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        NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果細(xì)胞壁代謝的影響

        2022-04-26 10:37:08劉彩紅古麗丹塔勒達(dá)吾劉鳳蘭馮作山
        食品工業(yè)科技 2022年9期

        王 雪,李 乾,劉彩紅,古麗丹·塔勒達(dá)吾,劉鳳蘭,馮作山,王 靜,

        (1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院,新疆果品采后科學(xué)與技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆 烏魯木齊 830052;2.新疆林業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)林研究所,新疆 烏魯木齊 830063)

        枸杞(Lycium barbarumL.)屬于茄科(Solanaceae)枸杞屬(Lycium Linn.),是多年生雙子葉落葉灌木[1?2]。目前,我國(guó)是全球枸杞產(chǎn)品生產(chǎn)和消費(fèi)的最主要地區(qū)[3]。枸杞含有多種活性物質(zhì),具有降血糖、抗衰老、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)細(xì)胞等作用,是藥食兩用的進(jìn)補(bǔ)佳品[4?5]。但是由于采后的枸杞仍然進(jìn)行著正常的以呼吸為主導(dǎo)的新陳代謝活動(dòng),在果實(shí)成熟至衰老的生命歷程中呼吸速率不斷變化并出現(xiàn)呼吸高峰[6],因此采后枸杞的貯藏品質(zhì)、抗病性等受到不同程度的影響[7]。有研究稱采后枸杞鮮果常溫下放置2~3 d便開(kāi)始出現(xiàn)衰老軟化現(xiàn)象,導(dǎo)致果實(shí)品質(zhì)降低[8]。因此找到一個(gè)經(jīng)濟(jì)有效的延長(zhǎng)枸杞鮮果貯藏期,提高貯藏品質(zhì)的保鮮方法顯得尤為重要。

        目前關(guān)于枸杞鮮果保鮮的研究報(bào)道主要集中于水楊酸處理[9]、水楊酸結(jié)合氣調(diào)處理[10]、殼聚糖涂膜處理[11?13]及保鮮膜處理[14]等,但采用NO熏蒸枸杞鮮果保鮮的研究報(bào)道尚不多見(jiàn)。NO是一種小分子氣體,適宜濃度的NO具有延緩果蔬組織成熟衰老、減輕冷害癥狀和控制采后病害等作用,近年來(lái)已廣泛應(yīng)用于芒果、李、甜瓜、蓮霧、桃、草莓等果蔬保鮮中。有研究報(bào)道,NO處理采后果蔬能較好地維持其硬度,保持果蔬較好的貯藏品質(zhì)[15?17]。另有研究顯示,NO熏蒸處理有效維持甜瓜果實(shí)采后硬度、減緩可溶性果膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)的上升,降低多聚半乳糖醛酸酶、果膠甲酯酶、纖維素酶的活力[18]。NO處理延緩貯藏過(guò)程中的采后枇杷[19]、蓮霧[20]、草莓[21]和番木瓜[22]細(xì)胞壁解聚進(jìn)程,抑制果實(shí)細(xì)胞壁代謝相關(guān)酶活力,減慢原果膠和半纖維素分解速率,對(duì)保持果實(shí)的品質(zhì)產(chǎn)生積極作用。但NO熏蒸枸杞鮮果對(duì)細(xì)胞壁代謝影響的研究尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。

        因此本試驗(yàn)選用產(chǎn)自新疆博樂(lè)市的“寧杞七號(hào)”枸杞鮮果為試材,采用300 μL/L的外源NO氣體熏蒸枸杞,探究經(jīng)NO熏蒸枸杞鮮果軟化與細(xì)胞壁的關(guān)系,以期為外源NO熏蒸在抑制枸杞鮮果軟化方面的應(yīng)用提供理論參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        “寧杞七號(hào)”枸杞 2019年7月3日采摘自新疆博樂(lè)市精河縣托里鄉(xiāng),帶果柄和萼片采摘,在當(dāng)?shù)?±0.5 ℃冷庫(kù)中預(yù)冷24 h,裝框運(yùn)送至新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)3±0.5 ℃冷庫(kù),挑選無(wú)腐爛、發(fā)霉及遭受機(jī)械損傷的枸杞鮮果16 kg作為試驗(yàn)原料(處理和對(duì)照各8 kg);3,5-二硝基水楊酸 上海科峰實(shí)驗(yàn)有限公司;結(jié)晶酚

        天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;亞硫酸鈉、p-硝基苯酚 天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;羧甲基纖維素鈉 天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;一水合檸檬酸、二水合檸檬酸鈉 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;水楊苷 上海素培生物科技中心;碳酸鈉 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限公司;p-硝基苯-β-吡喃半乳糖苷 索萊寶公司;咔唑 上?;瘜W(xué)試劑有限公司;無(wú)水乙醇 天津市鑫鉑特化工有限公司;所有試劑均為分析純。

        D3024R冷凍離心機(jī) 上海珂淮儀器有限公司;PTT-A+200電子天平 福州華志科學(xué)儀器有限公司;DZKW-S-4電熱恒溫水浴鍋、FL-1可調(diào)式封閉電爐 北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司;752 N紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海儀電分析儀器有限公司;TA.XT Plus質(zhì)構(gòu)儀 英國(guó)SMS公司。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 枸杞鮮果的處理方法 樣品處理前一晚使用酒精對(duì)熏蒸罐進(jìn)行密閉消毒12 h,并于熏蒸前4 h打開(kāi)熏蒸罐散去酒精氣味。待酒精氣味散去之后進(jìn)行抽真空處理,在體積為26 L的熏蒸罐內(nèi)注入NO純度為99.9%的標(biāo)準(zhǔn)氣體,使用300 μL/L NO室溫熏蒸3 h,每罐處理枸杞鮮果2 kg。處理后的枸杞使用帶孔塑料筐盛裝,每框約2 kg(不超過(guò)塑料筐的三分之一),并在上方覆蓋報(bào)紙,立即放置3 ℃低溫冷庫(kù)進(jìn)行貯藏,每6 d取樣一次,共取7次樣。

        1.2.2 腐爛率的測(cè)定 采用觀察法,當(dāng)果實(shí)表面發(fā)生腐爛或有肉眼可見(jiàn)的腐爛菌斑即視為腐爛果。隨機(jī)取100枚枸杞鮮果,數(shù)出所有發(fā)霉腐爛果實(shí)個(gè)數(shù),計(jì)算腐爛率。

        1.2.3 硬度的測(cè)定 隨機(jī)取50枚果實(shí),使用TA.XT plus質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定枸杞硬度。測(cè)試方法:去果實(shí)赤道部相對(duì)兩面的皮,全質(zhì)構(gòu)分析TPA;探頭:P/36 R柱形探頭;測(cè)試目標(biāo)模式:應(yīng)變;壓縮程度:70%;測(cè)前速:2 mm/s;測(cè)中速:1 mm/s;測(cè)后速:1 mm/s;單位:N。

        1.2.4 果膠物質(zhì)含量的測(cè)定 采用咔唑比色法[23]測(cè)定果膠物質(zhì)含量,內(nèi)容稍作改動(dòng)。將20 g枸杞鮮果打漿,從中稱取1 g直接倒入10 mL離心管中,添加95%乙醇約至離心管8 mL處,將其放于沸水浴中加熱1 h,同時(shí)在加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)加95%乙醇。取出冷卻至室溫,于25 ℃、8000 r/min條件下離心30 min,留沉淀,加95%乙醇約離心管8 mL處,以上步驟重復(fù)4次。然后將沉淀放入原試管中,加入20 mL蒸餾水,在50 ℃水浴中保溫30 min,以溶解果膠。取出冷卻至室溫后,將上清液移入100 mL容量瓶中,用少量水洗滌沉淀,離心后,一并將上清液移入到容量瓶中,加蒸餾水至刻度,此溶液即為可溶性果膠。

        經(jīng)蒸餾水洗滌后的沉淀物,仍保留在原刻度離心管中,再向離心管中加入0.5 mol/L硫酸溶液5 mL,沸水浴中加熱1 h以水解原果膠。取出冷卻至室溫后,25 ℃、8000 r/min條件下離心15 min。上清液倒入100 mL容量瓶中,蒸餾水定容,此為原果膠測(cè)定液。

        取25 mL刻度試管,加入1 mL原果膠提取液/1 mL可溶性果膠提取液(稱取10.5 g NaCl,用50 mmol/L、pH5.5乙酸-乙酸鈉緩沖溶液溶解,稀釋至100 mL,搖勻)和6 mL濃硫酸,沸水浴20 min,冷卻至室溫,加入0.2 mL咔唑乙醇溶液(1.5 g/L)(稱取0.15 g咔唑加入無(wú)水乙醇溶解并稀釋至100 mL),暗處反應(yīng)30 min,于530 nm處測(cè)定反應(yīng)液吸光度值。

        式中,m′—從標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.0028X-0.0009)查得的半乳糖醛酸質(zhì)量,μg;V—樣品提取液總體積,mL;Vs—測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積,mL;m—樣品質(zhì)量,g。

        1.2.5 多聚半乳糖醛酸酶活力的測(cè)定 采用比色法[23]測(cè)定多聚半乳糖醛酸酶(PG)活力,內(nèi)容稍作改動(dòng)。將20 g枸杞鮮果打漿,從中稱取10 g與95%的預(yù)冷乙醇一起加入離心管中,搖勻,低溫靜置。10 min后離心20 min(12000 r/min、4 ℃),留沉淀,加入80%預(yù)冷的乙醇,重復(fù)上述操作。留沉淀加入8 mL提取緩沖液,4 ℃條件下靜置20 min,離心,上清液為PG提取液。

        剩余步驟嚴(yán)格按照曹建康PG活力測(cè)定進(jìn)行。

        式中,m′—從標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.5075X+0.0046)查得的葡萄糖質(zhì)量,mg;V—樣品提取液總體積,mL;Vs—測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積,mL;t—酶促反應(yīng)時(shí)間,h;m—樣品質(zhì)量,g;1.08—葡萄糖換算成半乳糖醛酸的系數(shù)(194/180)。

        1.2.6β-半乳糖苷酶活力的測(cè)定 采用曹建康等[23]的測(cè)定方法測(cè)定β-半乳糖苷酶(β-Gal)活力。取0.5 mL p-硝基苯-β-吡喃半乳糖苷溶液(5 mmol/L)和0.5 mL酶提取液于試管中,在37 ℃水浴中保溫30 min。取出后立即向試管中加入2 mL碳酸鈉溶液(1 mol/L)以終止酶促反應(yīng),充分搖勻冷卻,于波長(zhǎng)400nm處測(cè)定混合液的吸光值。

        式中,m′—從標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.18X+0.0114)查得的p-硝基苯酚物質(zhì)的量,μmol;V—樣品提取液總體積,mL;Vs—測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積,mL;t—酶促反應(yīng)時(shí)間,h;m—樣品質(zhì)量,g。

        1.2.7 纖維素酶活力的測(cè)定 采用曹建康等[23]的測(cè)定方法測(cè)定纖維素酶(Cx)活力。兩支25 mL試管中均加入1.5 mL羧甲基纖維素鈉溶液(10 g/L)和0.5 mL酶提取液,但其中一支試管中的酶提取液須經(jīng)過(guò)沸水煮5 min處理。恒溫水?。?7 ℃)1 h后直接加入3,5-二硝基水楊酸1.5 mL,沸水煮5 min,冷水中快速冷卻至室溫,加蒸餾水至25 mL處。540 nm處測(cè)定前充分搖勻。

        式中,m′—從標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.5075X+0.0046)查得的葡萄糖質(zhì)量,mg;V—樣品提取液總體積,mL;Vs—測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積,mL;t—酶促反應(yīng)時(shí)間,h;m—樣品質(zhì)量,g。

        1.2.8β-葡萄糖苷酶活力的測(cè)定 采用水楊苷水解法[23]測(cè)定β-葡萄糖苷酶(β-Glu)活力,內(nèi)容稍作改動(dòng)。將20 g枸杞鮮果打漿,從中稱取10 g與95%的預(yù)冷乙醇一起加入離心管中,充分搖勻,低溫放置10 min,然后在4 ℃、12000 r/min條件下離心20 min。留沉淀,加入10 mL提前預(yù)冷的80%乙醇,振蕩,低溫放置10 min,4 ℃、12000 r/min條件下離心20 min。留沉淀,加入5 mL提前預(yù)冷的緩沖液,低溫放置20 min,同等條件下離心20 min,收集上清液,4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        取1.5 mL水楊苷溶液(10 g/L)和0.5 mL酶提取液于25 mL具塞刻度試管中,在37 ℃水浴中保溫1 h。取出后,立即向試管中加人1.5 mL DNS試劑以終止酶促反應(yīng),充分搖勻。然后在沸水浴中煮沸5 min,取出冷卻后,用蒸餾水稀釋至25 mL,充分混勻,在波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定。

        式中,m′—從標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.5075X+0.0046)查得的葡萄糖質(zhì)量,mg;V—樣品提取液總體積,mL;Vs—測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積,mL;t—酶促反應(yīng)時(shí)間,h;m—樣品質(zhì)量,g。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        以上試驗(yàn)均設(shè)定3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)由Excel 2010進(jìn)行整理,SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P<0.05、P<0.01分別表示差異顯著、極顯著,并用Origin 2018進(jìn)行作圖。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果腐爛率的影響

        如圖1所示,在貯藏期間,果實(shí)的腐爛率呈上升趨勢(shì),對(duì)照組和處理組果實(shí)分別在第12 d 和24 d開(kāi)始出現(xiàn)明顯腐爛,且NO處理組的腐爛率極顯著(P<0.01)低于對(duì)照組,貯藏第36 d時(shí)對(duì)照組和NO處理組腐爛率分別為84.0%和38.0%,對(duì)照組腐爛率是NO處理組的2.21倍。說(shuō)明NO熏蒸可以延緩果實(shí)腐爛的發(fā)生,后期可以抑制腐爛率的上升。

        圖1 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果腐爛率的影響Fig.1 Effect of NO fumigation on rotting rate of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.2 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果硬度的影響

        枸杞果實(shí)硬度下降通常表現(xiàn)為口感發(fā)粘,果實(shí)從堅(jiān)挺狀態(tài)變?yōu)樗缮顟B(tài),導(dǎo)致軟化。軟化程度較高必然引起微生物侵染,造成腐爛。由圖2可知,貯藏0~6 d,兩組的枸杞硬度均呈現(xiàn)急速下降趨勢(shì),其中對(duì)照組果實(shí)硬度下降速度較快;貯藏6~36 d,對(duì)照組果實(shí)硬度快速下降,NO處理組呈現(xiàn)小幅度波動(dòng)且在第36 d極顯著(P<0.01)上升,究其原因可能是因?yàn)槔w維素對(duì)細(xì)胞壁骨架起到了重要的支撐作用,延緩了果實(shí)軟化;但自貯藏開(kāi)始至結(jié)束,NO處理組硬度一直高于對(duì)照組枸杞,處理組和對(duì)照組枸杞硬度較起始點(diǎn)分別下降0.3 N和5.2 N,同時(shí)處理組的腐爛率極顯著(P<0.01)低于對(duì)照組,該結(jié)論與郭芹等[24]研究結(jié)果相似。說(shuō)明NO熏蒸可以顯著抑制貯藏期間枸杞鮮果硬度下降,降低腐爛。

        圖2 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果硬度的影響Fig.2 Effect of NO fumigation on firmness of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3 NO處理對(duì)冷藏枸杞鮮果細(xì)胞壁代謝的影響

        2.3.1 果膠物質(zhì)含量

        2.3.1.1 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果原果膠含量的影響 果膠類(lèi)物質(zhì)存在于胞間,起粘合聯(lián)結(jié)作用,果實(shí)成熟軟化時(shí)發(fā)生明顯變化,其結(jié)構(gòu)改變也是導(dǎo)致果實(shí)硬度發(fā)生變化的主要原因[25?27],原果膠為非水溶性物質(zhì),含量越高,果實(shí)越堅(jiān)挺。由圖3可知,在整個(gè)貯藏過(guò)程中,對(duì)照組枸杞原果膠含量大致呈先上升后下降趨勢(shì),貯藏36 d原果膠含量較第0 d低8.99%;與對(duì)照組相比,NO處理組枸杞原果膠含量變化幅度較小,且處理組枸杞原果膠含量始終高于對(duì)照組;貯藏第6 d,處理組枸杞原果膠含量達(dá)到最高值;6~12 d,原果膠含量有所下降;12~36 d,原果膠含量基本沒(méi)有變化;貯藏第36 d原果膠含量?jī)H僅比貯藏第12 d低8.77%,較貯藏第0 d高18.77%。由此說(shuō)明,NO熏蒸可有效保持冷藏枸杞鮮果原果膠含量,防止果實(shí)軟化。

        圖3 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果原果膠含量的影響Fig.3 Effect of NO fumigation on the content of protopectin of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3.1.2 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果可溶性果膠含量的影響 細(xì)胞壁中可溶性果膠為水溶性物質(zhì),其含量上升是果實(shí)軟化的主要原因之一[28]。由圖4可知,整個(gè)貯藏過(guò)程中對(duì)照組枸杞中可溶性果膠含量一直高于處理組;在貯藏第36 d效果極顯著(P<0.01),且處理組枸杞可溶性果膠含量比對(duì)照組低51.3%,究其原因可能是NO氣體熏蒸可抑制枸杞果實(shí)細(xì)胞壁中原果膠的降解,延緩可溶性果膠的生成,從而維持果實(shí)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)完整性,延緩果實(shí)硬度下降速度,這與NO抑制木瓜軟化結(jié)論相似[22]。由此說(shuō)明,NO熏蒸可以抑制枸杞中可溶性果膠含量上升速率,維持枸杞鮮果貯藏過(guò)程中的質(zhì)地。

        圖4 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果可溶性果膠含量的影響Fig.4 Effect of NO fumigation on soluble pectin content of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3.2 細(xì)胞壁代謝相關(guān)酶

        2.3.2.1 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果多聚半乳糖醛酸酶(PG)活力的影響 果膠類(lèi)物質(zhì)中的原果膠向可溶性果膠的轉(zhuǎn)化速度與果膠酶類(lèi)活性密不可分。由圖5可知,貯藏0~36 d,兩組枸杞鮮果PG活力均大致呈下降趨勢(shì),且處理組枸杞PG活力始終低于對(duì)照組。貯藏0~12 d,對(duì)照組與處理組鮮果PG活力迅速下降,第12 d時(shí)分別比貯藏第0 d時(shí)低43.37%和45.80%。自12 d至貯藏結(jié)束,兩組枸杞鮮果均在貯藏第18 d和30 d出現(xiàn)酶活力高峰,且對(duì)照組分別高于處理組8.2%(P>0.05)和26.94%(P<0.01)。貯藏第30 d,兩組枸杞均出現(xiàn)酶活力高峰,其中對(duì)照組PG活力極顯著高于處理組(P<0.01),同期對(duì)照組原果膠含量出現(xiàn)較低值,并極顯著低于處理組(P<0.01)(圖3);說(shuō)明NO處理可能通過(guò)降低果實(shí)PG基因的表達(dá)[29],抑制冷藏枸杞鮮果PG活力上升,緩解果實(shí)中原果膠向可溶性果膠的轉(zhuǎn)化速率,降低腐爛。

        圖5 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果PG活力的影響Fig.5 Effect of NO fumigation on PG activity of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3.2.2 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果β-半乳糖苷酶(β-Gal)活力的影響β-Gal可以使果膠降解或溶解,由圖6可知,在整個(gè)貯藏過(guò)程中,兩組枸杞鮮果的β-Gal活力大致呈下降趨勢(shì),且處理組β-Gal活力始終低于對(duì)照組。貯藏18~36 d,處理組枸杞鮮果β-Gal活力低于對(duì)照組,且后期表現(xiàn)更加明顯。貯藏結(jié)束時(shí),處理組β-Gal活力極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),該現(xiàn)象與果實(shí)原果膠和可溶性果膠變化趨勢(shì)相對(duì)應(yīng)(圖3~圖4)。表明NO熏蒸降低了β-Gal活力,抑制原果膠物質(zhì)的轉(zhuǎn)化速度,緩解細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,對(duì)降低腐爛有一定的作用。

        圖6 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果β-Gal活力的影響Fig.6 Effect of NO fumigation on the activity of β-gal of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3.2.3 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果纖維素酶(Cx)活力的影響 果蔬采后硬度下降導(dǎo)致軟化現(xiàn)象主要與其品種、呼吸強(qiáng)度、細(xì)胞壁代謝、糖代謝等多種因素相關(guān)[29?33]。有研究報(bào)道,細(xì)胞壁總體結(jié)構(gòu)的改變是果實(shí)軟化的重要原因之一[34]。細(xì)胞壁是一種“纖維素-半纖維素-果膠”組成的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)[22]。纖維素對(duì)細(xì)胞壁骨架起到了重要地支撐作用,纖維素結(jié)構(gòu)變化導(dǎo)致植物細(xì)胞壁變薄,硬度下降,果實(shí)軟化[35?37]。Cx可降解細(xì)胞壁中的纖維素,破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)。由圖7可知,對(duì)照組與處理組枸杞Cx活力變化趨勢(shì)基本一致,呈現(xiàn)“降-升-降-升”的趨勢(shì)。其中貯藏12~36 d處理組Cx顯著低于對(duì)照組(除24 d之外)。兩組枸杞Cx酶活力均在第18 d達(dá)到高峰,且對(duì)照組酶活力顯著高于處理組(P<0.05);貯藏18~36 d,兩組鮮果酶活力先快速下降又迅速升高,在貯藏末期(30~36 d)對(duì)照組枸杞Cx活力極顯著高于處理組(P<0.01),與朱樹(shù)華使用NO處理草莓結(jié)果相似[38],可能是因?yàn)镹O通過(guò)影響Cx的pH,從而引起Cx構(gòu)象和和生理功能發(fā)生改變[39]。由此說(shuō)明,NO熏蒸對(duì)于抑制冷藏枸杞鮮果Cx活力上升具有一定效果。

        圖7 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果Cx活力的影響Fig.7 Effect of NO fumigation on Cx activity of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        2.3.2.4 NO熏蒸處理對(duì)冷藏枸杞鮮果β-葡萄糖苷酶(β-Glu)活力的影響β-Glu屬于纖維素酶類(lèi),對(duì)果實(shí)細(xì)胞壁的降解與穩(wěn)定產(chǎn)生重要影響[23?24]。Cx和β-Glu參與細(xì)胞壁中纖維素糖化,最終將纖維素水解成葡萄糖,細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)瓦解,果實(shí)軟化,腐爛發(fā)生。由圖8可知,對(duì)照組枸杞鮮果呈先上升后下降的趨勢(shì),其中在藏第30 d出現(xiàn)活力高峰。相較于對(duì)照組,處理組酶β-Glu活力上升趨勢(shì)更緩慢,且在第12、18和30 d顯著低于對(duì)照(P<0.05)。說(shuō)明,NO熏蒸在不同貯藏時(shí)期抑制β-Glu活力的上升作用表現(xiàn)不同。

        圖8 NO熏蒸對(duì)冷藏枸杞鮮果β-Glu活力的影響Fig.8 Effect of NO fumigation on the activity of β-Glu of postharvest of Lycium barbarum fruit during cold storage

        3 結(jié)論

        本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,在3±0.5 ℃的貯藏條件下,外源NO熏蒸處理可通過(guò)抑制枸杞鮮果PG、β-Glu、β-Gal和Cx活力,維持較高的原果膠含量,保持果實(shí)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)完整性,顯著(P<0.05)延緩了硬度的下降,抑制果實(shí)腐爛率的上升。說(shuō)明NO熏蒸在抑制果實(shí)細(xì)胞壁代謝相關(guān)酶活力,保持果實(shí)品質(zhì),延緩果實(shí)成熟軟化方面發(fā)揮著重要的作用。本研究結(jié)果將為外源NO熏蒸在枸杞鮮果保鮮方面的應(yīng)用提供理論參考。

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