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        仔豬水腫病病原分離鑒定及免疫防治研究

        2022-05-03 10:05:58張葉茹
        新農業(yè) 2022年7期
        關鍵詞:腹瀉水腫病檢測法

        張葉茹

        摘要:仔豬水腫病(ED)在全球流行廣泛,嚴重影響著畜牧業(yè)的發(fā)展和人類的飲食健康。本文通過對仔豬水腫病研究發(fā)現(xiàn), 引起豬斷奶后腹瀉(PWD)和水腫?。‥D)的大腸桿菌菌株僅限于若干血清群,其中滴定檢測法和微陣列檢測法是較為常見的兩種檢測方法。這兩種方法可以有效對地方養(yǎng)豬場豬糞樣品進行檢測和驗證,還可以對患有水腫病的仔豬進行大腸桿菌篩查。

        關鍵詞:仔豬;水腫?。桓篂a;檢測法

        仔豬水腫病是造成斷奶仔豬產生巨大損失的一種嚴重疾病。大腸埃希菌,也被稱為大腸桿菌(VTEC),被認為是豬只患水腫病的主要病因。這些菌株克隆了斷奶仔豬的腸道,并在腸道中產生對細胞致命的毒素,因此被稱為大腸桿菌。大腸桿菌中的毒素也被稱為志賀樣毒素(SLT),因為它們與痢疾志賀菌產生的志賀毒素關系密切。目前,根據(jù)與志賀氏菌毒素的關系命名為志賀氏菌毒素(Stxl,Stx2,Stx2c,Stx2e),產生毒素的大腸桿菌菌株命名為志賀氏菌產毒大腸桿菌(STEC)。在豬身上,水腫病可能發(fā)展為異能血癥,這是斷奶仔豬易患的一種疾病,通常在斷奶后一周內發(fā)生,是由于在斷奶后立即給仔豬喂食含藥物的飼料混合物造成感染,老年動物大多不會出現(xiàn)這種情況。在發(fā)生水腫病的豬群中,一窩中的一只仔豬受影響會傳染所有的仔豬,但是也有個別仔豬根本不受這種病的影響。因此可以使用抗毒血清防治水腫病,血清是用從Stx2e類毒素和脂類調節(jié)劑制備的。

        志賀毒素檢測的滴定試驗在VERO細胞上進行。將加熱至56℃滅活30分鐘的血清連續(xù)稀釋,并添加抗生素。向所有稀釋液中加入等量的含有志賀毒素的大腸桿菌上清液(濃度為10%),細胞毒性劑量會對50%的vero細胞系產生細胞病變效應,將混合物放在室溫下靜置。第二天,將60微升不同稀釋度的混合物加入平板孔中,并加入90微升濃度為3×10/毫升的Vero細胞懸浮液。在37℃條件下孵育后,通過掃描電子顯微鏡微鏡下對結果進行評估。72小時后對樣品進行最后一次血清稀釋,抑制Vero細胞變性50%,提高中和抗體滴度,得到檢測結果。

        當微陣列檢測法直接應用于豬糞便樣本時,可以用于豬場監(jiān)測或特定地區(qū)的流行病學調查,是一種有效的初步篩選方法。第一步是使用微陣列直接用豬糞便樣本檢測是否存在潛在的致病性O血清群。一旦發(fā)現(xiàn)致病血清群,可進行進一步平板接種以分離目標血清群菌落。然后可以通過相同的微陣列檢查分離的菌株,以確定毒力基因模式。雖然微陣列可直接用豬糞便樣本同時檢測致病血清群和毒力基因,但血清群特異性和毒力基因可能來自不同的宿主菌株。PWD和ED疾病通常發(fā)生在斷奶后14天內的仔豬身上。攜帶具有相關毒力基因的PWD和ED相關血清群菌株的成年豬本身可能不會表現(xiàn)出任何癥狀,但卻可以成為仔豬的感染源。由于病原體的快速傳播,導致大型豬場爆發(fā)PWD和ED,因此在開始繁殖或購買仔豬時,使用這種微陣列對PWD和ED相關大腸桿菌菌株進行初步篩選非常重要。這是檢測PWD和ED的首個可全面檢測大腸桿菌血清型和致病型的DNA微陣列,并有望作為一種新的診斷工具,用于調查散發(fā)性感染和暴發(fā)以及監(jiān)測這些菌株在不同地理位置的血清群/病理型分布。

        對已經發(fā)病仔豬在飼料中加入鹽類瀉劑連用2天。病初可采用亞硒酸鈉和維生素E,對癥治療。可用卡那霉素、硫酸新霉素或硫酸鏈霉素,每天2次,連續(xù)注射2~3天。利用分離的病原菌制備高免血清,給仔豬口服或注射,可用于預防或緊急治療。治療要今早,提倡采用綜合防治方法。一旦發(fā)現(xiàn)仔豬患水腫病,要整窩、全群用藥,特別對感染但未表現(xiàn)臨床癥狀的豬只,以爭取更多的治療時間。增加飼料中多種維生素、硒等的含量,以提高抗應激水平。進行藥敏試驗,有針對性地使用抗菌藥物,同時要用地塞米松、高滲葡萄糖等加強抗炎與解毒治療。靜注、腹腔注射效果要好于肌注效果。降低日糧蛋白,有利于控制疾病。

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