潘英杰 張穎 武杞蔓 李正青

（沈陽(yáng)師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，沈陽(yáng) 110034）

在低溫時(shí)節(jié)，由于下雪、寒流侵襲或保溫措施不利，常會(huì)引起園藝作物遭受冷害或凍害。尤其重要的番茄、黃瓜等喜溫性蔬菜作物，在我國(guó)冬季和早春季節(jié)生產(chǎn)中常遭遇低溫傷害，嚴(yán)重影響了正常的生長(zhǎng)發(fā)育，降低了產(chǎn)量和品質(zhì)，給生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重的損失［1］。據(jù)有關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)銷(xiāo)售的果蔬約1/3屬于低溫敏感型，物流總量每年因冷害損失近30%。所以抗冷問(wèn)題是作物生產(chǎn)面臨的一項(xiàng)重要的問(wèn)題［2］。

植物在低溫脅迫下會(huì)啟動(dòng)體內(nèi)的主動(dòng)防御機(jī)制，植物細(xì)胞產(chǎn)生有利物質(zhì)或啟動(dòng)逆境相關(guān)基因表達(dá)，維持植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的完整性。糖類(lèi)作為安全無(wú)毒的天然物質(zhì)，對(duì)于提高作物的抗逆性具有較高的研究?jī)r(jià)值。在溫度下降過(guò)程中，植物細(xì)胞內(nèi)一些大分子物質(zhì)趨向于水解，細(xì)胞內(nèi)可溶性糖含量增加。植物的糖具有許多功能，既可以提供大量能量、作為生物體的結(jié)構(gòu)物質(zhì)存在，還可以作為信號(hào)分子調(diào)控植物源-庫(kù)關(guān)系和基因表達(dá)［3］。研究發(fā)現(xiàn)外源施加蔗糖、葡萄糖和海藻糖或褐藻寡糖等糖類(lèi)可顯著改善植株形態(tài)、調(diào)控作物抵抗冷脅迫，這其中離不開(kāi)諸多轉(zhuǎn)錄因子在相關(guān)信號(hào)通路參與調(diào)控。

植物抵抗低溫脅迫的過(guò)程是多個(gè)代謝反應(yīng)的綜合［4］。細(xì)胞低溫信號(hào)逐級(jí)傳遞，響應(yīng)和保護(hù)機(jī)制通過(guò)各種信號(hào)途徑啟動(dòng)。許多轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)參與信號(hào)傳遞過(guò)程，調(diào)控下游基因表達(dá)，細(xì)胞內(nèi)代謝過(guò)程改變而適應(yīng)低溫的環(huán)境［5］。WRKY類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子是其中的一類(lèi)重要轉(zhuǎn)錄因子，可通過(guò)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與植物的溫度脅迫應(yīng)答［6］。目前在幾種植物如白菜、黃瓜中鑒定出存在大量WRKY蛋白，參與植物形態(tài)建成、次生代謝過(guò)程、蔗糖信號(hào)傳導(dǎo)及一些由植物激素介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，在生長(zhǎng)發(fā)育、抗病、非生物脅迫響應(yīng)等各個(gè)方面都起重要調(diào)控作用［7］。

本文就糖在冷脅迫響應(yīng)中的作用機(jī)理進(jìn)行生理生化及信號(hào)傳遞、與激素信號(hào)互作等分子水平進(jìn)行綜合闡述，并分析討論WRKY轉(zhuǎn)錄因子于其中的重要作用，探討了施糖下緩解園藝作物低溫逆境傷害的可能信號(hào)途徑及應(yīng)答機(jī)制。

1 糖對(duì)園藝作物冷脅迫響應(yīng)的調(diào)控作用

糖類(lèi)物質(zhì)具有許多生物學(xué)功能。糖可參與植物生長(zhǎng)發(fā)育等生命活動(dòng)，在脅迫下可起重要的防護(hù)作用［8］。近年來(lái)隨著海洋科學(xué)研究的不斷發(fā)展，分子量低、水溶性好、易吸收的海藻寡糖進(jìn)入人們視野。海藻寡糖種類(lèi)豐富，以褐藻寡糖（alginate-derived oligosaccharides，ADOs）、卡拉膠寡糖等為代表，具有多種生物活性，如抑菌［9］、抗氧化［5］、促生長(zhǎng)［10］等，其開(kāi)發(fā)與利用有利于海洋資源高值化應(yīng)用［11］。目前有研究表明基因組的減少促進(jìn)了假單胞菌生產(chǎn)褐藻寡糖，這為褐藻寡糖的大規(guī)模投入生產(chǎn)應(yīng)用提供了準(zhǔn)備條件。以海藻糖、褐藻寡糖等為代表，探究天然抗逆物質(zhì)對(duì)于作物抗冷的機(jī)制與應(yīng)用將具有重要意義。以下歸納分析糖對(duì)園藝植物響應(yīng)冷脅迫的作用如表1。

參Reference獻(xiàn)文考2］［1 sechanism分Molecular m理機(jī)子用作的素Horm one激中ts’ response to cold stress 3］［1 8］［14］［15］［16］［17］［1［19］［1］Genes related↑及因 相etabolism in apical buds應(yīng)ey genes for 43表43 PS genes response 達(dá)expression基 響關(guān) 因 ↑K S基 因謝基GSTU GSTU代鍵g糖cose m MdTP頂to glu 1、1 and個(gè)芽22 M關(guān)erin花dT成flow OHRB OHRB JA源與Internal sou H2O2、O rce H2O2，O、N，and N內(nèi)參JA迫lan le脅冷Variab對(duì)otic物orticu lture p ility of應(yīng) 量變e activity eroxidation peroxidation ofid植↓of sucrose synthase藝性 ↓ulation of osm園活 性elative permeab brane lip在istry酶 活irection ccum em糖↓化 酶ntioxidant enzym↑A性u(píng)s sugar in h brane lipid p源轉(zhuǎn)抗Ascorbic acid content抗oids and antioxidant capacity向eutral sucrose invertase activity力↑A em ↓M方↑hlorophyll content iochem能↓R oles of exogeno生Physiology，b糖decomposition 累透化1 外 量 化 蔗 解 性對(duì) ↑ ↓ 積 ↓M氧 ↑C化含 氧 性 分 活相brane of leaves成化↑的 過(guò)量生酸中em酶黃Flavon 酶膜d n 合氧 力 質(zhì)氧脂含表、血 和 與an 合 化質(zhì) 素 過(guò) 能 物 過(guò)膜理壞 酮 酸Acid糖性 蔗En zyme activity in the d氧片 綠葉Ch plasma m lorophyll synthesis脂 合 脂片 綠抗葉 膜Membrane lipid peroxidation光Photosynthetic capacity透bstances化滲su膜葉leaves素葉ble 1 R ↑果Fruit coloring and appearance↑tent in pericarp↑↑ 量量oid eight質(zhì)量↑含含 及Ta 質(zhì)素苷度品卜色itratable acid寬d quality of le sugars、d dry w觀 量 蘿 花 ↓T、an長(zhǎng)an外 含 胡 、 量度of short branch根、 素類(lèi) 糖 長(zhǎng)idth ud mylopectin The leaves turn green↑Solub↑、resh質(zhì)Quality 色 青 和 總 酸芽 綠↓Internode distance糖質(zhì) 積 ↑F著素性定頂↑ A變距性 品 面 重實(shí)ality花inal b青皮溶 滴枝 粉 片間溶 葉 表 干品qu果Anthocyanin con花Anthocyanin and caroten content可Total soluble sugar and anthocyanin含可短Length，w term淀 葉節(jié)可 茶Tea quality根Root surface area and root length鮮外Exogenous糖源sugar A AL種Species果Ap ple物 蘋(píng)糖Sucrose蔗莓Strawberry草糖Sucrose蔗莓Blueberry藍(lán)葡Glucose糖萄 果Ap ple蘋(píng)葡Glucose糖萄 子Eggp lant茄AAL茄Tomato番A 糖AL 海Trehalose藻樹(shù)Tea tree茶 米Corn玉海Trehalose糖藻 瓜Cucumber黃境Stress逆 無(wú)None冷脅迫Cold stress

1.1 糖對(duì)園藝作物生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)節(jié)

目前諸多研究表明，施糖明顯改善了作物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程的品質(zhì)。如外源5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid，ALA）處理參與了蘋(píng)果品質(zhì)調(diào)節(jié)，明顯促進(jìn)果實(shí)著色、提高了果皮花青素含量并改善果實(shí)外觀品質(zhì)［12］；外施蔗糖顯著增加了草莓果實(shí)的單果重；在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中藍(lán)莓可溶性總糖、花色苷含量增加，可滴定酸含量有所降低［14］；外源蔗糖處理藍(lán)莓果實(shí)發(fā)育的關(guān)鍵品質(zhì)顯著改善；外施蔗糖、果糖和等體混合液處理均顯著提高草莓果實(shí)的可溶性固形物含量；外施蔗糖和葡萄糖加速了草莓果實(shí)成熟、花青素的積累增多［13］。由此可見(jiàn)，外施糖的應(yīng)用可有效緩解逆境對(duì)園藝植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中品質(zhì)的負(fù)面影響，為園藝產(chǎn)品保量保質(zhì)。外施海藻糖緩解了玉米根系根表面積、根長(zhǎng)等生理指標(biāo)冷脅迫下的傷害；冷脅迫下施用ALA緩解了茶樹(shù)葉片品質(zhì)的傷害。

1.2 糖對(duì)園藝作物冷脅迫下生理生化的調(diào)節(jié)

當(dāng)植物處于寒冷環(huán)境下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)大量產(chǎn)生活性氧（reactive oxygen species，ROS）自由基。ROS能作為信號(hào)傳遞體直接通過(guò)激活相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和蛋白激酶發(fā)揮作用。然而另一方面，ROS 不斷積累會(huì)使蛋白質(zhì)、脂類(lèi)代謝異常，破壞超氧化物歧化酶（superoxide dismutases，SOD）等保護(hù)酶系統(tǒng)，有害物質(zhì)積累增多。嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起膜脂過(guò)氧化，導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)破壞、膜透性增大，膜內(nèi)離子大量外泄等。研究表明，外施糖可緩解作物低溫脅迫損傷［20］，這主要體現(xiàn)在抗氧化水平調(diào)控以及滲透調(diào)節(jié)等方面。

1.2.1 糖通過(guò)抗氧化水平調(diào)控作物冷適應(yīng) ROS的積累下會(huì)產(chǎn)生丙二醛（malonaldehyde，MDA）和硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì)（thiobarbituric acid reactive substances，TBARS）等物質(zhì)。生成的丙二醛與蛋白質(zhì)聯(lián)合，導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間交互聯(lián)合，形成蛋白質(zhì)交聯(lián)產(chǎn)物；同時(shí)，丙二醛可降低細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸含量，抑制膜的流動(dòng)性，最終導(dǎo)致膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)破壞，甚至引起細(xì)胞死亡［21］。可溶性糖可通過(guò)磷酸戊糖氧化途徑參與清除ROS。外源施用低濃度葡萄糖可清除脅迫導(dǎo)致的過(guò)量ROS，緩解脅迫損傷。對(duì)小麥幼苗施用低濃度的葡萄糖，過(guò)氧化物酶、過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶等抗氧化酶活性增強(qiáng)［22］。ADOs處理可刺激合成 ABA，從而誘導(dǎo)一些參與 ABA 信號(hào)通路的抗氧化酶合成基因表達(dá)，進(jìn)而減輕逆境傷害［23］。

1.2.2 糖作為滲透調(diào)節(jié)劑調(diào)控作物冷適應(yīng) 糖類(lèi)分子既可清除脅迫下的有毒ROS，還可作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)參與作物抗寒，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)適應(yīng)低溫環(huán)境。在高等植物中各種可溶性糖，如葡萄糖、蔗糖、果糖、棉子糖和水蘇糖等均具有耐寒作用。糖類(lèi)物質(zhì)的積累能夠增加細(xì)胞滲透勢(shì)，進(jìn)而增強(qiáng)細(xì)胞保水能力。如果聚糖解聚能釋放大量的游離果糖，可作為液泡滲透緩沖劑發(fā)揮作用。同樣，海藻糖可穩(wěn)定蛋白質(zhì)和膜，低溫脅迫下濃度顯著升高；外施海藻糖可顯著提升作物體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)酶活表達(dá)及滲透物質(zhì)的積累使玉米幼苗抗逆能力提高［19］。龐椿朋等［24］發(fā)現(xiàn)外施棉子糖寡糖在植株表型、細(xì)胞抗氧化水平和細(xì)胞滲透勢(shì)調(diào)節(jié)方面均表現(xiàn)出對(duì)番茄低溫脅迫的緩解作用。

1.2.3 糖從其他方面調(diào)控作物冷適應(yīng) 糖對(duì)生物膜及生物大分子等生命物質(zhì)有保護(hù)作用，低溫下能降低冰點(diǎn)，提高原生質(zhì)保護(hù)能力，保護(hù)蛋白質(zhì)膠體免于遇冷變性凝聚［25］；還可通過(guò)與脂質(zhì)雙層相互作用穩(wěn)定膜的結(jié)構(gòu)。如果聚糖可在低溫下抵抗結(jié)晶［26］。果聚糖可通過(guò)降低脂質(zhì)凝膠相與液晶相轉(zhuǎn)化的相變溫度，增強(qiáng)糖與膜的相互作用，結(jié)合在膜脂的磷酸基和膽堿基團(tuán)上，穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)［27］，對(duì)膜起保護(hù)作用。海藻糖抑制細(xì)胞間形成冰晶，避免引起損傷。在低溫下海藻糖替代水分子與膜磷脂及蛋白質(zhì)分子表面部分結(jié)合，保護(hù)膜蛋白質(zhì)防止變性失活，減少膜損傷；又如棉子糖家族寡糖（raffinose family oligosaeeharides，RFOs）置于膜雙分子層的脂質(zhì)上，在外界脅迫嚴(yán)重時(shí)穩(wěn)定脂質(zhì)，其高寡體可用來(lái)保護(hù)脂質(zhì)體，同時(shí)可作為自由基清除劑發(fā)揮作用［24］。此外，研究表明褐藻寡糖（ADOs）可響應(yīng)非生物脅迫，增強(qiáng)黃瓜光合作用、調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素和赤霉素含量、C和N同化以及合成具有抗病原性和藥用價(jià)值的次生代謝物［28］。

1.3 糖對(duì)園藝作物冷脅迫下分子機(jī)制的調(diào)節(jié)

外源糖對(duì)作物寒冷環(huán)境下的適應(yīng)性調(diào)控具有重要的作用，可通過(guò)調(diào)節(jié)多種生理過(guò)程增強(qiáng)冷脅迫耐受性，相關(guān)研究表明其以濃度依賴方式調(diào)控，可溶性糖濃度的增加可提高植物冷脅迫的耐受性［20］。除生理生化方面的調(diào)控作用外，糖還可通過(guò)與激素互作等在分子層面參與作物冷脅迫應(yīng)答反應(yīng)。

植物激素 ABA 是一類(lèi)脂溶性的小分子植物激素，可以廣泛調(diào)節(jié)植物的許多反應(yīng)，在植物冷脅迫防御反應(yīng)中起重要作用。近年來(lái)研究表明，ABA 信號(hào)通路對(duì)植物防御、生長(zhǎng)發(fā)育及代謝產(chǎn)物的生物合成等都具有重要作用，如促進(jìn)脫落、抑制生長(zhǎng)、抑制種子萌發(fā)等，因而成為研究的熱點(diǎn)。作為重要的脅迫響應(yīng)激素，通常情況下 ABA 會(huì)在低溫下迅速積累，通過(guò)整合多種應(yīng)激信號(hào)調(diào)節(jié)下游應(yīng)激反應(yīng)基因表達(dá)［29］?，F(xiàn)已證實(shí)在多種植物體內(nèi)存在依賴于ABA的抗冷途徑，這一系列脅迫應(yīng)答過(guò)程離不開(kāi)內(nèi)源糖的產(chǎn)生與參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控。糖與ABA等植物激素在調(diào)節(jié)發(fā)育過(guò)程和脅迫反應(yīng)過(guò)程中具有復(fù)雜的相互作用。如葡萄糖和蔗糖是植物發(fā)育過(guò)程關(guān)鍵信號(hào)分子［30］，參與信號(hào)傳遞過(guò)程［31］。外源施用小分子糖，可能通過(guò)參與ABA抗冷途徑的調(diào)控進(jìn)行調(diào)節(jié)。

在糖和植物激素信號(hào)之間復(fù)雜的互作關(guān)系中，葡萄糖感受器——己糖激酶（hexokinase，HXK）起到核心作用。不同的糖信號(hào)激活多個(gè)HXK依賴和HXK非依賴的途徑，并通過(guò)不同的分子機(jī)制調(diào)控轉(zhuǎn)錄、翻譯、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和酶活性。在冷脅迫下糖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中，蔗糖非酵解型蛋白激酶、胞外糖感受器和海藻糖代謝等的作用重要而復(fù)雜。蔗糖非酵解型蛋白激酶（sucrose non-fermenting related protein kinase，SnRK）是一類(lèi)催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，一般會(huì)使底物蛋白質(zhì)的羥基磷酸化，廣泛存在于多種植物，在植物抵抗逆境過(guò)程中起到重要生理功能，可通過(guò) ABA 誘導(dǎo)、不同離子通道及滲透脅迫等激活，調(diào)控作物生長(zhǎng)發(fā)育與冷適應(yīng)［32］。

綜上，外源小分子糖通過(guò)影響植株對(duì)冷脅迫的生理生化響應(yīng)等來(lái)增強(qiáng)植物在冷脅迫下的抗氧化能力、緩解膜損傷以及進(jìn)行滲透調(diào)節(jié)，進(jìn)而提高植株對(duì)低溫抗性。在分子層面，糖通過(guò)信號(hào)傳遞、與激素信號(hào)互作等途徑參與抗冷調(diào)控。

2 WRKY轉(zhuǎn)錄因子參與冷脅迫下重要基因表達(dá)調(diào)控

抗逆機(jī)制既多元又復(fù)雜，植物WRKY類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子參與很多信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，可與冷脅迫相關(guān)應(yīng)答信號(hào)分子彼此之間相互作用，調(diào)控多種植物發(fā)育和防御進(jìn)程［33］。

2.1 植物WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征與分類(lèi)

WRKY是植物的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子超家族。WRKY轉(zhuǎn)錄因子N端含有高度保守的WRKYGQK等60個(gè)氨基酸殘基組成的WRKY 結(jié)構(gòu)域而命名；C端通常有鋅指結(jié)構(gòu)，可通過(guò)結(jié)合靶基因啟動(dòng)子中核心序列為（C/T）TGACC（A/T）的W-box，激活或抑制下游基因的表達(dá)。根據(jù)WRKY蛋白序列中WRKY保守結(jié)構(gòu)域數(shù)目及鋅指結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，WRKY轉(zhuǎn)錄因子可分為3類(lèi)，其中I類(lèi)含有兩個(gè)WRKY保守結(jié)構(gòu)域，II類(lèi)只有一個(gè)WRKY結(jié)構(gòu)域，二者均為C2H2型鋅指結(jié)構(gòu)（CX4-5CX22-23HX1H），III類(lèi)只含有一個(gè)WRKY結(jié)構(gòu)域，其鋅指結(jié)構(gòu)為C2HC型（CX7CX23HX1C）［34］。其中最原始的WRKY類(lèi)型為第I類(lèi)，最為保守；第III類(lèi)進(jìn)化最為活躍。WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物界中廣泛存在，WRKY蛋白能夠廣泛參與植物基因表達(dá)的調(diào)控［35］，WRKY基因的表達(dá)受多種不同環(huán)境條件的誘導(dǎo)，在植物的逆境脅迫應(yīng)答、植株形態(tài)建成和生理代謝等方面都發(fā)揮重要作用。

2.2 WRKY對(duì)園藝作物生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)節(jié)

WRKY可參與調(diào)控作物多種生理代謝過(guò)程的生長(zhǎng)發(fā)育。如鴨茅WRKY基因DGE1的表達(dá)對(duì)于正常的體細(xì)胞胚胎發(fā)生必不可少［36］；ScWRKY1在馬鈴薯胚胎發(fā)育后期受精胚珠中強(qiáng)表達(dá)［37］。WRKY44也稱透明種皮基因Glabra 2（transparent testa glabra2，TTG2），參與調(diào)節(jié)毛狀體和根毛的發(fā)育［38］；WRKY蛋白SUSIBA2調(diào)控胚乳中淀粉的產(chǎn)生。編碼AtWRKY10的Miniseed3基因在花粉、球形胚和發(fā)育中的胚乳中表達(dá)較高?？梢?jiàn) WRKY 家族可在寒冷環(huán)境下參與調(diào)節(jié)發(fā)育過(guò)程和冷脅迫反應(yīng)過(guò)程。

2.3 WRKY家族在冷脅迫下的表達(dá)

低溫脅迫下，WRKY轉(zhuǎn)錄因子可調(diào)控靶基因表達(dá)，參與調(diào)節(jié)植物的低溫耐受性［39］。王藝璇等［40］發(fā)現(xiàn)番茄有27個(gè)WRKY家族成員明顯受低溫誘導(dǎo)。其中SlWRKY2、SlWRKY50等基因的啟動(dòng)子區(qū)域存在CRT/DRE元件（CBFs結(jié)合位點(diǎn)），可能參與了CBFs介導(dǎo)的低溫響應(yīng)途徑。張穎等［41］發(fā)現(xiàn)4℃低溫下黃瓜CsWRKY46表達(dá)量升高，通過(guò)轉(zhuǎn)基因鑒定功能表明其可能通過(guò)ABA依賴的信號(hào)通路調(diào)控植物抵抗低溫。WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物響應(yīng)脅迫過(guò)程中發(fā)揮重要作用［42］，具體如表2。

參Reference獻(xiàn)文考］43［40，5］44-4［41，［46］［47］［48］er作互能的互ith oth作with賴相-box依可子-teraction w 互因7 55）ith W 32 interaction和28，42 and 5 W-box BI5 interaction w A-dependent signaling pathwAB A 5 participate Ys participate in A轉(zhuǎn)PK他in BA ays不MA 42中的與ays能子其8、Y2路參功能與；ays；echanism 揮32與KY lays its function錄動(dòng)RK 通啟號(hào)發(fā)KY體plex p徑I5信KY途CsWR CsWR AB d A vW的KY可RR pathw↑合F-CO 2、2 and 賴VvWR KY（V 46與 依transcription factors VvWR RKvW t signaling pathw F-CO 7制AY（an力個(gè)路E-CB KY KY復(fù)-com機(jī)K YSlWR CsWR CsWR 46 E-CB用CsWR KY SlWR KY CsWR能化VvWR PK KY ABRK 12通Response m應(yīng)ICIC氧AB抗Antioxidant capacity ltural crops個(gè)與vW MA外號(hào)3參3 V作in另信Other 12 V dependenin與orticu能功90 17作Y in various h目uction of（reduction Y62等2、7、9、1、4、數(shù)Y23、Y49、8、Y40、3、Y3達(dá)RK Cla021 Y5Y3Y3Y5Y3Y29、的11、Y43、RK RK RKKY RK RK 表vW 和RKvWvWvWvWvW KY RK sW RK（strong induction of gene RK PK oderate ind調(diào)RK中vW物35、SlW SlWR 69、SlW SlWR 43、SlW 25、C 1、 （m sW 55下56、F Y 55）RK 12、V 49、V 33、V 44、VKY 22、V KY藝園RK 23、C KY KY 9、KY KY表VvWR KY KY KY CsWR KY KY 達(dá)KY lW CsWR 06、VKY FvWR 達(dá)KY KY表SlWR各of W SlWR SlWR SlWR CsWR SlWR 表59（C VvWR VvWR達(dá)VvWR VvWR類(lèi)Y53上調(diào)Y59、 表6、Y35、4、Y46上Y62、在Y41、KY RK Y79等RKRK調(diào)VvWP Y24、調(diào)RK 3、Y5 la0180下Y1 nction RK調(diào)4、Y43、KY Y58、RK Y47、Y31、Y21、達(dá)Y16、達(dá)因gene expression）sW temperature個(gè)RK SlWR 上vWvWvWvWvWvWvW RK RK RK function響sW RK RK PK表ression）RK of gene exp27、F Y基，C達(dá)59、S 61、S；12 Identified RK調(diào)達(dá)0）RK 57 顯KY KY fu 2、21、S KY 24、S lWlWlWlWlWsW expression）50、S 36、C RKnd KY響onse to low 著CsWR 2、28、C vW達(dá)表KY應(yīng)28、V表調(diào)KY 08、V KY KY KY 表Y255、V調(diào)19、V KY 45、V 26、V KY上RKKY KY 11、V KY KY 41下SlWR KY ber a KY能KY 2 W SlWR 18、C溫SlWR 上個(gè)SlWR個(gè)lW SlWR功SlWR低Resp KYKY CsWR CsWR CsWR CsWR CsWR FvWR 調(diào)下個(gè)327（C VvWR VvWR VvWR VvWR VvWR VvWR VvWR VvWP表um ble 2 N 定鑒已Y 14、PK Y 49、PK Y 72、PK Ta病Response to pathogen應(yīng)響78、SlW 58、SlW 21、SlW 68體KY KY KY KY原SlWP SlWP SlWP SlWP育發(fā)th生Grow長(zhǎng)2、類(lèi)數(shù)SlWR KY 63、49 I多如SlWR KY KY SlWR 25、KY 32、50、52、59 CsWR KYCsWR K YCsWR K YCsWR K YCsWR 56ClWR KY個(gè)目Number數(shù)種Species物86茄Tomato番57瓜Cu cumber黃6 2莓Strawberry草5 7瓜Waterm elon西5 9萄Grape葡

3 糖信號(hào)通路中WRKY調(diào)控園藝作物冷適應(yīng)

WRKY是重要的逆境響應(yīng)調(diào)控因子，諸多研究表明WRKY的冷脅迫調(diào)控存在復(fù)雜而緊密的關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，可能受外源糖誘導(dǎo)并協(xié)同促進(jìn)作物冷脅迫下的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.1 WRKY與糖類(lèi)共同參與脅迫下作物生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控

非生物脅迫會(huì)抑制植物生長(zhǎng)，冷脅迫會(huì)限制細(xì)胞分裂等生長(zhǎng)過(guò)程。然而越來(lái)越多研究表明，在逆境下植物會(huì)主動(dòng)放慢自己的生長(zhǎng)速度以適應(yīng)環(huán)境，受到脅迫的植物通過(guò)相關(guān)信號(hào)自發(fā)抑制生長(zhǎng)，確保充足的能源供應(yīng)以適應(yīng)逆境環(huán)境［49］。因此探究作物生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控機(jī)制對(duì)于探究脅迫損傷耐受性具有一定作用。

糖類(lèi)物質(zhì)作為信號(hào)分子與脅迫通過(guò)不同的途徑調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)發(fā)育，平衡源和庫(kù)的新陳代謝和防御反應(yīng)，適當(dāng)施用一定濃度的外源糖對(duì)于作物的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的調(diào)節(jié)作用。一定濃度的ADO可促進(jìn)黃瓜幼苗生長(zhǎng)，增加黃瓜幼苗株高、莖粗、株幅及鮮重，且不同濃度下促進(jìn)作用不同［50］。

WRKY可能通過(guò)多種信號(hào)途徑參與冷脅迫下作物生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控。作為許多植物過(guò)程的關(guān)鍵調(diào)控因子，WRKY轉(zhuǎn)錄因子在植物種子形成、萌發(fā)、胚胎發(fā)育、組織器官發(fā)育、植株衰老、葉片衰老等各個(gè)重要生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。

3.2 WRKY參與調(diào)控冷脅迫下糖信號(hào)表達(dá)

植物體內(nèi)的糖多是在環(huán)境脅迫條件下產(chǎn)生的一種應(yīng)激產(chǎn)物，其含量因外界環(huán)境差異而變化。外源施糖可緩解脅迫下的作物損傷，如外施海藻糖可緩解低溫脅迫對(duì)黃瓜幼苗的傷害，增強(qiáng)植株體內(nèi)抗氧化酶SOD、POD活性，可有效清除活性氧；海藻糖溶液處理緩解番茄鹽脅迫傷害，提高番茄植株生長(zhǎng)，減輕了鹽脅迫誘導(dǎo)的膜脂過(guò)氧化損傷［51］。

研究發(fā)現(xiàn)WRKY與糖代謝相關(guān)，外源施用糖可能通過(guò)WRKY轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)脅迫響應(yīng)調(diào)控。WRKY 轉(zhuǎn)錄因子可參與調(diào)控碳水化合物（淀粉）的生物合成代謝［52］，在大麥中克隆獲得的轉(zhuǎn)錄因子SUSIBA2，按其結(jié)構(gòu)特征歸屬于 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子，能結(jié)合糖響應(yīng)元件（sugar responsive，SURE）的W-box 位點(diǎn)。VvWRKY22在調(diào)節(jié)糖代謝方面發(fā)揮作用，其表達(dá)受外源蔗糖抑制、由果糖誘導(dǎo)；過(guò)表達(dá)VvWRKY22降低了葡萄糖分含量，并調(diào)節(jié)了葡萄中糖相關(guān)基因的表達(dá)［53］。糖處理可能誘導(dǎo)WRKY基因響應(yīng)脅迫，如董蘊(yùn)琦等發(fā)現(xiàn)，嘧肽寡糖處理誘導(dǎo)了WRKY53、WRKY70等基因顯著上調(diào)，誘導(dǎo)作物產(chǎn)生抗病性［54］。這也表明了外源糖處理可能通過(guò)WRKY基因的調(diào)控共同參與抵御寒冷脅迫。Huang等［55］發(fā)現(xiàn)糖和ABA處理下的VvWRKYs響應(yīng)，共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)似乎聚集在一個(gè)模塊中的VvWRKYs、糖和ABA相關(guān)基因，預(yù)測(cè)了VvWRKYs在葡萄生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的潛在功能，表明VvWRKYs參與糖和ABA信號(hào)途徑。WRKY轉(zhuǎn)錄因子可能通過(guò)ABA信號(hào)網(wǎng)絡(luò)介導(dǎo)糖信號(hào)表達(dá)，這或許對(duì)糖的低溫響應(yīng)調(diào)控相關(guān)，因而外源糖作用下可能通過(guò)刺激相關(guān)基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)以便作物抵抗低溫傷害。

4 展望

外源施用糖可以緩解低溫脅迫損傷，在生產(chǎn)中有增強(qiáng)蔬菜作物抵抗低溫能力，以實(shí)現(xiàn)作物越冬安全及抗污染、提高作物的品質(zhì)與產(chǎn)量等將發(fā)揮重要作用。目前，施糖在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用還未廣泛展開(kāi)，缺乏統(tǒng)一使用標(biāo)準(zhǔn)與濃度，針對(duì)不同作物、不同寒冷環(huán)境仍需要進(jìn)行系統(tǒng)的研究，這有利于糖在園藝作物生產(chǎn)實(shí)踐中更加廣泛、有效的利用。

雖然對(duì)冷脅迫下植物體內(nèi)糖響應(yīng)工作已有展開(kāi)并取得了相關(guān)規(guī)律性的結(jié)論，但相關(guān)研究還主要停留在生理水平上，分子機(jī)理的揭示略顯不足，主要集中在一些轉(zhuǎn)錄因子及功能基因?qū)χ参锏恼{(diào)節(jié)作用研究，轉(zhuǎn)錄因子的靶基因及整體的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)模式等并不清楚。目前有研究糖濃度水平對(duì)于作物抗冷的積極響應(yīng)，糖感機(jī)制模型下WRKY轉(zhuǎn)錄因子似乎在調(diào)控過(guò)程中起重要作用，從分子水平上揭示冷脅迫誘導(dǎo)植物糖響應(yīng)相關(guān)基因表達(dá)等方面有待進(jìn)一步深入研究。從激素信號(hào)的產(chǎn)生、體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)到植物發(fā)生相應(yīng)的生理生化變化，通過(guò)了解調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的信號(hào)路徑，相關(guān)WRKY信號(hào)和轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)有待建全完善，以探明糖調(diào)節(jié)作物冷適應(yīng)途徑。為指導(dǎo)改良作物抗低溫奠定理論基礎(chǔ)，具有重要的科學(xué)和指導(dǎo)實(shí)踐意義。