張靜博，程 鵬，趙龍妹，曹平華，馬彥博，范收武，李 旺*

（1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南洛陽(yáng) 471023；2.洛陽(yáng)歐科拜克生物技術(shù)股份有限公司，河南洛陽(yáng) 471611）

抗生素自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，因其有抑制有害菌生長(zhǎng)繁殖，提高飼料利用率和畜禽生長(zhǎng)性能的作用，在畜禽、水產(chǎn)動(dòng)物等飼料中被廣泛使用。抗生素的大量使用給畜牧行業(yè)帶來(lái)了良好的經(jīng)濟(jì)效益，但抗生素過(guò)量使用會(huì)導(dǎo)致畜禽體內(nèi)的殘留，病原體耐藥性增加以及對(duì)環(huán)境造成污染等問(wèn)題，對(duì)食品安全和畜牧業(yè)的健康發(fā)展產(chǎn)生嚴(yán)重威脅。

在全球禁止使用促生長(zhǎng)型抗生素以來(lái)，安全高效的抗生素替代品成為研究熱點(diǎn)。益生菌作為一種綠色飼料添加劑，在畜禽的生產(chǎn)性能和免疫功能等方面表現(xiàn)出良好的積極作用?？莶菅挎邨U菌是益生菌中應(yīng)用最廣泛的菌種之一。飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠促使畜禽生長(zhǎng)性能和免疫功能提高，其原因是枯草芽孢桿菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生多種能夠分解動(dòng)物本身不能消化吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的酶，幫助動(dòng)物腸道消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，保護(hù)動(dòng)物的機(jī)體健康。同時(shí)枯草芽孢桿菌能夠通過(guò)抑制有害菌的生長(zhǎng)繁殖，對(duì)畜禽的腸道微生物菌群的平衡進(jìn)行調(diào)整。也有研究認(rèn)為，可能是由于枯草芽孢桿菌對(duì)特定腸道微生物的影響，其中包括增加有益菌數(shù)量、減少某些致病菌數(shù)量，而表現(xiàn)出促生長(zhǎng)作用?？股刂薪鹈顾赜幸欢ǖ拇偕L(zhǎng)作用，同時(shí)能夠治療傷寒和白痢等疾??；鹽霉素是一種新型雞用防球蟲(chóng)劑。本試驗(yàn)旨在研究枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能和免疫功能的影響，為抗生素替代品枯草芽孢桿菌在家禽產(chǎn)業(yè)中的效益評(píng)價(jià)提供了更全面的視角以及枯草芽孢桿菌在生產(chǎn)中的施用提供一定的指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 枯草芽孢桿菌由洛陽(yáng)歐科拜克生物技術(shù)股份有限公司提供，為粉狀制劑，活菌數(shù)為1×10CFU/g。抗生素為市場(chǎng)購(gòu)買，金霉素和鹽霉素純度均為20%，質(zhì)量比1:1 混合。飼料購(gòu)自洛陽(yáng)某飼料廠（顆粒料）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)飼糧 選用1 日齡身體狀況相近、健康的愛(ài)拔益加（AA）肉仔雞144 只（公母混雛），隨機(jī)分為3 個(gè)處理組，每個(gè)處理6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8 只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧（無(wú)任何添加物），枯草芽孢桿菌組在基礎(chǔ)飼糧中添加150 mg/kg 枯草芽孢桿菌，抗生素組在基礎(chǔ)飼糧添加300 mg/kg 20%金霉素和300 mg/kg 20%鹽霉素。按照肉雞標(biāo)準(zhǔn)化管理流程，采用3 層籠養(yǎng)。試驗(yàn)期間肉雞自由采食和飲水，全程無(wú)免疫。試驗(yàn)分為2 個(gè)階段，第1 階段為1～21 日齡，第2 階段為22～42 日齡，試驗(yàn)期42 d。飼養(yǎng)階段光照時(shí)間控制為14L:8D。飼糧配方及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 樣品采集和指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生產(chǎn)性能 在21 日齡和42 日齡時(shí)提前禁食8 h，以每個(gè)重復(fù)為單位分別稱重，統(tǒng)計(jì)采食量和剩料量，計(jì)算2 個(gè)飼養(yǎng)階段每個(gè)處理組的平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2 屠宰性能 42 日齡試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3 只肉雞，空腹稱取重量，然后參考《家禽生產(chǎn)學(xué)》進(jìn)行常規(guī)屠宰，測(cè)定屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重，并根據(jù)相關(guān)計(jì)算公式計(jì)算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.3.3 免疫功能 在21 日齡和42 日齡，每個(gè)重復(fù)取3只肉雞翅下靜脈采血測(cè)定血漿免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）；然后剖解，稱重胸腺、脾臟和法氏囊重量。免疫球蛋白采用上海鈺博生物科技有限公司試劑盒用酶標(biāo)儀（Spectra Max M-5）測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），并進(jìn)行Duncan's 多重比較檢驗(yàn)，＜0.05 表示顯著差異，＜0.01 表示差異極顯著，試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2 知，在1～21 日齡，與對(duì)照組相比，飼糧中添加枯草芽孢桿菌降低了肉雞21 日齡體重、平均日增重（＜0.01）及平均日采食量（＜0.05），提高耗料增重比（＜0.05）。與對(duì)照組相比，抗生素組肉雞21 日齡體重和平均日增重降低（＜0.01），耗料增重比提高（＜0.05），對(duì)1～21 日齡肉雞平均日采食量沒(méi)有顯著影響。與抗生素組相比，枯草芽孢桿菌組肉雞平均日采食量下降（＜0.05），其他指標(biāo)無(wú)顯著差異。在22～42 及1～42日齡，3 個(gè)處理組間的生長(zhǎng)性能均無(wú)顯著差異。

表2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞屠宰性能的影響 由表3 可知，枯草芽孢桿菌組的腿肌率較對(duì)照組提高5.04%（＜0.05），抗生素組與對(duì)照組相比腿肌率差異不顯著。3 個(gè)處理組的其他屠宰性能指標(biāo)均差異不顯著。

表3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞屠宰性能的影響 %

2.3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫功能的影響

2.3.1 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響 由表4 可知，在1～21 日齡，3 個(gè)處理組的脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)及胸腺指數(shù)差異均不顯著。在22～42 日齡，枯草芽孢桿菌組肉雞的胸腺指數(shù)高于對(duì)照組（＜0.05），其他指標(biāo)差異均不顯著。

表4 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3.2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫因子的影響 由表5 可知，在21 日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，抗生素組和枯草芽孢桿菌組的IgA 含量提高（＜0.01），3 組的IgG、IgM 無(wú)顯著差異。在42 d 時(shí)，抗生素組和枯草芽孢桿菌組的IgA 含量較對(duì)照組提高（＜0.01），IgG 含量為抗生素組＞枯草芽孢桿菌組＞對(duì)照組（＜0.01），但I(xiàn)gM 含量在3 組間無(wú)顯著差異。

表5 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫因子的影響

3 討 論

3.1 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 枯草芽孢桿菌作為一種益生菌，廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖?？莶菅挎邨U菌在進(jìn)入腸道后在迅速繁殖時(shí)會(huì)消耗大量的氧，降低腸道內(nèi)的氧含量，抑制有害菌生長(zhǎng)，促進(jìn)有益菌增殖；另一方面，枯草芽孢桿菌通過(guò)改善腸道菌群結(jié)構(gòu)和腸道形態(tài)，改善肉雞對(duì)飼料的利用效率，促進(jìn)動(dòng)物健康生長(zhǎng)。趙強(qiáng)等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加100 g/t 芽孢桿菌科丁酸梭菌能夠促進(jìn)肉雞平均日采食量和平均日增重的提高，并且在添加100、200、400、600 g/t 芽孢桿菌科丁酸梭菌的4 個(gè)處理組中表現(xiàn)出的效果最佳，這與劉曉東等的研究結(jié)果相似。鐘光等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低了肉雞21 日齡體重、1～21 日齡的平均日增重和平均日采食量，顯著提高22～42 日齡的平均日增重。張安榮等研究表明，在肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低1～21 日齡的平均日采食量，顯著提高22～42 日齡的耗料增重比。

本試驗(yàn)中，飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著降低了肉雞生長(zhǎng)前期的平均日采食量，極顯著降低了21 日齡體重和平均日增重，耗料增重比顯著提高，而在生長(zhǎng)后期提高了平均日采食和平均日增重、降低了耗料增重比，但差異不顯著。這與上述報(bào)道研究結(jié)果不完全相同，原因可能與枯草芽孢桿菌的提取工藝和有效活菌數(shù)不同以及產(chǎn)品本身有關(guān)，也可能是本試驗(yàn)枯草芽孢桿菌添加量過(guò)大，從而對(duì)肉雞腸道內(nèi)菌群的穩(wěn)態(tài)造成不良影響，從而沒(méi)有表現(xiàn)出積極的作用；而生長(zhǎng)后期隨著腸道微生物區(qū)系平衡的建立，使得肉雞的平均日采食量和平均日增重提高?？股乜梢种朴泻L(zhǎng)繁殖，會(huì)影響肉雞的腸道微生態(tài)平衡，從而影響肉雞生長(zhǎng)前期的生長(zhǎng)性能。

3.2 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞屠宰性能的影響 屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、胸肉率和腿肉率是衡量肉雞肉用性能的重要指標(biāo)。崔宇等研究發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠顯著提高AA+肉雞的全凈膛率和半凈膛率。廖玉英等研究表明，在飼糧中添加益生菌（由乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢桿菌組成）制劑可以使黃羽肉雞的屠宰率、全凈膛率和胸肌率顯著提高，顯著降低腹脂率。本試驗(yàn)中，除腿肌率之外，其他屠宰指標(biāo)在各組間差異均不顯著，但抗生素組和枯草芽孢桿菌組與對(duì)照組相比在全凈膛率和半凈膛率有一定的提高?？莶菅挎邨U菌的腿肌率與對(duì)照組相比有顯著提高，但與抗生素組相比屠宰性能中各項(xiàng)指標(biāo)沒(méi)有顯著差異。

3.3 枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞免疫功能的影響 禽類免疫功能的強(qiáng)弱在一定程度上可以用免疫器官指數(shù)來(lái)表示，即免疫器官與禽類機(jī)體的相對(duì)重量。郭瑞萍等研究表明，AA 肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠在一定程度上提高其免疫性能。林顯華等研究也表明，肉雞飼糧中添加5×10CFU/g 枯草芽孢桿菌 B7，在21 日齡時(shí)脾臟和法氏囊指數(shù)顯著提高，機(jī)體免疫能力增強(qiáng)；劉美鳳等研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌后肉雞的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)顯著提高。家禽血液中參與體液免疫的IgA、IgG、IgM 含量在一定程度上反映了動(dòng)物機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱。研究表明，在飼糧中添加微生態(tài)制劑可以提高IgA、IgG、IgM 含量，使動(dòng)物機(jī)體的免疫能力增強(qiáng)。范秋麗等研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌提高了22～42 日齡IgA、IgG、IgM 含量，其中IgM 含量顯著提高。

本試驗(yàn)也表明，在肉雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以在生長(zhǎng)前期提高免疫器官指數(shù)，但不顯著，與添加抗生素的免疫器官指數(shù)沒(méi)有顯著差異，在生長(zhǎng)后期胸腺指數(shù)有顯著提高，這與上述報(bào)道結(jié)果類似。同時(shí)，添加枯草芽孢桿菌可以于生長(zhǎng)前期極顯著提高IgA 含量，于生長(zhǎng)后期極顯著提高IgA、IgG 含量。這與范秋麗等的研究結(jié)果不完全相同，可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)枯草芽孢桿菌添加量過(guò)大。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌能降低肉雞的21 日齡平均日采食量和平均日增重，提高耗料增重比、腿肌率，21 日齡IgA 含量，42 日齡IgA、IgG含量、胸腺指數(shù)，顯著改善生產(chǎn)性能，免疫功能等，能夠替代抗生素應(yīng)用于肉雞飼糧中。

致謝：感謝程鵬、任強(qiáng)、張俊偉、李文希、劉雪純?cè)谠囼?yàn)過(guò)程中給予的幫助。