劉 英，王慧青，侯 芳，朱壯彥

(1.大同市第一人民醫(yī)院，山西大同 037009；2.山西大同大學(xué)附屬婦女兒童醫(yī)院，山西大同 037009；3.山西大同大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山西大同 037009)

長(zhǎng)期以來(lái)抗生素就被作為抗菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑在養(yǎng)殖業(yè)中推廣應(yīng)用，然而抗生素被動(dòng)物吸收后，動(dòng)物產(chǎn)品中殘留的抗生素通過(guò)一般的食品烹飪方法不能完全使其分解，從而對(duì)人產(chǎn)生毒副作用。妊娠婦女和新生兒作為特殊人群對(duì)于持續(xù)性低劑量抗生素暴露的機(jī)會(huì)更多?？茖W(xué)界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)生命體早期抗生素的暴露對(duì)于后續(xù)生命過(guò)程中疾病的易患性會(huì)產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響[1-2]。近年來(lái)，我國(guó)抗生素使用過(guò)度和不當(dāng)，食源性抗生素長(zhǎng)期低劑量暴露對(duì)人群健康的影響亟待深入分析和評(píng)估，本研究將測(cè)定孕晚期孕產(chǎn)婦血清、乳汁、臍血血清、胎便樣本中食源性抗生素水平，了解孕產(chǎn)婦圍產(chǎn)期及圍新生兒期食源性抗生素的暴露情況，探討食源性抗生素暴露對(duì)新生兒生長(zhǎng)發(fā)育的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年7 月-2019 年3 月在大同市第一人民醫(yī)院未使用抗生素的分娩孕產(chǎn)婦46例作為研究對(duì)象，年齡23～36 歲，平均28.0±4.3 歲。本研究定義新生兒為出生至6周的新生兒。孕產(chǎn)婦入組標(biāo)準(zhǔn)：正常陰道分娩；無(wú)重大內(nèi)科疾?。蝗虢M前2 月內(nèi)沒(méi)有進(jìn)行抗生素治療。新生兒期入組標(biāo)準(zhǔn)：出生2、4、6周有完整隨訪資料的新生兒；純母乳喂養(yǎng)；未服用抗生素及調(diào)節(jié)腸道菌群藥物，監(jiān)護(hù)人知情同意。陽(yáng)性組與陰性組分組情況：陽(yáng)性組為胎便檢測(cè)出任一抗生素陽(yáng)性病例，陰性組為胎便未檢出抗生素病例。本研究經(jīng)大同市第一人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有標(biāo)本采集均與孕產(chǎn)婦本人及其家屬簽署知情同意書(shū)。

1.2 樣本收集

收集孕婦血液樣本5 mL，臍帶血5 mL，產(chǎn)婦分娩后3 d 內(nèi)母乳5～10 mL，2～3 d齡的新生兒胎便約5 g。所有標(biāo)本處理后-20 ℃保存，于1周內(nèi)檢測(cè)。

2 樣本檢測(cè)及新生兒調(diào)查

2.1 樣本檢測(cè)及陽(yáng)性判斷方法

采用用時(shí)間分辨熒光免疫層析法分別檢測(cè)足月孕婦血清、母乳、臍血、胎便中磺胺類、氟喹諾酮類、β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、酰胺醇類和林可酰胺類6 大類抗生素的濃度。抗生素首次檢測(cè)在大同市第一人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室完成。

采用上海溯源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的磺胺類藥物檢測(cè)試劑盒、氟喹諾酮類藥物檢測(cè)試劑盒、β-內(nèi)酰胺類藥物檢測(cè)試劑盒、四環(huán)素類藥物檢測(cè)試劑盒、酰胺醇類藥物檢測(cè)試劑盒、林可酰胺類藥物檢測(cè)試劑盒。

抗生素藥物進(jìn)入人體血清的主要途徑中食源性暴露下濃度較低。綜合參考食源性暴露的每日允許攝入量[3]，并結(jié)合試劑產(chǎn)品本身最低檢出限設(shè)定陽(yáng)性判斷值。

2.2 孕期膳食及新生兒身體健康情況問(wèn)卷調(diào)查

產(chǎn)婦出院后分別于新生兒2 周、4 周、6 周電話回訪調(diào)查，以收集孕婦孕產(chǎn)期膳食情況以及新生兒身體健康情況。

3 結(jié)果

3.1 孕產(chǎn)婦血清、母乳、臍血血清及胎便食源性抗生素檢測(cè)結(jié)果

樣本檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。46例研究對(duì)象中，各指標(biāo)全陰性者30例，最少一個(gè)指標(biāo)陽(yáng)性者16例。

表1 孕產(chǎn)婦血清、母乳及新生兒臍血、胎便中抗生素檢測(cè)結(jié)果

3.2 陽(yáng)性組與陰性組新生兒體質(zhì)量比較

陽(yáng)性組與陰性組的新生兒體質(zhì)量分別是3338±561 g 和3394±522 g，兩組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示食源性抗生素對(duì)新生兒體質(zhì)量無(wú)影響。

3.3 新生兒身體健康情況回訪結(jié)果

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室每次接收標(biāo)本后1周內(nèi)進(jìn)行回訪，分別收集出生后新生兒2 周、4 周、6 周的健康情況。對(duì)有效隨訪46例新生兒調(diào)查情況整理，結(jié)果顯示：新生兒出現(xiàn)臨床異常情況集中于黃疸、濕疹、腹瀉，并且有一例新生兒在6 周內(nèi)持續(xù)存在腹瀉。對(duì)抗生素陽(yáng)性組與陰性組進(jìn)行比較，2、4、6 周新生兒均有顯著性差異，且異常率大于非暴露組(P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 新生兒健康影響情況比較

4 討論

抗生素自20 世紀(jì)40 年代問(wèn)世以來(lái)，在人類和動(dòng)物疾病的治療方面發(fā)揮了極其重要的作用，也被作為動(dòng)物的生長(zhǎng)促進(jìn)劑在畜牧業(yè)得到了廣泛的應(yīng)用。中國(guó)是世界上最大的抗生素生產(chǎn)國(guó)和使用國(guó)，占全世界抗生素總用量的1/2，全國(guó)近一半抗生素使用在畜牧業(yè)中?？股剡M(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)，75%不能分解而被排泄到環(huán)境中，不僅對(duì)環(huán)境造成污染，而且對(duì)人體健康產(chǎn)生一定的危害，引起各國(guó)學(xué)者的關(guān)注[4-7]。

作為動(dòng)物生長(zhǎng)促進(jìn)劑給動(dòng)物持續(xù)性低劑量飼喂抗生素，導(dǎo)致畜產(chǎn)品藥物殘留，成為人類攝入食源性抗生素的主要來(lái)源?？股仉S食品進(jìn)入人體，并且不斷累積，影響人體腸道菌群結(jié)構(gòu)。在生命的第一年，腸道微生物群通過(guò)與腸道發(fā)育中的免疫系統(tǒng)的相互作用發(fā)生巨大變化。腸道微生物群的建立過(guò)程受到各種環(huán)境因素的影響，有可能成為終身健康的主要決定因素。抗生素影響腸道菌群平衡已得到科學(xué)界的證實(shí)[8-9]。腸道菌群微生態(tài)紊亂改變與碳水化合物和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)相關(guān)的基因，使葡萄糖代謝相關(guān)基因表達(dá)減少，脂肪酸代謝和脂質(zhì)合成基因表達(dá)增加，從而引起個(gè)體的新陳代謝改變，引起肥胖；腸道菌群微生態(tài)紊亂對(duì)腸道免疫系統(tǒng)的破壞，導(dǎo)致IgE 產(chǎn)生增多，增加了臨床過(guò)敏性疾病的發(fā)生，如食物過(guò)敏、哮喘等。Hirsch 等[10]研究7 歲以下兒童抗生素與過(guò)敏性疾病之間的關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)早期抗生素的使用與微生物群的破壞有關(guān)，這種變化會(huì)干擾免疫系統(tǒng)的發(fā)展。目前在有過(guò)敏和沒(méi)有過(guò)敏兒童的腸道微生物群中觀察到差異，但對(duì)抗生素使用和過(guò)敏性疾病的研究很少。對(duì)食源性抗生素陽(yáng)性表達(dá)對(duì)生命早期的影響研究目前大多處在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段。

國(guó)內(nèi)學(xué)者也在近年關(guān)注食源性抗生素對(duì)生命早期的影響，陸續(xù)報(bào)道了孕產(chǎn)婦及新生兒抗生素陽(yáng)性表達(dá)情況，且均顯示有不同程度的高水平陽(yáng)性表達(dá)[11-13]。本研究在同行研究采用孕婦血、臍血、胎便標(biāo)本的基礎(chǔ)上又增加了乳汁。結(jié)果顯示孕婦母血、臍血、胎便、乳汁標(biāo)本中磺胺類、氟喹諾酮類、β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類、酰胺醇類和林可酰胺類6 大類食源性抗生素均有不同水平的陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性表達(dá)較高的抗生素為磺胺類、β-內(nèi)酰胺類藥物和氟喹諾酮類藥物。其陽(yáng)性表達(dá)較高一方面可能與殘留較多有關(guān)，另一方面可能與此類藥物在動(dòng)物體內(nèi)蓄積累加有關(guān)，需進(jìn)一步觀察研究。

在抗生素陽(yáng)性表達(dá)分組方面，各學(xué)者觀點(diǎn)不一，李曼玉研究認(rèn)為，胎便更能反映宮內(nèi)胎兒情況，根據(jù)胎便中抗生素檢測(cè)結(jié)果分為抗生素陽(yáng)性組和陰性組，而張亞偉則認(rèn)為新生兒臍帶血是研究環(huán)境相關(guān)新生兒疾病較好的生物材料，可準(zhǔn)確反映胎兒在宮內(nèi)的化學(xué)物積累接觸情況。本研究認(rèn)為持續(xù)性低劑量抗生素可能在不同部位不同時(shí)間代謝情況不同，胎便更直接反映新生兒抗生素陽(yáng)性表達(dá)情況，與李曼玉的研究觀點(diǎn)基本一致[11，13]。

李曼玉[14]研究發(fā)現(xiàn)抗生素陽(yáng)性組與陰性組在新生兒身長(zhǎng)、胎盤(pán)體積、胎盤(pán)質(zhì)量方面有差異，抗生素暴露可能對(duì)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育存在影響。張亞偉采用16S rRNA 二代測(cè)序平臺(tái)對(duì)新生兒腸道菌群監(jiān)測(cè)分析，證實(shí)低劑量持續(xù)性抗生素通過(guò)母體影響新生兒腸道菌群。本研究首次對(duì)出生后新生兒健康情況進(jìn)行評(píng)估，持續(xù)觀察到6 周，發(fā)現(xiàn)食源性抗生素陽(yáng)性組的新生兒在6 周內(nèi)發(fā)生的黃疸、過(guò)敏、腹瀉發(fā)生率高于抗生素陰性組，且有一例新生兒在2、4、6周持續(xù)存在腹瀉。這進(jìn)一步說(shuō)明，持續(xù)性低劑量抗生素通過(guò)母體進(jìn)入新生兒體內(nèi)，對(duì)新生兒期腸道菌群建立產(chǎn)生影響，從而使非健康狀態(tài)在出生早期就可能表現(xiàn)出來(lái)，當(dāng)然也不排除非抗生素殘留的因素。

不同地區(qū)抗生素陽(yáng)性表達(dá)水平不同，陽(yáng)性表達(dá)的抗生素種類排序也不同，可以進(jìn)行大樣本的多中心研究，了解我國(guó)食源性抗生素在孕產(chǎn)婦與圍新生兒期的抗生素陽(yáng)性表達(dá)情況。新生兒期的黃疸、濕疹、腹瀉可能與食源性抗生素陽(yáng)性表達(dá)母體有關(guān)。本研究為對(duì)孕產(chǎn)婦抗生素陽(yáng)性表達(dá)及早干預(yù)措施提供依據(jù)。由此，可以進(jìn)一步對(duì)孕產(chǎn)婦在孕期的飲食結(jié)構(gòu)和食品安全與抗生素陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性進(jìn)行研究，以便尋求更早的干預(yù)措施，減少食源性抗生素陽(yáng)性表達(dá)對(duì)新生兒健康產(chǎn)生的不良影響。