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        過敏性紫癜患兒免疫球蛋白、補體水平及抗核抗體檢測分析

        2022-04-16 12:50:18董磊臧磊王嬌嬌
        分子診斷與治療雜志 2022年3期
        關鍵詞:抗核補體紫癜

        董磊 臧磊 王嬌嬌

        過敏性紫癜(Henoch?Schonlein purpura,HSP)為常見血管疾病,主要好發(fā)于兒童,其發(fā)病率較高[1]。HSP 主要表現(xiàn)有毛細血管通透性及脆性增加,導致皮膚、臟器及關節(jié)發(fā)生炎癥和出血,具有一定遺傳傾向。目前,臨床上對于此病病因及發(fā)病機理尚不明確。本病多為自限性疾病,大部分患兒有輕微癥狀,經(jīng)臨床治療后,恢復較快;少數(shù)患兒病情進展快,全身器官功能出現(xiàn)衰竭,甚至引起死亡[2]。有研究表明,HSP 的發(fā)生與免疫功能有著密切關系,患兒發(fā)病期存在明顯體液免疫功能紊亂、T 淋巴細胞亞群失調(diào)等情況[3]。免疫球蛋白及補體在機體免疫過程中發(fā)揮重要抗感染作用。正常生理情況下,部分人體內(nèi)出現(xiàn)少量抗核抗體,但對于HSP 患者,其血液中有自身抗體存在,通??梢詫毎丝乖煞之a(chǎn)生直接針對作用[4]。本研究選取過敏性紫癜患兒為研究對象,分析其免疫球蛋白、補體水平及抗核抗體變化,為臨床針對性治療提供重要依據(jù)。報道如下:

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2019年2月至2021年3月在阜南縣人民醫(yī)院兒內(nèi)科接受治療的92 例過敏性紫癜患兒為研究對象。其中男48 例,女44 例,平均年齡為(8.51±1.58)歲。于同期,選取健康兒童41 例為對照組,男21 例,女20 例,平均年齡為(8.26±1.19)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究符合赫爾辛基宣言。

        1.2 納入與排除標準

        納入標準:①經(jīng)臨床診斷,均符合過敏性紫癜相關診斷標準[5];②近期未接受糖皮質(zhì)激素治療或免疫制劑治療;③病情穩(wěn)定,意識清醒;④均有一位陪護家屬;⑤年齡均在14 歲以下;⑥所有入試者監(jiān)護人均簽署同意書。排除標準:①合并嚴重器質(zhì)性病變;②患者凝血功能異常;③伴有惡性腫瘤;④合并其他感染者;⑤有家族過敏史;⑥中途轉院治療或退出研究。

        1.3 方法

        免疫球蛋白、補體水平檢測:所有人員均于清晨采集空腹靜脈血5 mL,以3 000 r/min 離心,20 min 后將血清分離,離心半徑為13.5 cm,放置于-80℃環(huán)境中保存。使用全自動生化分析儀(生產(chǎn)廠家:基蛋生物科技股份有限公司)采取免疫比濁法測定IgA、IgG、IgM、C3、C4,并計算出IgA/C3值。試劑盒購于北京中西華大科技有限公司,相關操作嚴格遵守說明書規(guī)范。

        抗核抗體檢測:所有人員均于清晨采集空腹靜脈血5 mL,30 min 后進行離心操作,以3 000 r/min離心,離心半徑為13.5 cm,時間為10 min,后將樣品置于-20℃環(huán)境中保存。采取間接免疫熒光法進行檢測,血清和熒光標記物的稀釋采用磷酸鹽緩沖液(1∶100),將其添加于樣品中,常溫環(huán)境下和生物薄片上的Hep?2 細胞核靈長類肝臟進行培育,30 min 后進行沖洗(采用PBS 緩沖液),去除未結合的非特異性物質(zhì);結合熒光標記物抗人IgG 抗體、生物薄片基質(zhì),行二次孵育,30 min 后進行浸泡沖洗;采用甘油進行封片處理,于顯微鏡下觀察抗核抗體。試劑盒購于北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學科技有限公司,相關操作嚴格遵守說明書規(guī)范。

        1.4 統(tǒng)計學方法

        數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件分析,計數(shù)數(shù)據(jù)采用n(%)表示,組間行χ2檢驗;計量數(shù)據(jù)采用(±s)表示,組間比較獨立樣本行t檢驗;采用受試者工作特征曲線(ROC 曲線)分析IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值,曲線下面積(AUC)0.7~0.9時有一定準確性,AUC>0.9 時準確性較高。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 兩組免疫球蛋白水平比較

        觀察組IgA 水平顯著高于對照組,比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);兩組IgG、IgM 水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

        表1 兩組免疫球蛋白比較(±s)Table 1 Comparison of two groups of immunoglobulins(±s)

        表1 兩組免疫球蛋白比較(±s)Table 1 Comparison of two groups of immunoglobulins(±s)

        組別觀察組對照組t 值P 值n 92 41 IgA(g/L)2.21±0.64 0.98±0.29 11.761<0.001 IgG(g/L)8.06±2.41 9.46±2.32 0.782 0.436 IgM(g/L)1.49±0.46 1.41±0.37 0.981 0.329

        2.2 兩組補體水平比較

        兩組C3、C4 比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);觀察組IgA/C3 顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

        表2 兩組補體水平比較(±s)Table 2 Comparison of complement levels between the two groups(±s)

        表2 兩組補體水平比較(±s)Table 2 Comparison of complement levels between the two groups(±s)

        組別觀察組對照組t 值P 值n 92 41 C3(g/L)1.21±0.14 1.19±0.23 0.617 0.538 C4(g/L)0.22±0.06 0.23±0.04 0.974 0.332 IgA/C3(g/L)1.58±0.41 1.09±0.21 7.231<0.001

        2.3 兩組抗核抗體比較

        觀察組抗Sm 陽性率、抗SS?A 陽性率、抗SS?B 陽性率、抗SCL?70 陽性率、抗PM?SCL 陽性率、抗PCNA 陽性率、抗核小體陽性率、抗組蛋白陽性率、抗核糖體核蛋白陽性率、ANA 陽性率顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

        表3 兩組抗核抗體比較[n(%)]Table 3 Comparison of two groups of antinuclear antibodies[n(%)]

        2.4 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值

        ROC 曲線分析顯示,IgA、IgA/C3 對HSP 的診斷價值AUC 分別為0.848、0.835,具有一定準確性;其敏感度、特異度分別為:IgA 為100.0%、56.1%,IgA/C3 為51.1%、100.0%,具有一定診斷價值。

        將IgA、IgA/C3 納入Logistic 回歸模型,通過回歸系數(shù)得出聯(lián)合檢測的數(shù)值計算公式為:聯(lián)合檢測=IgA+(0.835/0.848)*IgA/C3,統(tǒng)計分析得出聯(lián)合數(shù)據(jù)。進一步ROC 曲線顯示,聯(lián)合檢測AUC 為0.909,敏感度、特異度為66.3%、100.0%,提示聯(lián)合檢測預測價值較高(P<0.05)。見表4、圖1。

        表4 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值Table 4 The diagnostic value of IgA and IgA/C3 in children with Henoch?Schonlein purpura

        圖1 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值Figure 1 The diagnostic value of IgA and IgA/C3 in children with Henoch?Schonlein purpura

        3 討論

        過敏性紫癜為兒童常見自身免疫性疾病,HSP典型癥狀為皮膚紫癜、關節(jié)癥狀、胃腸道癥狀及腎臟損傷[6]。有研究發(fā)現(xiàn),HSP 患兒存在免疫功能失調(diào),抗體分泌增多,T 淋巴細胞亞群功能紊亂[7]。其發(fā)病機制臨床尚不清楚,目前認為除遺傳因素之外,感染、接觸過敏原等都為其主要因素[8]。各種刺激因子如感染源、過敏原,激活T 細胞,引起細胞因子異常分泌,凝血、纖溶功能異常,導致周圍血管炎性改變,造成組織和臟器損傷[9]。因此臨床上因探尋有效評估HSP 疾病的診斷指標,以早期發(fā)現(xiàn)異常,及時干預,改善患兒預后。

        有研究表明,IgA 在HSP 患兒中呈較高水平,并在HSP 患兒皮損組織中出現(xiàn)大量沉淀,其染色強度明顯強于正常兒童[10]。本研究結果顯示,從免疫球蛋白水平來看,觀察組IgA 水平顯著高于對照組,但是兩組IgG、IgM 水平比較無明顯差異,說明HSP 對免疫球蛋白存在選擇性分泌異常,IgA 顯著升高,說明其在HSP 患兒發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。有研究表明,IgA 可在HSP 患兒皮膚、關節(jié)及腎臟毛細血管出沉積,誘發(fā)小血管炎癥,從而使得毛細血管通透性增加,致病理損害[11]。另有文獻報道,IgA 可抑制粒細胞吞噬IgG 免疫復合物,使得IgG 免疫復合物堆積于腎臟,加重腎臟損傷[12]。對于IgM、IgG 在HSP 患兒體內(nèi)變化,目前報道不一致。有研究表明,IgM、IgG 失調(diào)會使得HSP 患兒腎臟損傷加重。而本研究中HSP 患兒與健康兒童比較IgG、IgM 水平無明顯差異。楊煥丹等[13]通過研究HSP 患兒體內(nèi)補體水平,發(fā)現(xiàn)補體水平與HSP 的病情無關。本研究中結果顯示,兩組C3、C4 比較無顯著差異,這與本研究結論一致。暢曉元等[14]報道IgA/C3 值可較好反映HSP 病情變化,同時可反映腎臟損害程度。本研究通過分析IgG/C3 值,發(fā)現(xiàn)觀察組IgA/C3 顯著高于對照組,說明IgA/C3 值對HSP 疾病變化具有較好的監(jiān)測作用。相關資料表明,抗核抗體檢測對自身免疫疾病的診斷準確性較高,臨床上醫(yī)生可根據(jù)患者抗核抗體檢出情況判斷患者是否存在自身免疫疾病,從而及時治療[15]??购丝贵w為自身抗體中最為常見,與疾病的發(fā)生有著密切關系。本研究結果說明抗核抗體檢測診斷HSP 效果較為顯著。

        本文進一步將IgA、IgG/C3 作ROC 分析,ROC 曲線分析顯示,IgA、IgA/C3 對HSP 的診斷價值AUC 分別為0.848、0.835,具有一定準確性;其敏感度、特異度分別為:IgA 為100.0%、56.1%,IgA/C3為51.1%、100.0%,具有一定診斷價值。當聯(lián)合檢測兩項時,AUC 為0.909,敏感度、特異度為66.3%、100.0%,提示聯(lián)合檢測預測價值較高,由此得出,IgA、IgA/C3 可作為HSP 的重要診斷指標[16]。

        綜上所述,HSP 患兒體內(nèi)IgA、IgA/C3 較高,抗核抗體檢測均呈陽性,且IgA、IgA/C3 對HSP 發(fā)生具有一定診斷價值,可為臨床診治明確方向,值得在臨床推廣。

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