◎ 梁偉華，張健玲，伍長(zhǎng)春，彭曉俊

（1.新會(huì)海關(guān)綜合技術(shù)服務(wù)中心，廣東 江門 529100；2.江門海關(guān)技術(shù)中心，廣東 江門 529100）

新會(huì)柑，學(xué)名茶枝柑，其最大特色是皮肉兼用，藥食同源，已有700多年的種植歷史，因其果皮有藥用和食療價(jià)值而聞名海內(nèi)外[1]。新會(huì)柑干燥成熟果皮即廣陳皮是我國(guó)著名的中藥材，具有理氣健脾、燥濕化痰、降氣止嘔等功效[2-3]。擬除蟲菊酯農(nóng)藥是一類能防治多種害蟲的廣譜殺蟲劑，具有高效、低毒、低殘留和對(duì)作物安全等特點(diǎn)，在新會(huì)柑的種植過程中被廣泛使用[4]。有文獻(xiàn)指出[5]擬除蟲菊酯類農(nóng)藥據(jù)有蓄積性，長(zhǎng)期接觸會(huì)引起神經(jīng)毒性、生殖毒性和免疫毒性等疾病。隨著新會(huì)柑（陳皮）及其制品行業(yè)發(fā)展，消費(fèi)者食品安全意識(shí)的提高，農(nóng)藥殘留及快速檢測(cè)的問題愈發(fā)受到重視。因此，建立簡(jiǎn)單、快速、高效的分析方法檢測(cè)新會(huì)柑（陳皮）及其制品中擬除蟲菊酯殘留，對(duì)于保障新會(huì)柑（陳皮）其及制品質(zhì)量安全具有重大意義。

目前擬除蟲菊酯殘留檢測(cè)的方法主要有液相色譜法[6]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[7]、氣相色譜法[8]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀[9]以及氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[10]。其中氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀法具有選擇性好、靈敏度高等特點(diǎn)，是擬除蟲菊酯常用的分析方法。本文根據(jù)QuEChERS凈化方法，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀建立新會(huì)柑（陳皮）及其制品中8種擬除蟲菊酯快速、準(zhǔn)確、高效的檢測(cè)方法，為新會(huì)柑（陳皮）及其制品的擬除蟲菊酯農(nóng)殘檢測(cè)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新會(huì)柑、陳皮、陳皮果脯以及陳皮普洱茶等實(shí)驗(yàn)樣品，購(gòu)于江門茶之柑陳皮茶業(yè)有限公司。

聯(lián)苯菊酯（Bifenthrin）、甲氰菊酯（Fenpropathion）、氯氟氰菊酯（Lambda-cyhalothrin）、氯菊（Permethrin）、氯氰菊酯（Cypermethin）、氟氰戊菊酯（Flucythrinate）、氰戊菊酯（Fenvalerate）及溴氰菊酯（Tralomethrin）8種擬除蟲菊酯（1 mL，100 μg·mL-1，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）；正己烷、乙酸、乙酸乙酯及乙腈均為色譜純；實(shí)驗(yàn)室用水均為去離子水。

1.2 儀器與設(shè)備

GCMS-QP2010 Ultra氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；AOC-20si自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)（日本島津）；2-16型通用臺(tái)式高速離心機(jī)（德國(guó)Sigma公司）；LAB DANCER渦旋混合器（德國(guó)IKA公司）；DN-12W氮吹儀（上海比郎公司）；BAS124S電子天平（德國(guó)Sartorius公司）；Milli-Q型超純水系統(tǒng)（德國(guó)默克密理博公司）。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：Shimadzu Rtx-1701（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純氦氣（純度大于99.999%）；進(jìn)樣量：1 μL；流速：1 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：285 ℃；進(jìn)樣方式：不分留進(jìn)樣；升溫程序：初始溫度50 ℃，保持1 min；以15 ℃·min-1升到200 ℃，保持8 min；以 5 ℃·min-1升到 275 ℃，保持 12 min。

1.3.2 質(zhì)譜條件

電離方式：EI；離子源溫度：230 ℃；接口溫度：275 ℃；電離能量：70 eV；測(cè)定方式：選擇離子監(jiān)測(cè)模式（Selected Ion Monitoring，SIM），質(zhì)譜條件參數(shù)見表1。

表1 8種擬除蟲菊酯的CAS號(hào)、保留時(shí)間及質(zhì)譜參數(shù)表

1.4 樣品提取

分別稱取粉碎的新會(huì)柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬試樣各2.000 0 g放置于50 mL具塞塑料離心管中，加入水（陳皮、普洱茶加4 mL，其他加2 mL），用移液槍準(zhǔn)確加入乙腈10 mL，擰好瓶蓋，渦旋振蕩混勻2 min，以9 000 r·min-1離心5 min。

1.5 提取液凈化

用移液槍準(zhǔn)確吸取上述提取液2 mL于QuECh ERS凈化管中，渦旋振蕩2 min，以9 000 r·min-1離心5 min，吸取上清液過0.22 μm有機(jī)濾膜，進(jìn)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）分析。

1.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別取1 mL的8種擬除蟲菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成20 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋成 1 μg·mL-1，然后分 別 吸 取 10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、500 μL 和1 000 μL，正己烷定容到1 mL，配制濃度為0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.50 mg·L-1和1.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

根據(jù)農(nóng)藥的極性，在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，常用的提取溶劑為正己烷、丙酮、乙酸乙酯和乙腈等。本實(shí)驗(yàn)分別考察了上述有機(jī)溶劑作為提取液的提取效率。正己烷易于揮發(fā)；丙酮易于提取樣品中的色素，易溶于水，不利于萃取凈化；乙酸乙酯易于提取蠟質(zhì)，不利于凈化；乙腈作為提取溶劑，不容易受脂溶性雜質(zhì)的影響，提取效率較理想。綜合考慮，本實(shí)驗(yàn)選擇乙腈作為提取溶劑。

2.2 提取方式的選擇

在提取前，加入水有利于增加樣品的浸濕，提高有機(jī)溶劑對(duì)擬除蟲菊酯的提取效率。本實(shí)驗(yàn)分別在空白新會(huì)柑、陳皮樣品的前處理過程中加水和不加水，加入10 mL乙腈，旋渦振蕩提取2 min，以9 000 r·min-1離心5 min，然后吸取2 mL提取液進(jìn)行凈化。在8種擬除蟲菊酯添加水平0.5 mg·kg-1時(shí)，不加水和加水前處理的回收率分別為81.2%～109.6%、89.4%～112.5%，結(jié)果表明加水處理對(duì)提取的效率有一定的提升。綜合考慮，本實(shí)驗(yàn)選擇前處理加水、乙腈提取。

2.3 質(zhì)譜條件的選擇

本實(shí)驗(yàn)考察在標(biāo)準(zhǔn)電壓70 eV EI，離子源溫度分別使用200 ℃、230 ℃。結(jié)果表明離子源230 ℃時(shí)8種擬除蟲菊酯的響應(yīng)更高，因此本實(shí)驗(yàn)選擇離子源溫度230 ℃；配制8擬除蟲菊酯的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以全掃描方式得到總離子流圖見圖1，確認(rèn)保留時(shí)間，根據(jù)譜庫(kù)對(duì)每個(gè)物質(zhì)的碎片離子、豐度比進(jìn)行確認(rèn)，選擇響應(yīng)最高的離子為定量離子，選擇響應(yīng)次高的離子作為定性離子。

圖1 8種擬除蟲菊酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流圖

2.4 基質(zhì)效應(yīng)

由于新會(huì)柑、陳皮等樣品富含有機(jī)酸、色素等物質(zhì)，在提取階段與目標(biāo)物質(zhì)共提取，在進(jìn)入色譜柱后，直接影響目標(biāo)物的電離，從而影響目標(biāo)物的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

本實(shí)驗(yàn)配制濃度分別為 0.02 mg·L-1、0.50 mg·L-1的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和純有機(jī)試劑標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)測(cè)定6次，考察8種擬除蟲菊酯在新會(huì)柑、陳皮、陳皮果脯、陳皮普洱茶中的基質(zhì)效應(yīng)，基質(zhì)效應(yīng)（Matrix Effect，ME）計(jì)算為：

結(jié)果表明，新會(huì)柑、陳皮、陳皮果脯和柑普茶作為基質(zhì)，8種擬除蟲菊酯的基質(zhì)效應(yīng)在92.3%～106.2%，表明基質(zhì)效應(yīng)對(duì)定量結(jié)果影響不明顯，本實(shí)驗(yàn)選擇純有機(jī)溶劑配制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5 線性范圍與檢出限

按1.6中方法繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)面物質(zhì)的定量離子峰面積為縱坐標(biāo)，考察8種擬除蟲菊酯的線性關(guān)系。結(jié)果表明，8種擬除蟲菊酯的線性關(guān)系良好，R2均大于0.998 5，以3倍信噪比（S/N）計(jì)算方法的檢出限，見表2。

表2 8種擬除蟲菊酯的線性參數(shù)和檢出限表

2.6 回收率與精密度

選擇空白新會(huì)柑、陳皮、陳皮普洱茶樣品分別添加濃度水平為 0.010 mg·kg-1、0.050 mg·kg-1、0.100 mg·kg-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，每個(gè)設(shè)置6個(gè)平行樣品。由表3可知，8種擬除蟲菊酯的回標(biāo)回收率為88.4%～110.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.6%～8.9%，表明該方法準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好，能夠滿足檢測(cè)要求。

表3 8種擬除蟲菊酯的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表（n=6）

2.7 樣品分析

按上述實(shí)驗(yàn)方法對(duì)新會(huì)柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬等100批次樣品進(jìn)行檢測(cè)，其中有2份陳皮普洱茶的聯(lián)苯菊酯有檢出，其余樣品均未檢出擬除蟲菊酯，根據(jù)國(guó)家食品中農(nóng)藥最大殘留限量，檢出的聯(lián)苯菊酯未有超過限量值。

3 結(jié)論

本文針對(duì)新會(huì)柑、陳皮、陳皮普洱茶、陳皮果脯和陳皮醬等基質(zhì)特點(diǎn)，以乙腈作為提取溶劑，經(jīng)QuEChERS凈化，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀法建立新會(huì)柑（陳皮）及其制品中8種擬除蟲菊酯的定性定量分析方法，該法操作簡(jiǎn)單、快速高效，能夠?yàn)樾聲?huì)柑（陳皮）及其制品的擬除蟲菊酯農(nóng)殘檢測(cè)提供參考。