI-H組淋巴結(jié)檢出數(shù)顯著多于MSS/MSI-L組。這可能是MSI-H患者預(yù)后良好因素之一。BELT等[10]研究認(rèn)為，MSI-H與更多的淋巴結(jié)檢出數(shù)密切相關(guān)。高淋巴結(jié)檢出率是較低的疾病復(fù)發(fā)率和較好的無病生存率的指標(biāo)[11-12]，這可能與淋巴細(xì)胞浸潤及有效的抗腫瘤免疫反應(yīng)相關(guān)[13]?？鼓[瘤免疫反應(yīng)越強(qiáng)，淋巴結(jié)越大，因此更容易被檢出[14]。

MSI-H是Ⅱ期CRC患者的有利預(yù)后因素。與MSS的CRC患者相比，MSI-H的CRC患者死亡和復(fù)發(fā)的風(fēng)險可降低40%[15]。這種預(yù)后良好似乎與腫瘤微環(huán)境的腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞有關(guān)[16]。有研究發(fā)現(xiàn)，MSI-H的CRC具有高密度的CD3+T、CD4+T及CD8+T腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞[17-18]。提示MSI-H的CRC患者特別容易產(chǎn)生局部細(xì)胞毒性細(xì)胞免疫反應(yīng)，表現(xiàn)出更好的預(yù)后[19]。MSI-H腫瘤微環(huán)境或腫瘤周邊的淋巴細(xì)胞浸潤與預(yù)后關(guān)系的研究較多見，但探討MSI-H與外周血淋巴細(xì)胞亞群關(guān)系及作用的研究較少見。

本研究結(jié)果顯示，MSI-H組外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞水平高于MSS/MSI-L組。這可能與MSI-H的CRC患者具有高抗原負(fù)荷及免疫原性有關(guān)。MSI-H的CRC患者通過高腫瘤突變負(fù)荷在組織相容性復(fù)合物上產(chǎn)生大量免疫原性新抗原，專職抗原提呈細(xì)胞攝取腫瘤抗原后，移行到外周淋巴結(jié)，供T淋巴細(xì)胞識別；激活的T淋巴細(xì)胞通過血液到達(dá)腫瘤部位發(fā)揮攻擊和殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，同時釋放腫瘤抗原，增強(qiáng)腫瘤-免疫循環(huán)能力，最終消滅腫瘤[20]。而淋巴細(xì)胞的運輸與高內(nèi)皮微靜脈(HEV)密切相關(guān)，后者是專門用于淋巴細(xì)胞運輸?shù)拿?xì)血管后小靜脈[21]。與MSS的CRC患者相比，MSI-H的CRC患者HEV密度會增加，表明HEV可能通過將循環(huán)淋巴細(xì)胞從血流直接運輸?shù)侥[瘤部位[22]，從而使MSI-H的CRC患者表現(xiàn)出更高水平的CD3+T、CD4+T和CD8+T淋巴細(xì)胞浸潤。低水平循環(huán)淋巴細(xì)胞預(yù)示MSI-H的CRC患者總生存期和無病生存期較短。對癌癥的獲得性免疫控制在MSI-H的CRC患者中更為突出，這種控制的喪失對其預(yù)后有顯著影響[23-24]。目前通過腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞進(jìn)行的免疫評分可評估腫瘤微環(huán)境的免疫狀態(tài)[25]，但外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平可直接反映機(jī)體細(xì)胞免疫狀況，且循環(huán)淋巴細(xì)胞亞群的表型可以反映腫瘤微環(huán)境中的局部免疫反應(yīng)[26-28]。張帆等[29]認(rèn)為，循環(huán)中CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞水平越高，表示機(jī)體免疫越強(qiáng)，對腫瘤殺傷作用越強(qiáng)，患者預(yù)后越好。

綜上所述，不同微衛(wèi)星狀態(tài)的CRC患者在臨床病理特征、外周血淋巴細(xì)胞亞群水平方面存在一定差異，這些差異可能是MSI-H的CRC患者的良好預(yù)后因素。MSI-H的CRC患者術(shù)前外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平高于MSS/MSI-L患者，外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平可作為MSI-H的CRC患者預(yù)后指標(biāo)。腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞與CRC患者預(yù)后密切相關(guān)，但腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞與外周血T細(xì)胞仍存在一定差異。腫瘤微環(huán)境浸潤淋巴細(xì)胞、外周血T淋巴細(xì)胞亞群與微衛(wèi)星狀態(tài)之間的關(guān)系有待更進(jìn)一步研究。如何應(yīng)用外周血T淋巴細(xì)胞水平反映腫瘤免疫微環(huán)境及指導(dǎo)臨床診治、療效與預(yù)后判斷，有待進(jìn)一步研究。