張倩倩 耿愛蓮 常 棖 趙亞芳 趙向紅 張 玉 王海宏 初 芹 劉華貴

(1.山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，泰安 271018；2.北京市農(nóng)林科學院畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100097；3.北京中農(nóng)優(yōu)嘉生物科技有限公司，北京 100094)

飼糧中蛋氨酸是一種重要的限制性氨基酸[1]，也是家禽生長發(fā)育的必需氨基酸之一。機體內(nèi)攝入的蛋氨酸可通過促進肝細胞膜磷脂甲基化，從而減少肝臟內(nèi)膽汁酸聚積，緩解肝損傷，提高動物吸收代謝率[2-3]。張健[4]提出以玉米-豆粕為基礎飼糧的蛋氨酸水平相對不足，蛋氨酸缺乏會引起肝細胞的炎癥和凋亡反應，這會導致脂肪肝、肝癌等疾病。段曉翔[5]在研究低蛋白質(zhì)飼糧中蛋氨酸水平對初生肉雛雞氮代謝影響時表明，肉雞低蛋白質(zhì)飼糧中蛋氨酸、總含硫氨基酸及賴氨酸水平與正常蛋白質(zhì)飼糧保持一致時，可獲得相同體重，但蛋氨酸缺乏或過量均影響生長。

北京油雞(簡稱油雞)作為北京地區(qū)的一種優(yōu)良地方雞種，于2005年被北京市政府認定為首批9個“北京市優(yōu)質(zhì)特色農(nóng)產(chǎn)品”之一，并大力開發(fā)[6]。2020年7月底“北京油雞”品種正式獲得國家農(nóng)產(chǎn)品地理標志登記證書[7]，充分表明了國家和北京市對油雞的認可和重視。本課題組制定的《北京油雞飼養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》中提出產(chǎn)蛋期油雞蛋氨酸需要量為0.34%[8]，本研究目的是在此基礎上，探討不同蛋氨酸水平對油雞產(chǎn)蛋高峰期生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血清生化指標的影響，以期為油雞產(chǎn)蛋高峰期飼糧蛋氨酸的添加水平提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與動物

試驗在北京順義區(qū)張鎮(zhèn)的北京油雞飼養(yǎng)基地的籠養(yǎng)舍內(nèi)進行。采用單因子設計，選擇體重無顯著差異(P>0.05)的26周齡油雞母雞324只，隨機分為3組，每組6個重復，每個重復6籠，每籠3只雞。各組隨機飼喂3種粉狀試驗飼糧，飼糧代謝能(11.31 MJ/kg)和粗蛋白質(zhì)水平(15%)相同，蛋氨酸水平分別為0.34%、0.42%、0.48%。最低蛋氨酸水平的設置根據(jù)《北京油雞飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程》(DB11/T 1378—2016)[8]推薦值；另外，郭丹等[9]研究表明，產(chǎn)蛋雞對蛋氨酸水平反應極為強烈，蛋氨酸的添加水平在0.094%的較小空間變動時，其產(chǎn)蛋性能即可發(fā)生較大的變化。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗雞采用3層全階梯式籠養(yǎng)，各組均勻分布在各層。試驗雞自由采食、充足飲水，按正常免疫程序進行免疫接種。飼養(yǎng)管理按照《北京油雞飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程》(DB11/T 1378—2016)[8]中有關產(chǎn)蛋雞飼養(yǎng)管理規(guī)定進行。預試期1周，正試期為27～34周齡。

1.3 測定指標與方法

試驗期間以籠為單位，每天記錄雞數(shù)、產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重，每周記錄采食量，計算27～30周齡、31～34周齡和27～34周齡的周平均采食量(WFI)、周平均蛋重(WEM)、產(chǎn)蛋率、料蛋比(FER)和死淘率。

周平均蛋重=某階段內(nèi)所產(chǎn)雞蛋總重/

某階段內(nèi)包含的周數(shù)。

30、34周齡隨機從各重復中取雞蛋5枚，每組30枚，待分析及測定蛋品質(zhì)。蛋品質(zhì)測定方法見本課題組前期文獻[10]報道。蛋品質(zhì)指標計算公式如下：

蛋黃相對重(%)=(蛋黃重量/蛋重)×100；

蛋殼相對重(%)=(蛋殼重量/蛋重)×100；

蛋白相對重(%)=(蛋白重量/蛋重)×100。

式中：蛋重為30枚雞蛋重量的平均值。

34周末每個重復籠中取2只雞翼靜脈采促凝血3～5 mL，在4 ℃、3 000 r/min離心10 min，取血清-20 ℃保存，待測血清免疫、抗氧化指標等。血清免疫指標包括血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、溶菌酶含量；血清抗氧化指標包括總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)含量。采用分光光度計[Evolution 60，賽默飛世爾(上海)儀器有限公司]和酶標儀[Multiskan FC，賽默飛世爾(上海)儀器有限公司]進行測定。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0軟件中的one-way ANOVA程序進行單因素方差分析，以Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05為差異顯著性標準，0.05

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧蛋氨酸水平對27～30周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，27～30周齡油雞周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、產(chǎn)蛋率、死淘率均不受飼糧蛋氨酸水平的顯著影響(P>0.05)。不過蛋氨酸水平為0.34%組的周平均蛋重最高,為(762.44±128.05)g，料蛋比最低，為3.94±0.57。

表2 飼糧蛋氨酸水平對27～30周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 飼糧蛋氨酸水平對31～34周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，31～34周齡油雞產(chǎn)蛋雞的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受飼糧蛋氨酸水平的顯著影響(P>0.05)。不過蛋氨酸水平為0.48%組的周平均蛋重最高，料蛋比最低，死淘率最低。產(chǎn)蛋率受飼糧蛋氨酸水平影響顯著(P<0.05)，其中0.48%組顯著高于0.42%組(P<0.05)，與0.34%組差異不顯著(P>0.05)。

表3 飼糧蛋氨酸水平對31～34周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

2.3 飼糧蛋氨酸水平對27～34周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

由表4可知，27～34周齡油雞產(chǎn)蛋雞的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受飼糧蛋氨酸水平的顯著影響(P>0.05)。0.34%組的周平均蛋重最高，產(chǎn)蛋率較高，料蛋比較低。飼糧蛋氨酸水平有影響27～34周齡產(chǎn)蛋率的趨勢(P=0.056)，其中0.34%組和0.48%組高于0.42%組。

表4 飼糧蛋氨酸水平對27～34周齡油雞生產(chǎn)性能的影響

2.4 飼糧蛋氨酸水平對30周齡油雞蛋品質(zhì)的影響

由表5可知，飼糧蛋氨酸水平顯著影響雞蛋蛋白高度和哈氏單位(P<0.05)，其中0.34%組的蛋白高度、哈氏單位均顯著高于0.42%組(P<0.05)，但與0.48%組差異不顯著(P>0.05)。從數(shù)值來看，0.34%組蛋白高度和哈氏單位最高，雞蛋等級最好，蛋黃色澤較高。

表5 飼糧蛋氨酸水平對30周齡油雞蛋品質(zhì)的影響

2.5 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞蛋品質(zhì)的影響

由表6可知，飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞的其他蛋品質(zhì)指標影響均不顯著(P>0.05)，但對平均蛋重有影響趨勢(P=0.054)，0.42%組的平均蛋重高于0.34%組和0.48%組。從數(shù)值來看，飼糧蛋氨酸水平為0.34%組的蛋殼強度、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃色澤、雞蛋等級均最高。

表6 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞蛋品質(zhì)的影響

2.6 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清生化指標的影響

由表7可知，飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、溶菌酶、甘油三酯、總膽固醇含量的影響均不顯著(P>0.05)。血清尿素氮、甘油三酯、總膽固醇含量隨飼糧蛋氨酸水平的升高有升高趨勢。其中蛋氨酸水平為0.34%時，血清總蛋白、白蛋白和溶菌酶含量最高，尿素氮含量最低。

表7 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清生化指標的影響

2.7 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清抗氧化指標的影響

由表8可知，不同飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清谷胱甘肽過氧化物酶活性有影響趨勢(P=0.052)。其中蛋氨酸水平為0.42%時，血清谷胱甘肽過氧化物酶活性最高。但對血清總抗氧化能力、超氧化物歧化酶、過氧化物酶活性及丙二醛含量影響均不顯著(P>0.05)。從數(shù)值上來看，蛋氨酸水平為0.34%時，血清丙二醛含量最低，總抗氧化能力較高。

表8 飼糧蛋氨酸水平對34周齡油雞血清抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 飼糧蛋氨酸水平對油雞生產(chǎn)性能的影響

李亮[11]在研究蛋氨酸對29日齡雉雞的影響中表明，在低蛋白質(zhì)飼糧中添加0.768%DL-蛋氨酸可顯著提高42～49日齡雉雞的平均日采食量。盛微等[12]研究表明，飼糧蛋氨酸水平顯著影響29～91日齡雜交雞(隱形白羽肉雞和大骨雞)的采食量，其中低水平蛋氨酸組(29～49日齡0.31%、50～91日齡0.28%)采食量最高，高水平蛋氨酸組(29～49日齡0.47%、50～91日齡0.42%)采食量最低。段曉翔[5]在研究低蛋白質(zhì)飼糧中缺乏蛋氨酸(生長期0.505%，育肥期0.439%)時發(fā)現(xiàn)肉雞生長明顯被抑制。吳邦元[13]的研究同樣表明，蛋氨酸缺乏會導致0～6周齡艾維茵肉雞生長受到抑制，食欲減少。本試驗結(jié)果表明，27～30周齡油雞在飼糧蛋氨酸水平為0.34%時周平均蛋重最高，料蛋比最低。31～34周齡油雞在飼糧蛋氨酸水平為0.48%時，周平均蛋重和產(chǎn)蛋率最高，料蛋比和死淘率最低，但這些指標與0.34%組沒有顯著差異。因此綜合來看，飼糧蛋氨酸水平0.34%即可滿足27～34周齡油雞生產(chǎn)性能的需求。洪平等[14]研究46～53周齡黃羽肉種雞時發(fā)現(xiàn)，飼糧蛋氨酸水平對黃羽肉種雞的末重、平均日增重和料蛋比均無顯著影響。這與本試驗產(chǎn)蛋高峰期油雞結(jié)果較為一致。這可能因為油雞產(chǎn)蛋高峰期間產(chǎn)蛋率比前期升高許多，進入體內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)主要用于產(chǎn)蛋，而對機體生長無顯著影響。

3.2 飼糧蛋氨酸水平對油雞蛋品質(zhì)的影響

蛋氨酸是合成動物體蛋白質(zhì)和向動物體提供有效甲基的物質(zhì)，添加適量蛋氨酸可以有效改善飼糧蛋白質(zhì)平衡，提高養(yǎng)分利用率[15]。蛋品質(zhì)是通過雞蛋的蛋殼、營養(yǎng)價值、新鮮程度等來進行評定的。一般蛋殼強度、厚度和顏色是評價蛋殼的指標，蛋白高度、哈氏單位用來評價雞蛋的新鮮程度。蛋形指數(shù)可以判斷輸卵管壁的生理狀態(tài)和輸卵管峽部的構(gòu)造，且會隨周齡逐漸減小。李靈平等[15]研究發(fā)現(xiàn)，添加0.45%蛋氨酸在一定程度上提高了產(chǎn)蛋期白羅曼種鵝產(chǎn)蛋量、總蛋重、平均蛋重。黃璇等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.39%蛋氨酸可提高攸縣麻鴨產(chǎn)蛋后期性能和蛋品質(zhì)。當飼糧蛋氨酸水平為0.451%時哈氏單位可達最高，并可促進蛋白質(zhì)沉積。Ruan等[17]在研究飼糧蛋氨酸水平對19周齡龍巖鴨蛋重和抗氧化性能的影響時表明，飼糧蛋氨酸水平顯著影響蛋重和蛋白重，且隨飼糧蛋氨酸水平的升高呈先升高后降低的二次曲線變化趨勢。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加0.34%的蛋氨酸時，30周齡油雞雞蛋的蛋白高度和哈氏單位最高，蛋殼強度、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃色澤、雞蛋等級均為最高，飼糧中添加0.42%蛋氨酸時，平均蛋重較高，但與0.34%組差異不顯著。此外飼料成本在養(yǎng)殖成本中約占70%[15]，考慮經(jīng)濟性，飼糧蛋氨酸水平為0.34%時成本較低。

3.3 飼糧蛋氨酸對油雞血清生化指標和抗氧化指標的影響

血清總蛋白、球蛋白、白蛋白是衡量家禽健康程度的重要指標。蛋氨酸水平可通過改變氨基酸平衡從而改變脂肪生成和脂肪分解的比例[18]?？偪寡趸芰?、谷胱甘肽過氧化物酶是一類可在體內(nèi)清除多余氧負離子的生物抗氧化劑，具有重要的抗氧化作用，谷胱甘肽過氧化物酶在清除細胞內(nèi)的過氧化氫及脂類過氧化物上發(fā)揮作用。丙二醛是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，其含量越低則過氧化程度越低[13]。馬景林等[19]在研究飼糧蛋氨酸水平對17～20周齡京紅商品代蛋雞影響時表明，飼糧蛋氨酸水平對血清總蛋白、白蛋白含量及白球比均無顯著影響，這與本試驗結(jié)果較為相似?？赡苁钱a(chǎn)蛋高峰期產(chǎn)蛋數(shù)量迅速增加使油雞的生理代謝加大，蛋氨酸水平對產(chǎn)蛋高峰期油雞血清生化指標影響不顯著。李亮[11]提出添加0.768%DL-蛋氨酸可以極顯著提高29日齡雉雞血清和肝臟的總抗氧化能力。Fouad等[20]研究表明，飼糧蛋氨酸水平在0.25%～0.50%時對產(chǎn)蛋鴨血清谷胱甘肽、丙二醛含量及谷胱甘肽過氧化物酶活性均無顯著影響。Ruan等[17]在研究不同飼糧蛋氨酸水平對19周齡龍巖鴨蛋重和抗氧化性能的影響時，發(fā)現(xiàn)飼糧蛋氨酸水平為0.40%時，肝臟谷胱甘肽過氧化物酶和核因子相關因子2表達量最佳，谷胱甘肽含量最高，脂質(zhì)過氧化程度最低。本試驗研究顯示，飼糧蛋氨酸水平為0.48%時，血清谷胱甘肽過氧化物酶活性最高。由于蛋氨酸是谷胱甘肽合成前體物質(zhì)，谷胱甘肽又作為谷胱甘肽過氧化物酶合成底物，因此飼糧蛋氨酸水平越高時谷胱甘肽過氧化物酶活性越高[20]。飼糧蛋氨酸水平為0.34%時，血清總抗氧化能力最高，丙二醛含量最低。

4 結(jié) 論

① 本試驗條件下，27～34周齡油雞的周平均采食量、周平均蛋重、料蛋比、死淘率均不受飼糧蛋氨酸水平的影響。但飼糧蛋氨酸水平有影響27～34周齡油雞產(chǎn)蛋率的趨勢，其中0.34%組和0.48%組高于0.42%組。

② 飼糧蛋氨酸水平顯著影響30周齡油雞雞蛋的蛋白高度和哈氏單位，其中0.34%組的蛋白高度、哈氏單位均顯著高于0.42%組；飼糧蛋氨酸水平有影響34周齡油雞平均蛋重的趨勢，0.42%組的平均蛋重高于0.48%組，但0.34%組與其他2組平均蛋重差異均不大。

③ 綜合考慮生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血清生化指標，提出油雞產(chǎn)蛋高峰期(27～34周齡)飼糧蛋氨酸水平為0.34%即可滿足其生產(chǎn)需要。