徐朝輝，鄒 苑，陳 瑛，梁 彪，趙 卿

（1.上海中醫(yī)藥大學，上海 201203；2.上海市養(yǎng)志康復醫(yī)院（上海市陽光康復中心），同濟大學附屬養(yǎng)志康復醫(yī)院，上海 201619）

帕金森?。≒arkinson’s disease，PD）是一種常見的中老年神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，臨床上以運動遲緩、靜止性震顫、肌強直、姿勢平衡障礙等運動癥狀以及睡眠障礙、嗅覺障礙、自主神經(jīng)功能障礙、認知和精神障礙等非運動癥狀為顯著特征[1]。PD主要病理特征為黑質(zhì)中多巴胺能神經(jīng)元的丟失和由α-突觸核蛋白（α-Synuclein，α-Syn）組成的路易小體的存在，但發(fā)病機制尚未完全明確。目前我國65歲以上人群中PD發(fā)病率為1.7%，且隨著老齡化程度加劇，據(jù)推測我國PD患病人數(shù)到2030年將達到500萬人，約占到全球PD患病人數(shù)的一半[2]。目前PD的藥物治療多以左旋多巴制劑為主，雖然能夠在一定程度上改善癥狀，但長期使用存在藥效減退、劑末現(xiàn)象、異動癥等運動并發(fā)癥，且無法從根本上阻止疾病進展。

肉蓯蓉，俗稱大蕓，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列屬上品，味甘、咸，性溫，歸腎、大腸經(jīng)，中醫(yī)認為其具有補腎陽，益精血，潤腸通便之效。研究表明，肉蓯蓉具有抗凋亡、抗氧化、抗衰老、抗腦缺血再灌注損傷等神經(jīng)保護作用[3]，其化學成分有苯苷類、環(huán)烯醚萜及其苷類、木脂素及其苷類、多糖以及單萜苷類、生物堿等，其中又以苯乙醇苷類和多糖為主[4]，藥理學研究發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉在PD及阿爾茲海默病等神經(jīng)退行性疾病中發(fā)揮的作用顯著[5?6]。據(jù)統(tǒng)計，肉蓯蓉在抗衰老延年類古方中的出現(xiàn)率僅次于人參[7]。目前，肉蓯蓉常被應(yīng)用于PD的臨床治療，但其發(fā)揮療效的具體機制并不明確，本文主要從網(wǎng)絡(luò)藥理學和分子對接的角度，利用相關(guān)數(shù)據(jù)庫篩選肉蓯蓉的主要活性化合物，并將其作用靶點與PD靶點比對，得出關(guān)鍵作用靶點，探析其治療PD的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機制，以期為深入研究提供指導。

1 資料與方法

1.1 有效化合物

本研究使用中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform TCMSP，http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php）檢索肉蓯蓉成分，口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%，類藥性（drug-likeness，DL）≥0.18[8]為閾值，因血腦屏障功能障礙與PD病程有關(guān)[9]，故設(shè)定血腦屏障通透性（blood brain barrier，BBB）≥?0.85，通過以上限定條件篩選肉蓯蓉中的活性成分作為有效化合物。

1.2 查詢PD相關(guān)疾病靶點

利用PubChem數(shù)據(jù)庫（www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound/）、sea數(shù)據(jù)庫（http://sea.bkslab.org/）獲得肉蓯蓉所有靶點基因名稱。應(yīng)用GeneCard數(shù)據(jù)庫 （ https://www.genecards.org/） 以 “Parkinson’s disease”為檢索詞獲取PD靶點基因名稱。過比對中藥和疾病靶點，利用VENNY2.1軟件作交集餅圖得到PD與肉蓯蓉共有靶點基因信息。

1.3 靶點蛋白互作（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將1.1及1.2獲得的中藥、疾病共有基因輸入STRING（https://string-db.org/），選擇“Homo sapiens”，將最小相互作用閾值設(shè)為中等“Highest confidence>0.9”，其余設(shè)置為默認值[10]，進行PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。

1.4 基因本體（gene ontology，GO）富集和基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and geomes，KEGG）通路富集

篩選關(guān)鍵靶基因（大于2倍degree），將篩選出的靶基因?qū)隓AVID6.8數(shù)據(jù)庫（https://david.ncifcrf.gov/summary.jsp），限定物種為“Homo Sapiens”，以P<0.05為閾值，選擇其中BP、CC、MF 3對關(guān)鍵靶基因進行GO功能富集分析，篩選具有顯著差異的生物過程及可靠的靶點通路，按照P值從小到大排序，前20個作為重要通路用Omicshare （http://www.omicshare.com/） 制作成可視化氣泡圖。通過KEGG通路富集分析靶點信號通路，以P<0.05為閾值，依據(jù)count值排序，選取前20條信號通路選用Omicshare （ http://www.omicshare.com/） 制作成可視化氣泡圖。

1.5 構(gòu)建“肉蓯蓉-化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)圖

選取前20條KEGG信號通路上的基因作為治療靶基因，將篩選的治療靶基因?qū)?yīng)的化合物和中藥導入到cytoscape軟件中，構(gòu)建“肉蓯蓉-化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6 “活性成分-靶點”分子對接

選取網(wǎng)絡(luò)藥理學篩選出的肉蓯蓉有效化合物與帕金森病的關(guān)鍵靶點，利用AutoDock Vina工具進行分子對接，了解靶點蛋白質(zhì)與活性成分的結(jié)合方式。

2 結(jié)果與分析

2.1 肉蓯蓉有效化合物及靶點基因篩選

使用TCMSP網(wǎng)站篩選出肉蓯蓉中藥共6個有效化合物，分別 為beta-sitosterol（β-谷甾醇）、arachidonate（花生四烯酸）、suchilactone（脫水內(nèi)酯）、Yangambin（丁香樹脂二甲醚）、quercetin（槲皮素）、Marckine（楓馬京）。見表1。根據(jù)有效成分篩選出435個靶點基因名稱。

表1 肉蓯蓉有效成分Table 1 Effective components of Cistanches Herba

2.2 帕金森病靶點基因篩選

檢索GeneCard數(shù)據(jù)庫（https://www.genecards.org/）得到PD相關(guān)基因，共計7846個，如LRRK2、SNCA、PRKN、PARK7、GBA、PINK1、MAPT等。

2.3 肉蓯蓉活性成分治療帕金森病預測靶點的篩選

通過TCMSP收集肉蓯蓉6個活性化合物對應(yīng)靶點，去重得到435個蛋白靶標，與GeneCard數(shù)據(jù)庫去重所得7846個蛋白靶標進行比對取交集，運用VENNY2.1軟件對疾 病靶點與藥物靶點整理后得到308個交集靶點，見圖1。藍色代表PD靶點，黃色代表肉蓯蓉靶點，重疊部分為共同靶點。

圖1 帕金森病-肉蓯蓉靶點交集韋恩圖Fig.1 Wayne diagram of target intersection of Parkinson’s disease-Cistanches Herba

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及關(guān)鍵靶點篩選

將上述篩選出的靶基因?qū)隨TRING（https://string-db.org/）數(shù)據(jù)庫，物種選“Homo sapiens”進行PPI分析，得到肉蓯蓉作用于PD的PPI網(wǎng)絡(luò)圖，見圖2。共得到283個節(jié)點，3509條邊。

圖2 靶點蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖Fig.2 Protein-protein interaction network

2.5 GO功能富集分析

篩選關(guān)鍵靶基因（大于2倍degree），將篩選出的靶基因?qū)隓AVID6.8數(shù)據(jù)庫，限定物種為“Homo Sapiens”，對38個靶基因進行GO富集分析。結(jié)果包括生物過程（biologica process，BP）305條、細胞成分（cellular component，CC）25條、分子功能（molecular function，MF） 69條，按照P值從小到大排序，前20個重要通路用Omicshare作氣泡圖進行可視化分析，如圖3。圖中氣泡越大富集基因個數(shù)越多，氣泡顏色越紅，P值越小，顯著性越高。圖3A中BP包括RNA聚合酶II啟動子的轉(zhuǎn)錄負調(diào)控、以DNA作為模板轉(zhuǎn)錄、細胞增殖、凋亡過程的正調(diào)控、細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導等；圖3B可見CC分析中包括膜筏、神經(jīng)元突觸、細胞膜、細胞核膜、蛋白質(zhì)復合物、線粒體等；圖3C可見MF富集結(jié)果主要為腺嘌呤核苷三磷酸結(jié)合、蛋白異源二聚體活性、蛋白質(zhì)復合物結(jié)合、蛋白質(zhì)酪氨酸激酶活性等。

圖3 GO功能富集分析Fig.3 Gene ontology function enrichment analysis

2.6 KEGG通路分析及構(gòu)建“肉蓯蓉-化合物-靶點“網(wǎng)絡(luò)圖

通過KEGG通路富集分析靶點信號通路，以P<0.05為閾值，依據(jù)count值排序，選取前20條信號通路，其中主要包括PI3K/AKT信號通路、miRNAs調(diào)控、HIF-1、TNF、FOXO信號通路等，依據(jù)結(jié)果繪制氣泡圖，見圖4。圖中氣泡越大富集基因個數(shù)越多，氣泡顏色越紅，P值越小，顯著性越高。選取前20條KEGG信號通路上的基因作為治療靶基因，將91個治療靶基因?qū)?yīng)的化合物和中藥導入到cytoscape軟件中，構(gòu)建中藥-化合物-靶點網(wǎng)絡(luò)圖，見圖5。網(wǎng)絡(luò)中的節(jié)點表示靶標或化合物，而邊則表示活性成分與PD靶標之間的相互作用，顏色越深，degree值越高。

圖4 KEGG信號通路富集分析Fig.4 Enrichment analysis of Kyoto encyclopedia of genes and geomes signal pathway

圖5 “肉蓯蓉-化合物-靶點”網(wǎng)絡(luò)圖Fig.5 Network diagram of “Cistanches Herba-compound-target”

2.7 “活性成分-靶點”分子對接

從中藥-化合物-靶點網(wǎng)絡(luò)中將基因靶點以degree值高低進行排序，選擇前5個關(guān)鍵靶點，分別為絲裂原活化蛋白激酶8（mitogen-activated protein kinase 8，MAPK8）、雌激素受體1（estrogen receptor alpha 1，ESR1）、類固醇受體輔助活化因子（steroid receptor coactivator，SRC）、蛋白酪氨酸激酶2（janus kinase signal transducers 2，JAK2）、絲氨酸/蘇氨酸激酶1（serine/threonine kinases 1，AKT1）。利用Auto-Dock Vina[11]分別與肉蓯蓉的6個活性成分（β-谷甾醇、花生四烯酸、脫水內(nèi)酯、丁香樹脂二甲醚、槲皮素和楓馬京）進行分子對接。結(jié)合能

表2 肉蓯蓉有效活性成分與對應(yīng)核心靶點的分子對接Table 2 Molecular docking of effective active components of Cistanches Herba with corresponding core targets

圖6 分子對接模式圖Fig.6 Molecular docking mode

3 討論

研究表明肉蓯蓉主要成分苯乙醇苷可通過抑制Caspase-3的活性，對抗1-甲基-4-苯基吡啶離子 （1-methyl-4- phylpyridiniumion，MPP+） 導致的多巴胺能神經(jīng)細胞凋亡[13]。研究也發(fā)現(xiàn)松果菊苷作為肉蓯蓉活性成分之一，能抑制PD小鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的減少，且通過GFRa1/AKT信號通路上調(diào)膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell-derived neurotrophic factor，GDNF）表達[14]，通過ROS/ATF3/CHOP通路抑制神經(jīng)細胞凋亡[15]，增加紋狀體多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)含量，改善PD小鼠的行為學異常，表現(xiàn)出良好的神經(jīng)保護和修復作用[16]。但關(guān)于肉蓯蓉其他有效成分在治療PD中的作用機制仍未探究。

本研究通過篩選發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉的有效活性成分一共6種，分別是beta-sitosterol（β-谷甾醇）、arachidonate（花生四烯酸）、suchilactone（脫水內(nèi)酯）、Yangambin（丁香樹脂二甲醚）、quercetin（槲皮素）、Marckine（楓馬京）。研究發(fā)現(xiàn)β-谷甾醇具有抗氧化、抑制細胞凋亡等作用[17]，而氧化應(yīng)激損傷是PD發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一[18]，推測β-谷甾醇可能通過抗氧化應(yīng)激治療PD?；ㄉ南┧峥梢酝ㄟ^激活過氧化物酶增殖體激活受體（peroxisome proliferatorsactivated receptors，PPAR）及促進新蛋白合成來增強神經(jīng)組織內(nèi)部的抗氧化系統(tǒng)，發(fā)揮抗氧化應(yīng)激的作用，保護神經(jīng)元細胞[19]。有研究發(fā)現(xiàn)槲皮素能夠通過抑制AGEs/RAGE/NF-κB炎癥通路，從而降低腦組織炎性因子的生成[20]。而另一項研究發(fā)現(xiàn)中藥提取物可通過抑制晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation end products，AGEs），阻斷晚期糖基化終產(chǎn)物受體（receptor of advanced glycation endproducts，RAGE）表達，從而抑制人神經(jīng)母細胞瘤細胞（human neuroblastoma cells，SH-SY5Y）中 甲 基 乙 二 醛（methylglyoxal，MGO）觸發(fā)的核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）激活和易位，而已知MGO是一種二羰基代謝物，與神經(jīng)退行性疾病的發(fā)展有關(guān)，提示可通過調(diào)節(jié)AGEs/RAGE/NF-κB通路減輕反應(yīng)性二羰基化合物的神經(jīng)毒性[21]。此外，另一項研究發(fā)現(xiàn)具有高氧化還原活性的鐵可催化大腦氧化反應(yīng)，還參與產(chǎn)生高毒性自由基（Fenton反應(yīng)），從而對細胞造成氧化應(yīng)激損傷，最終導致多巴胺能神經(jīng)元死亡，而槲皮素可充當強有力的鐵螯合劑發(fā)揮抗氧化作用，表現(xiàn)出一定的神經(jīng)保護作用[22]。

GO功能富集分析表明肉蓯蓉具有促進ATP合成、保護線粒體呼吸鏈的功能完整的作用，而線粒體功能障礙是引起多巴胺能神經(jīng)元變性、死亡機制之一[23]。肉蓯蓉還可以調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成、折疊、降解等活動，維持“蛋白質(zhì)內(nèi)穩(wěn)態(tài)”。而研究表明蛋白質(zhì)構(gòu)象異?；蜻^度沉積可抑制突觸功能，干擾細胞內(nèi)信號傳導，導致由泛素蛋白酶體系統(tǒng)介導的蛋白質(zhì)降解功能紊亂，最終導致多巴胺能神經(jīng)細胞死亡[24]。

通過KEGG富集得到活性成分與PD靶標之間相互作用的主要信號通路，包括PI3K/AKT信號通路、miRNAs調(diào)控、HIF-1、TNF及FOXO信號通路等，表明肉蓯蓉通過多條通路作用于PD發(fā)病的調(diào)控過程。AKT，又名蛋白激酶B，是一種促進細胞存活的激酶，其存在于磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylin-ositol-3-kinase，PI3K）信號途徑中。PI3K激活后的產(chǎn)物與AKT的PH結(jié)構(gòu)域相結(jié)合，使其Ser473和Thr308位點磷酸化，從而激活AKT。研究發(fā)現(xiàn)PD患者黑質(zhì)致密部（substantia nigra compacta，SNc）中總AKT水平及活性磷酸化AKT水平均顯著降低[25]。林瑤等[26]發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉可使PD大鼠黑質(zhì)紋狀體中PI3K、ATK的表達升高及其下游凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2表達升高、Bax表達降低，提示肉蓯蓉通過激活PI3K/AKT通路，從而升高Bcl-2/Bax比值，減少神經(jīng)細胞凋亡來發(fā)揮神經(jīng)保護作用。糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）活性增高，誘導多巴胺能神經(jīng)元凋亡，而研究發(fā)現(xiàn)載有堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）的脂質(zhì)體通過激活PI3K/AKT通路增加GSK-3β的磷酸化，從而抑制GSK-3β活性保護神經(jīng)元[27]。此外，哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）作為PI3K/AKT下游信號分子，是自噬過程的主要調(diào)節(jié)因子，而α-Syn的聚集是PD發(fā)病機制的核心之一，激活PI3K/ATK/mTOR通路誘發(fā)自噬途徑使聚集的α-Syn降解，從而發(fā)揮治療PD的作用[28]。由此可見肉蓯蓉有效成分可能通過激活PI3K/AKT信號通路促進神經(jīng)細胞存活發(fā)揮治療PD的作用。同樣涉及α-Syn聚集導致PD的發(fā)病機制，Pino等[29]發(fā)現(xiàn)叉形頭轉(zhuǎn)錄因子O亞型（forkhead box O，F(xiàn)OXO）家族重要的自噬調(diào)控因子FOXO3有效地減少可溶性α-Syn含量，且FOXO3控制神經(jīng)元細胞中的自噬流量。由此可以推測，肉蓯蓉有效成分可能通過FOXO信號通路減少α-Syn的積累保護多巴胺神經(jīng)元。

miRNAs作為一簇微小的內(nèi)源性非編碼小RNA分子，能夠通過序列特異性的方式來調(diào)節(jié)靶基因表達，參與調(diào)控多巴胺神經(jīng)元增殖、凋亡及自噬等生物過程[30]。研究發(fā)現(xiàn)α-Syn（其編碼基因為SNCA）的異常表達會誘導多巴胺神經(jīng)元凋亡，而miRNA-7及miRNA-153可降低PD模型中SNCA的表達水平，改善PD癥狀[31]；同時miR-425可以恢復功能失調(diào)的多巴胺能神經(jīng)院并改善PD小鼠行為缺陷[32]。這些也驗證了肉蓯蓉通過調(diào)控miRNA影響PD發(fā)病過程，但具體機制尚需進一步研究。

缺氧誘導因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）是一種對氧敏感的轉(zhuǎn)錄激活因子，由組成型表達的β亞基和低氧誘導型的α亞基構(gòu)成，參與血管生成、鐵代謝、葡萄糖能量代謝和細胞增殖及存活的基因轉(zhuǎn)錄誘導[33]。有研究發(fā)現(xiàn)魚藤酮或MPP+處理的PD模型SH-SY5Y細胞中HIF-1α的蛋白質(zhì)水平降低，鐵鐵螯合劑去鐵胺可引HIF-1α的積累，伴隨著SH-SY5Y細胞中自噬的增強；當HIF-1α基因被抑制時，去鐵胺誘導的自噬也相應(yīng)受到抑制，表明去鐵胺在魚藤酮誘導的PD細胞凋亡中的保護作用可能是通過HIF-1α積累以及HIF-1α介導的自噬誘導[34]。食欲素A（Orexin-A）是下丘腦神經(jīng)元分泌的一種神經(jīng)肽，可在神經(jīng)病變中發(fā)揮保護作用。有研究發(fā)現(xiàn)Orexin-A作用于經(jīng)MPP+處理SH-SY5Y細胞后，不僅誘導HIF-1α的產(chǎn)生，同時激活HIF-1下游靶標如血管內(nèi)皮生長因子，減輕細胞損傷，起到神經(jīng)保護作用[35]?？梢姡馍惾赜行С煞挚赡芡ㄟ^增加HIF-1靶基因的表達激活誘導受損細胞自噬，減輕細胞損傷。

越來越多證據(jù)支持神經(jīng)炎癥反應(yīng)參與PD的發(fā)病機制[36]，而腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）通路作為重要的炎癥反應(yīng)通路，介導激活炎性小體，進而激活小膠質(zhì)細胞，活化的小膠質(zhì)細胞通過增殖和分泌炎癥因子可損傷多巴胺能神經(jīng)元[37]。Liang等[38]用肉蓯蓉提取物松果菊苷處理亞急性PD小鼠模型后發(fā)現(xiàn)，松果菊苷可減少小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞的活化，降低炎癥因子TNF-α水平，上調(diào)GDNF表達，改善PD小鼠行為學癥狀。

通過構(gòu)建中藥-化合物-靶點網(wǎng)絡(luò)圖，根據(jù)degree值高低進行排序，選擇前5個關(guān)鍵靶點，分別為MAPK8、ESR1、SRC、JAK2、AKT1。Liu等[39]發(fā)現(xiàn)中藥提取物可以通過激活絲裂原活化蛋白激酶8（mitogen-activated protein kinase 8，MAPK8），從而促進抗凋亡蛋白Bcl-2 磷酸化，進而清除受損線粒體，間接抑制細胞凋亡，最終通過調(diào)節(jié)自噬、凋亡再平衡而發(fā)揮神經(jīng)保護作用，可能也是肉蓯蓉的作用機制之一。Chakrabarti等[40]發(fā)現(xiàn)雌激素受體（estrogen receptor alpha，ESR）激動劑可通過抑制小膠質(zhì)細胞活性減輕炎癥反應(yīng)發(fā)揮神經(jīng)保護作用；而另一項研究發(fā)現(xiàn)雌激素作用于ESR抑制NADPH氧化酶（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase）活性，減少神經(jīng)炎癥標志物，從而減輕神經(jīng)損傷[41]。由此可以得出肉蓯蓉有效成分可能作用于ESR1靶點減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)治療PD。與ESR相反，類固醇受體輔助活化因子（steroid receptor coactivator，SRC）作為促炎因子會造成PD小鼠多巴胺能神經(jīng)元損傷[42]。絲氨酸/蘇氨酸激酶1（AKT1）屬于AKT家族，是參與細胞存活和凋亡調(diào)控信號轉(zhuǎn)導的中心分子，磷酸化時完全激活[43]。有研究顯示在PD中，維持AKT1中半胱氨酸296和310的硫醇狀態(tài)對于AKT1激酶活性和防止其被蛋白酶體降解至關(guān)重要[44]?？梢?，上述四個分子均可能是肉蓯蓉保護效應(yīng)的靶點。再利用AutoDock Vina將以上5個關(guān)鍵靶點與肉蓯蓉的6個活性成分（β-谷甾醇、花生四烯酸、脫水內(nèi)酯、丁香樹脂二甲醚、槲皮素和楓馬京）分別進行分子對接，均成功對接，結(jié)合能均小于?5 kcal/mol，提示藥物與靶點的結(jié)合活性較好。其中槲皮素和SRC具有強烈的結(jié)合活性，結(jié)合能為?9.2 kcal/mol，可從抗神經(jīng)炎癥、抗凋亡角度進一步深入研究肉蓯蓉的作用機制。

綜上，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學及分子對接探討了臨床常用于治療PD的有效藥物肉蓯蓉作用靶點，發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉通過多組分、多通路、多靶點的協(xié)同作用發(fā)揮其在PD中的療效，為進一步研究肉蓯蓉神經(jīng)保護作用機理和深入探討PD發(fā)病機制提供了依據(jù)。另外，本研究的篩選標準與中藥各組分的口服吸收度及生物利用度均有一定關(guān)系，所以并非對所有有效成分都能進行充分分析，這對我們天然藥物的開發(fā)也有一定啟示作用，即應(yīng)結(jié)合中藥成分的吸收、代謝等特點，同時考慮不同給藥途徑及不同個體或組織器官的分布情況進行深入研究。