Keanpen，劉繼根，曹 娜，趙易藝

（長(zhǎng)沙道勤生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙 410000）

我國(guó)自發(fā)生非洲豬瘟疫情后，養(yǎng)豬業(yè)遭受了巨大損失。眾多規(guī)模豬場(chǎng)和養(yǎng)殖戶認(rèn)為非洲豬瘟病毒難防，但是只要在復(fù)產(chǎn)前和生產(chǎn)管理過(guò)程中構(gòu)建好豬場(chǎng)的生物安全體系，綜合防控主要疫病，做好豬場(chǎng)內(nèi)外環(huán)境監(jiān)測(cè)，便可以有效阻斷非洲豬瘟病毒傳播途徑。因此，環(huán)境監(jiān)測(cè)在防控非洲豬瘟等動(dòng)物疫病以及制定防控措施中起到了關(guān)鍵的作用。HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)，一方面能夠發(fā)現(xiàn)環(huán)境病毒與溯源，另一方面讓消毒措施更具有實(shí)戰(zhàn)性，更匹配豬場(chǎng)實(shí)際生物安全現(xiàn)狀。

1 HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)法

大多數(shù)養(yǎng)殖場(chǎng)僅僅只是對(duì)豬只進(jìn)行監(jiān)測(cè)，對(duì)環(huán)境樣品采集監(jiān)測(cè)很少，而且缺少合理規(guī)范的采樣技術(shù)規(guī)程。大規(guī)模、高頻率的采樣監(jiān)測(cè)增加了豬群應(yīng)激和感染風(fēng)險(xiǎn)。HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)法不直接接觸豬群，監(jiān)測(cè)區(qū)域分為H、S、P三塊。H區(qū)即人區(qū)，是指有人流和物流的豬舍內(nèi)部和豬舍之間的通道（包括走廊/過(guò)道、豬欄地面、豬欄欄桿、料槽、水槽、水嘴、風(fēng)機(jī)、水簾、墻壁、生產(chǎn)工具、走廊溫控器、糞溝、趕豬道/豬道等）；S區(qū)即豬區(qū)，是指豬群活動(dòng)區(qū)域（包括趕豬道/人

道、道路、場(chǎng)內(nèi)卡/鏟車、豬只處死點(diǎn)、場(chǎng)內(nèi)掩埋點(diǎn)、出豬臺(tái)、藥房倉(cāng)庫(kù)、飼料塔、下料口紗布、飼料堆放點(diǎn)、水源、工作人員、辦公室、停車場(chǎng)、 物品消毒間等）；P區(qū)即公區(qū)，是指豬場(chǎng)的公共活動(dòng)區(qū)域（包括門衛(wèi)、庫(kù)房、員工生活區(qū)等等）。通過(guò)對(duì)HSP目標(biāo)位點(diǎn)的定期監(jiān)測(cè)，做出非洲豬瘟風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)評(píng)估，結(jié)合豬群感染情況，指導(dǎo)防控實(shí)踐。

全面徹底的消毒工作是清除環(huán)境中非洲豬瘟病毒不可或缺的環(huán)節(jié)。在豬場(chǎng)“拔牙”工作中，因?yàn)椴荒芗皶r(shí)發(fā)現(xiàn)病毒并且溯源，大部分豬場(chǎng)的消殺工作是盲目甚至自慰性的。盲目消毒造成大量藥物浪費(fèi)，自慰性消毒完全無(wú)效。HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)法是幫助豬場(chǎng)尋根溯源、經(jīng)濟(jì)高效消殺的實(shí)用工具。

2 HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)法采樣標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）

2.1 調(diào)研基本面

調(diào)研內(nèi)容包括豬場(chǎng)名稱、地址、規(guī)模、飼養(yǎng)模式、負(fù)責(zé)人姓名和電話；周邊環(huán)境有無(wú)高風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)（如：豬場(chǎng)、屠宰廠、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、居民區(qū)），交通情況；豬場(chǎng)是否發(fā)生過(guò)非洲豬瘟，以及當(dāng)前豬群健康是否穩(wěn)定；當(dāng)前豬場(chǎng)生物安全管理以及豬群健康管理措施等。

2.2 繪制布局圖

可以調(diào)衛(wèi)星圖或手繪豬場(chǎng)平面圖，并標(biāo)注各區(qū)間名稱。

2.3 確定采樣流程

根據(jù)由凈區(qū)至臟區(qū)的原則進(jìn)行安全采樣，并在布局圖上標(biāo)記好采樣區(qū)域的順序。

2.4 準(zhǔn)備工具耗材

需要準(zhǔn)備的耗材包括：隔離耗材（擋豬板、連體雨衣或防護(hù)服、一次性手套、耐酸堿雨靴）；采樣耗材（采樣自封袋、無(wú)菌紗布、生理鹽水）；消毒耗材（消毒桶、消毒液）；送樣耗材（油性記號(hào)筆、泡沫箱、冰袋）。在每個(gè)采樣袋中放入采樣紗布1塊并注入30 mL生理鹽水，在采樣袋外進(jìn)行編號(hào)，如人區(qū)育肥1棟標(biāo)識(shí)為H-YF-01，并依據(jù)采樣流程擺放整齊。

2.5 實(shí)施采樣

采樣由2人操作配合完成，1人負(fù)責(zé)采樣，1人負(fù)責(zé)消毒與監(jiān)督。采樣點(diǎn)的設(shè)置原則：人員手腳頻繁接觸和站立的位置，豬嘴頻繁接觸的位置（如：H區(qū)和P區(qū)的門窗把手，控制開(kāi)關(guān)，料車，餐桌廚具，床沿床頭，門檻，觀察豬群行為的站立點(diǎn)；S區(qū)的水嘴，料槽，漏糞板等）。

2.6 快遞樣本

將采集的環(huán)境樣品放入密封性完好的封口袋中保存。在樣品袋外標(biāo)記樣品名、樣品編號(hào)、采集日期等。盡快送往具有檢測(cè)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。

3 HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)評(píng)估

根據(jù)HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)法監(jiān)測(cè)結(jié)果，可將豬場(chǎng)分為低風(fēng)險(xiǎn)、中風(fēng)險(xiǎn)、高風(fēng)險(xiǎn)和極高風(fēng)險(xiǎn)4個(gè)級(jí)別（見(jiàn)圖1）。不同生物安全風(fēng)險(xiǎn)水平的豬場(chǎng)，防控非洲豬瘟措施大不相同。HSP環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果結(jié)合豬群臨床表現(xiàn)以及豬場(chǎng)人員物資流動(dòng)情況綜合分析，有助于病毒溯源以及清除傳染源。依據(jù)豬場(chǎng)生物安全風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別科學(xué)制訂“拔牙”消殺方案，降低風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別到三陰水平，經(jīng)過(guò)1個(gè)月4輪環(huán)境監(jiān)測(cè)，確定生物安全風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別回歸低風(fēng)險(xiǎn)狀態(tài)后，恢復(fù)正常的生物安全措施。

圖1 豬場(chǎng)風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)分類表

R1風(fēng)險(xiǎn)1級(jí)為低風(fēng)險(xiǎn)水平，狀態(tài)2P區(qū)陽(yáng)性提示：有病毒被攜帶進(jìn)入公共區(qū)域，但尚未向豬場(chǎng)內(nèi)部縱深傳播，需溯源并加強(qiáng)公共區(qū)域消殺。

R2風(fēng)險(xiǎn)2級(jí)為中風(fēng)險(xiǎn)水平，狀態(tài)3提示：有未知來(lái)源病毒隨人流、物流傳播，尚未造成感染或已感染尚未排毒，需加強(qiáng)H區(qū)消殺和豬群行為觀察，對(duì)S區(qū)進(jìn)行1～2次/周的帶豬消毒。狀態(tài)4提示：有病毒從公共區(qū)域入侵且隨人流、物流傳播，尚未造成感染或已感染尚未排毒，需加強(qiáng)H區(qū)消殺和豬群行為觀察，對(duì)S區(qū)進(jìn)行1～2次/周的帶豬消毒。

R3風(fēng)險(xiǎn)3級(jí)為高風(fēng)險(xiǎn)水平，狀態(tài)5提示：有未知來(lái)源病毒造成感染并且開(kāi)始排毒，需尋根溯源，科學(xué)淘汰，加強(qiáng)H、S區(qū)消殺和豬群行為觀察。狀態(tài)6提示：有病毒從公共區(qū)域入侵造成感染排毒，未知來(lái)源病毒造成感染并且開(kāi)始排毒，需尋根溯源，科學(xué)“拔牙”，加強(qiáng)H、S區(qū)消殺和豬群行為觀察。

R4風(fēng)險(xiǎn)4級(jí)為極高風(fēng)險(xiǎn)水平，狀態(tài)7提示：有未知來(lái)源病毒造成感染且開(kāi)始排毒，同時(shí)病毒隨人流、物流傳播，需尋根溯源，酌情消殺“拔牙”或清場(chǎng)。狀態(tài)8提示：有病毒從公共區(qū)域入侵造成感染且開(kāi)始排毒，同時(shí)病毒隨人流、物流傳播，需尋根溯源，酌情消殺“拔牙”或清場(chǎng)。

4 HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)需警惕的傳播風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)

4.1 蟲(chóng)媒傳播

很多規(guī)模豬場(chǎng)“拔牙”失敗后，查不出失敗原因，因?yàn)樗坪跛屑?xì)節(jié)都做好了。這類豬場(chǎng)HSP環(huán)境關(guān)鍵點(diǎn)監(jiān)測(cè)結(jié)果多為單棟人區(qū)陰性、多圈豬區(qū)陽(yáng)性。復(fù)盤這類豬場(chǎng)的感染過(guò)程，大多有三大現(xiàn)象：發(fā)病由單點(diǎn)開(kāi)始，傳播跨圈不跨棟，豬群體表寄生蟲(chóng)感染嚴(yán)重。綜合HSP監(jiān)測(cè)結(jié)果和非洲豬瘟感染過(guò)程不難判斷，“拔牙”失敗極有可能是因?yàn)轶w表寄生蟲(chóng)遷徙造成病毒傳播。這種傳播在潛伏期都有可能發(fā)生。蜱、虱、蚤、螨四大體表寄生蟲(chóng)中，蜱蟲(chóng)是病毒的天然宿主，晝伏夜出，吸血傳播；虱子高熱敏感，由發(fā)熱病豬往健康豬遷徙，精準(zhǔn)傳播；跳蚤頻繁換宿主，物理攜帶傳播；疥螨吸食帶毒淋巴液后遷徙，造成潛伏期傳播。蜱、虱、蚤、螨這四大寄生蟲(chóng)成為了潛伏期病毒傳播的“播種機(jī)”，危險(xiǎn)系數(shù)非常大，豬友們需要嚴(yán)加防范。

4.2 非洲豬瘟水體傳播風(fēng)險(xiǎn)

物理隔離和環(huán)境消毒做得一絲不茍，非洲豬瘟防控仍然失敗的豬場(chǎng)比比皆是。是什么原因?qū)е率∧?？水體傳播是主要的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)之一。由于非洲豬瘟病毒在水體中存活時(shí)間長(zhǎng)，感染能力強(qiáng)，且極其隱蔽，一旦感染往往是多點(diǎn)感染，“拔牙”成功概率極低。是否是因?yàn)樗w傳播導(dǎo)致感染，可以綜合非洲豬瘟感染過(guò)程和HSP監(jiān)測(cè)結(jié)果做出判斷。水體傳播感染過(guò)程的特點(diǎn)：跨圈、跨棟多點(diǎn)同時(shí)散發(fā)，距離水源由近及遠(yuǎn)傳播；HSP監(jiān)測(cè)結(jié)果往往呈現(xiàn)多棟、多圈同時(shí)出現(xiàn)S豬區(qū)陽(yáng)性。因此，水體傳播非洲豬瘟的危險(xiǎn)系數(shù)非常大，豬友們一定要嚴(yán)加防范。