陳 雪

（大連市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展服務(wù)中心 大連 116030）

桃[Prunus persica（L.）Batsch]是世界上重要的落葉果樹之一，其果實味道鮮美、營養(yǎng)豐富，頗受消費(fèi)者歡迎。傳統(tǒng)桃樹育種周期長、工作量大，如何縮短桃的育種時間和提高育種效率是桃樹育種工作者長期追求的目標(biāo)[1]。中油4 號油桃是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院育成的油桃新品種具有早熟、口感好等優(yōu)點，中油4 號油桃呈淡黃色，色澤光亮，核較小，果實較大，平均單果質(zhì)量為156 g，最大可達(dá)到202 g。相比于其他同類水果中油4 號油桃質(zhì)量較優(yōu)且更加耐長途運(yùn)輸，是大連地區(qū)溫室桃栽培的主要品種，頗受大連地區(qū)農(nóng)戶的歡迎，隨著溫室桃需求的增加，傳統(tǒng)的苗木繁殖方法受時間限制，且易受病害侵染，降低了生產(chǎn)能力，鑒于植物組織培養(yǎng)快繁技術(shù)趨于成熟[2-3]，其繁殖的速度快，且不受地區(qū)、氣候的影響，可及時提供大量優(yōu)質(zhì)種苗。目前在中油桃4 號快速繁殖技術(shù)方面還處于空白階段，因此本試驗對中油桃4 號叢生芽誘導(dǎo)及增殖的激素配比進(jìn)行篩選，旨在為中油桃4 號快速繁殖奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 無菌外植體 選取1 年生中油桃4 號健壯、無病蟲害的嫩枝莖段為外植體[4]。莖段長度為2 cm，流水沖洗30 min。75%酒精浸泡外植體30 s，無菌水沖洗3 次，再用5% NaClO 浸泡外植體5 min，無菌水沖洗3 次。外植體接種到不同激素（玉米素ZT 和赤霉素GA3）配比的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中[5]，見表1。接種后置于培養(yǎng)室內(nèi)光照培養(yǎng)，光照時間為10~12 h/d，光照強(qiáng)度為2 000 lx，培養(yǎng)室溫度25 ±2 ℃[6]。

1.2 芽萌發(fā)誘導(dǎo) 每種處理接種60 個外植體于芽萌發(fā)誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)培養(yǎng)基均以MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基（見表1），培養(yǎng)35 d 后，統(tǒng)計其萌芽率[7]。

表1 芽萌發(fā)誘導(dǎo)培養(yǎng)基 /（mg/L）

1.3 叢生芽誘導(dǎo) 經(jīng)過芽萌發(fā)培養(yǎng)后，切取脫毒嫩芽，接種到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，誘導(dǎo)培養(yǎng)基均以MS 培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基（見表2）。每種處理接種30 個外植體；35 d后統(tǒng)計其平均株高、平均葉片數(shù)及增殖系數(shù)[8]。平均株高=苗的總高度/苗的總數(shù)平均葉片數(shù)=葉片總數(shù)/苗的總數(shù)增殖系數(shù)=增殖后的幼芽數(shù)/接種的外植體數(shù)

表2 叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 /（mg/L）

1.4 生根誘導(dǎo) 叢生芽分切為的單芽，接種到生根培養(yǎng)基，誘導(dǎo)培養(yǎng)基均以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基（見表3）。每種處理接種30 個外植體；35 d 后統(tǒng)計其平均根數(shù)、平均根長、平均株高及生根率。平均根數(shù)=生根總數(shù)/接種外植體數(shù)平均根長=根的總長度/根的總數(shù)生根率=（生根的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)）×100%

表3 生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基 /（mg/L）

2 結(jié)果與分析

2.1 外源激素對中油桃4 號誘導(dǎo)芽萌發(fā)的影響 本試驗的9 種芽萌發(fā)誘導(dǎo)培養(yǎng)基對中油桃4 號芽萌發(fā)的影響差異較大。表4 可見，經(jīng)9 種處理組合培養(yǎng)基誘導(dǎo)后，都能夠促使中油桃4 號初代外植體萌芽，但以在處理中M6 的萌芽率最高，達(dá)到87%，隨著ZT 濃度的增加，萌發(fā)率逐漸呈降低趨勢，當(dāng)ZT在適當(dāng)?shù)臐舛葧r，GA3對芽萌發(fā)的誘導(dǎo)影響較小。

表4 外源激素對中油桃4 號芽萌發(fā)誘導(dǎo)的影響

2.2 外源激素對中油桃4 號誘導(dǎo)叢生芽的影響 在MS 培養(yǎng)基中添加不同濃度GA3、ZT 對中油桃4 號帶芽莖段進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)35 d后的統(tǒng)計結(jié)果見表5。

表5 外源激素對中油桃4 號叢生芽誘導(dǎo)的影響

腋芽萌發(fā)后再加入GA3（0.5 mg/L）和ZT（3.0 mg/L）的Z2 處理中，中油桃4 號的長勢最好，增殖系數(shù)最高可達(dá)4.37，高于其他處理。在繼代兩次后統(tǒng)計不同培養(yǎng)基上芽增殖率中發(fā)現(xiàn)，ZT 的濃度不易過高，過高影響腋芽的增殖。將叢生芽分割反復(fù)進(jìn)行繼代，能夠獲得大量的無菌苗，可以滿足大批量的規(guī)?；a(chǎn)。

2.3 外源激素對中油桃4 號誘導(dǎo)生根的影響 從表6 可見，9 種處理組合均可誘導(dǎo)中油桃4 號帶芽莖段生根，在MS 為基本培養(yǎng)基的處理組合中，綜合而言，在所有處理組合中以處理S5 的效果最好，其主根粗壯、須根較多，培養(yǎng)苗整體長勢較壯，生根率達(dá)到了63%。因此，中油桃4 號最適生根培養(yǎng)基的組成為MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

表6 外源激素對中油桃4 號生根誘導(dǎo)的影響

3 結(jié)論與討論

本研究對影響中油桃4 號的離體快繁的激素進(jìn)行分析，初步篩選出芽萌發(fā)、叢生芽及生根誘導(dǎo)的培養(yǎng)基配方。最適芽萌發(fā)培養(yǎng)基MS+ZT（2.5 mg/L）+GA3（0.5 mg/L）；叢生芽誘導(dǎo)最佳增殖培養(yǎng)基為MS+GA3（3.0 mg/L）+ZT（0.5 mg/L）；最適生根培養(yǎng)基MS+2,4-D（1.5 mg/L）。

同時發(fā)現(xiàn)光照度對中油桃4 號增殖培養(yǎng)是影響組培苗光合作用和生長的內(nèi)在因素。光照為3 000 lx時，增殖系數(shù)和平均芽長均最高，植株生長健壯；光照度為0 lx 時，雖然增殖系數(shù)較高，但組培苗出現(xiàn)嚴(yán)重的徒長、畸形現(xiàn)象，不利于不定芽的生長。