左立輝，李四強(qiáng)，秦 偉，韓紅滿

中國人民解放軍陸軍第八十二集團(tuán)軍醫(yī)院血液內(nèi)分泌科，河北保定 071000

多發(fā)性骨髓瘤是一種漿細(xì)胞惡性腫瘤，其特征表現(xiàn)為骨髓中克隆性漿細(xì)胞的惡性增殖[1]。據(jù)報(bào)道，多發(fā)性骨髓瘤約占血液系統(tǒng)惡性腫瘤的10%，男性發(fā)病率高于女性[2]。多發(fā)性骨髓瘤患者的中位發(fā)病年齡為65歲，<40歲患者占比不足3%[3]。多發(fā)性骨髓瘤的主要臨床表現(xiàn)是貧血、骨痛、病理性骨折、反復(fù)感染、高鈣血癥和腎衰竭。雖然蛋白酶體抑制劑、免疫調(diào)節(jié)藥物、自體干細(xì)胞移植和細(xì)胞免疫療法等針對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的治療策略不斷改進(jìn)，但由于多發(fā)性骨髓瘤的耐藥性和經(jīng)常復(fù)發(fā)等特點(diǎn)，患者5年生存率仍然較低[4]。且多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病隱匿，大多數(shù)患者出現(xiàn)感染、腎功能不全或骨痛等癥狀后才到醫(yī)院就診，容易誤診，錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)。因此，篩選靈敏度、特異度高的生物標(biāo)志物對(duì)早期發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤、提高診斷和治療多發(fā)性骨髓瘤的水平及改善患者預(yù)后十分重要。CD54是介導(dǎo)黏附反應(yīng)的重要黏附分子，有研究表明，可溶性CD54(sCD54)是一種重要的代表免疫激活和免疫反應(yīng)的早期重要指標(biāo)，同時(shí)對(duì)人內(nèi)皮細(xì)胞的增殖具有重要作用[5]。可溶性CD14亞型(presepsin)是CD14的一種存在形式，既往研究發(fā)現(xiàn)，其對(duì)膿毒癥的診斷、評(píng)估及預(yù)后評(píng)價(jià)具有重要的臨床意義[6]。本研究通過檢測多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平，探討二者對(duì)多發(fā)性骨髓瘤診斷價(jià)值及與患者預(yù)后的關(guān)系，以期為多發(fā)性骨髓瘤的診治提供參考依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年3月至2019年2月在本院就診住院的多發(fā)性骨髓瘤患者118例作為病例組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)診斷符合《中國多發(fā)性骨髓瘤診治指南(2017年修訂)》[7]中多發(fā)性骨髓瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)臨床資料完整；(3)年齡18～80歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)入院前已經(jīng)接受相關(guān)治療；(2)免疫性疾病及合并其他腫瘤；(3)病歷資料不全；(4)精神疾病；(5)嚴(yán)重肝、腎、心臟功能不全。另選取同期本院體檢健康者80例作為對(duì)照組。病例組中男68例，女50例；平均年齡(63.21±11.54)歲。對(duì)照組中，男45例，女35例；平均年齡(61.26±10.41)歲。兩組年齡與性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理批號(hào)：倫審2017025)，所有研究對(duì)象知情同意并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 病例組在入院后第2天，對(duì)照組在體檢日早晨空腹采集外周靜脈血5 mL，室溫靜置30 min后，以3 000 r/min離心15 min，分離血清，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2檢測方法 美國Bio-Tek ELX800多功能酶標(biāo)儀檢測血清中sCD54、presepsin水平(試劑購自上海優(yōu)寧維生物有限公司)：將sCD54、presepsin抗體稀釋至10 μg/mL，加入到酶標(biāo)板中0.1毫升/孔，4 ℃過夜，洗滌3次，加入血漿標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品0.1 mL，孵育1 h(37 ℃)，然后加入0.1 mL二抗，孵育1 h(37 ℃)，進(jìn)行顯色，加入0.05 mL濃度為2 mol/L的硫酸終止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀在450 nm處測各孔吸光度(A)值，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算血清中sCD54、presepsin水平。

1.2.3隨訪 治療康復(fù)出院后定期采用電話隨訪或者上門隨訪，隨訪頻率為每6個(gè)月隨訪1次，隨訪時(shí)間為2年終止，隨訪截止日期為2021年6月30日，記錄患者的存活情況。存活為預(yù)后良好，死亡為預(yù)后不良。

1.2.4國際分期體系(ISS分期) ISS分期是以血清β2-微球蛋白和清蛋白為基礎(chǔ)的分類。Ⅰ期：血清β2-微球蛋白<3.5 mg/L；清蛋白≥35 g/L。Ⅱ期：不符合Ⅰ期而又未達(dá)到Ⅲ期。Ⅲ期：血清β2-微球蛋白≥5.5 mg/L。

2 結(jié) 果

2.1兩組Ca2+、C反應(yīng)蛋白、β2-微球蛋白水平比較 病例組Ca2+、β2-微球蛋白水平高于對(duì)照組，C反應(yīng)蛋白水平低于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組Ca2+、C反應(yīng)蛋白、β2-微球蛋白水平比較

2.2兩組血清sCD54、presepsin水平比較 病例組血清sCD54、presepsin水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清sCD54、presepsin水平比較

2.3不同預(yù)后多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平比較 多發(fā)性骨髓瘤患者中，預(yù)后良好98例，預(yù)后不良20例，預(yù)后良好患者血清sCD54、presepsin水平低于預(yù)后不良患者(P<0.05)，見表3。

表3 不同預(yù)后情況多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平比較

2.4多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平與臨床病理特征指標(biāo)的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清sCD54、presepsin水平與年齡、ISS分期嚴(yán)重程度、Ca2+、β2-微球蛋白均呈正相關(guān)(r=0.426～0.723，P<0.05)，與C反應(yīng)蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.572、-0.683，P<0.05)，見表4。

表4 多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin水平與臨床特征指標(biāo)的相關(guān)性分析

2.5血清sCD54、presepsin水平對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的診斷價(jià)值 血清sCD54、presepsin單項(xiàng)及聯(lián)合檢測診斷多發(fā)性骨髓瘤的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.784(95%CI：0.713～0.857)、0.674(95%CI：0.568～0.763)、0.832(95%CI：0.783～0.881)。當(dāng)sCD54為310 ng/mL時(shí)，診斷多發(fā)性骨髓瘤的靈敏度為75.5%，特異度為81.3%；當(dāng)presepsin為280 pg/mL時(shí)，診斷多發(fā)性骨髓瘤的靈敏度為67.2%，特異度為68.4%；二者聯(lián)合檢測診斷多發(fā)性骨髓瘤的靈敏度為80.5%，特異度為91.2%。見表5。

表5 血清sCD54、presepsin水平對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的診斷價(jià)值

圖1 血清sCD54、presepsin水平診斷多發(fā)性骨髓瘤的ROC曲線

2.6血清sCD54、presepsin與多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后關(guān)系的多因素Logistic回歸分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，sCD54在模型1(未校正前)、模型2(校正性別、年齡、Ca2+)、模型3(在模型2基礎(chǔ)上再校正C反應(yīng)蛋白、β2-微球蛋白)的OR(95%CI)分別為1.887(1.191～2.991)、2.036(1.104～3.752)、2.087(1.676～2.600)，presepsin在模型1(未校正前)、模型2(校正性別、年齡、Ca2+)、模型3(在模型2基礎(chǔ)上再校正C反應(yīng)蛋白、β2-微球蛋白)的OR(95%CI)分別為1.823(1.399～2.376)、1.747(1.479～2.064)、2.029(1.412～2.917)。sCD54、presepsin水平升高均是多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后不良的獨(dú)立預(yù)測因素(P<0.05)，見表6。

表6 血清sCD54、presepsin與多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后關(guān)系的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

多發(fā)性骨髓瘤是一種常見的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，目前還不能完全治愈，該病具有隱蔽性，不易及時(shí)發(fā)現(xiàn)，進(jìn)而導(dǎo)致患者錯(cuò)過治療的最佳時(shí)機(jī)。此外，多發(fā)性骨髓瘤的異質(zhì)性明顯，疾病進(jìn)展程度不同。部分有高危因素的多發(fā)性骨髓瘤患者生存率較低。因此，疾病的早期及時(shí)發(fā)現(xiàn)對(duì)改善多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后具有重要意義。有研究顯示，sCD54可能是組織損傷、炎癥及蛋白水解的表現(xiàn)形式，通過抑制淋巴細(xì)胞與其他細(xì)胞的結(jié)合，進(jìn)而限制淋巴細(xì)胞的功能，使機(jī)體免疫系統(tǒng)耐受[8]。有研究表明，感染患者中presepsin血漿水平明顯高于健康人群或非感染性全身炎癥反應(yīng)綜合征患者，presepsin水平與降鈣素原(PCT)水平、序貫器官衰竭評(píng)分、急性生理與慢性健康評(píng)分Ⅱ均呈正相關(guān)[9]。本研究結(jié)果顯示，多發(fā)性骨髓瘤組血清sCD54和presepsin水平高于對(duì)照組，提示sCD54和presepsin可能參與了多發(fā)性骨髓瘤的病理生理過程。

sCD54與整合素家族成員LFA-1互為配基，屬于免疫球蛋白超家族成員之一。有研究證實(shí)，sCD54參與T細(xì)胞活化、殺傷腫瘤細(xì)胞等靶抗原及免疫效應(yīng)細(xì)胞識(shí)別等[10]。據(jù)報(bào)道，sCD54是免疫激活和免疫反應(yīng)早期重要指標(biāo)之一[11]。其他研究證實(shí)，sCD54可作為結(jié)直腸癌診斷的分子標(biāo)志物，其與直腸癌的發(fā)生密切相關(guān)，表現(xiàn)為sCD54在直腸癌患者中高表達(dá)，趨勢(shì)表達(dá)與本研究結(jié)果一致[12]。有研究表明，sCD54在機(jī)體內(nèi)呈現(xiàn)低表達(dá)或不表達(dá)現(xiàn)象，而當(dāng)炎性細(xì)胞分子攻擊或其他因素刺激機(jī)體后，sCD54則在多種細(xì)胞表面表達(dá)，從而促進(jìn)炎癥的發(fā)生與發(fā)展[13]。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清sCD54的AUC為0.784，最佳截?cái)嘀禐?10 ng/mL，靈敏度和特異度分別為75.5%和81.3%，表明血清sCD54在診斷多發(fā)性骨髓瘤時(shí)具有較高的價(jià)值，可以用來輔助診斷。有研究顯示，sCD54的作用類似于ICAM-1的單抗功能，可以阻止免疫細(xì)胞間的信號(hào)傳遞，使機(jī)體免疫監(jiān)視功能降低，從而促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展[14]。有研究發(fā)現(xiàn)，sCD54水平隨著患者腫瘤最大徑的增加而升高，但具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究[15]。本研究發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54與患者Ca2+、β2-微球蛋白呈正相關(guān)，提示較高水平血清Ca2+及β2-微球蛋白患者易出現(xiàn)sCD54水平升高。本研究發(fā)現(xiàn)，預(yù)后不良組sCD54水平明顯高于預(yù)后良好組，且多因素Logistic回歸模分析顯示，sCD54水平升高是多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示高水平sCD54患者預(yù)后較差。

有研究表明，presepsin血漿水平在嚴(yán)重膿毒癥到膿毒性休克、普通膿毒癥、全身炎癥反應(yīng)綜合征患者中呈遞減趨勢(shì)[16]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，presepsin產(chǎn)生于細(xì)菌感染的吞噬作用[17]。presepsin水平在內(nèi)毒素休克模型中不見改變，但在盲腸結(jié)扎穿孔模型中顯著增高。有研究顯示，與白細(xì)胞介素-6和PCT相比，presepsin的ROC曲線的AUC在不同時(shí)間點(diǎn)更高，在整個(gè)病程中更具診斷優(yōu)勢(shì)，presepsin與急診膿毒癥病死率評(píng)分相結(jié)合時(shí)診斷膿毒癥的AUC甚至更高[18]。本研究結(jié)果顯示，多發(fā)性骨髓瘤組presepsin水平明顯高于對(duì)照組，提示presepsin可能也是多發(fā)性骨髓瘤診斷的一種重要生物標(biāo)志物。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清presepsin的AUC為0.674，最佳截?cái)嘀迪蚂`敏度和特異度分別為67.2%和68.4%，說明血清presepsin對(duì)輔助診斷多發(fā)性骨髓瘤具有一定的價(jià)值。本研究還發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性骨髓瘤患者血清presepsin水平與患者的Ca2+、β2-微球蛋白水平呈正相關(guān)，提示較高水平血清Ca2+及β2-微球蛋白的患者易出現(xiàn)presepsin水平升高。同時(shí)發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良組血清presepsin水平高于預(yù)后良好組，并且多因素Logistic回歸模分析顯示，presepsin水平升高是多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示高水平presepsin的多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后較差。

綜上所述，多發(fā)性骨髓瘤患者血清sCD54、presepsin明顯升高，二者對(duì)多發(fā)性骨髓瘤具有一定的診斷價(jià)值，聯(lián)合應(yīng)用診斷價(jià)值更高，血清sCD54、presepsin水平升高均是多發(fā)性骨髓瘤患者預(yù)后不良的獨(dú)立預(yù)測因子，有助于早期識(shí)別評(píng)估疾病嚴(yán)重程度，有望作為早期的分子生物標(biāo)志物。