陳勝杰，黃俊遠，汪 楊，周迎春，李 溪

廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，廣東廣州 510405

登革熱是由登革病毒(DENV)感染引起，通過埃及伊蚊或白蚊伊蚊傳播的急性傳染病。人群對DENV普遍易感，登革熱是多種因素作用的結果，登革熱的發(fā)病機制至今尚未完全闡明，近年來免疫應答及細胞因子風暴理論受到國內外學者的廣泛關注[1]。鑒于細胞因子水平與登革熱疾病嚴重程度之間的關系目前并無確切結論，國內關于DENV感染后白細胞介素(IL)-8、IL-10、IL-6和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達水平的研究較少，本研究探討了登革熱患者血清IL-8、IL-10、IL-6和TNF-α的表達水平，希望明確以上指標在診斷登革熱中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年1月至2019年12月在本院確診的297例登革熱患者為研究組，診斷符合《登革熱診療指南(2014年第2版)》[2]標準：患者發(fā)病前14 d曾到過登革熱流行區(qū)，或其居住場所或工作場所周圍1個月內曾出現(xiàn)過登革熱患者；急性起病，突發(fā)高熱；有明顯的疲乏、厭食、惡心等癥狀；常伴有較劇烈的頭痛、眼眶痛、全身肌肉痛、骨關節(jié)痛等癥狀，可伴面部、頸部、胸部潮紅，結膜充血等，有皮疹或出血傾向；白細胞計數(shù)(WBC)和(或)血小板計數(shù)(PLT)降低，血清DENV的IgM抗體陽性；同時血清檢測出DENV的NS1抗原。另選擇同期體檢健康者20例作為對照組，無基礎疾病，且DENV特異性IgM/IgG 抗體和NS1抗原篩查均為陰性。

1.2方法 收集297例登革熱患者的年齡、性別、相關臨床癥狀、體征。比較兩組研究對象常規(guī)實驗室指標檢查結果(如血常規(guī)、肝功能等)等資料。采集所有研究對象血清標本，-40 ℃保存，采用Biolegend公司的LEGENDplexTM試劑盒(熒光微球技術的免疫“雙夾心”和流式細胞儀結合的免疫學分析方法)定量檢測所有標本的細胞因子水平，包括IL-8、IL-10、IL-6和TNF-α，比較兩組研究對象細胞因子的表達情況。

2 結 果

2.1登革熱患者流行病學特征分析 共納入登革熱患者297例，年齡1～87 歲，平均(41.00±18.39)歲，30～<40歲登革熱患者占25.59%，明顯高于其他年齡段人群的構成比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；不同性別登革熱患者構成比比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；登革熱好發(fā)于8～11月，9月和10月登革熱發(fā)病人數(shù)構成比明顯高于其他月份，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 登革熱患者流行病學特征分析

2.2兩組常規(guī)實驗室指標比較 研究組WBC、PLT、血清尿素(Urea)水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。研究組血清肌酐(Crea)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組常規(guī)實驗室指標比較

2.3兩組血清細胞因子表達情況比較 研究組血清細胞因子IL-6、IL-8、 IL-10和TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組血清細胞因子比較

3 討 論

登革熱是由DENV引起的急性蚊媒傳染病，以發(fā)熱、皮疹、肌肉及骨關節(jié)疼痛為主要臨床表現(xiàn)[3-4]。登革熱廣泛流行于熱帶及亞熱帶國家及地區(qū)，并成為日益嚴重的全球性公共衛(wèi)生問題[5]。部分有基礎疾病患者感染登革熱后可發(fā)展為重癥登革熱，重癥登革熱的主要并發(fā)癥為休克、出血及嚴重器官損傷，嚴重者可危及患者生命。由于目前登革熱尚無特效治療藥物，重癥登革熱病死率較高，早期識別登革熱是降低病死率的關鍵[6]。因此，對登革熱感染提出預警信號顯得尤為迫切。

本研究對2016-2019年本院收治的登革熱患者進行流行病學分析，發(fā)現(xiàn)登革熱流行時間主要集中于每年的8～11月，9月和10月登革熱患者明顯增多，其中10月出現(xiàn)流行高峰，該發(fā)現(xiàn)和既往報道一致[4-6]。本研究的279例登革熱患者年齡為1～87歲，平均(41.00±18.39)歲，其中30～<40歲患者占25.59%，高于其他年齡段人群，這可能與青壯年外出務工多，流動性大等因素有關。既往有報道稱登革熱發(fā)病高峰年齡為20～<60歲，好發(fā)于青壯年人群(73.72%～90.30%)，本研究結論與之基本一致[7]。不同性別登革熱患者的構成比比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

DENV可抑制骨髓中白細胞和血小板的生成，導致WBC、PLT降低，臨床上普遍認為PLT下降幅度與病情嚴重程度呈正比[8]。本研究數(shù)據(jù)顯示，與體檢健康者比較，登革熱患者WBC和PLT明顯降低，PLT降低大大增加了出血風險，這也是登革熱患者典型的實驗室特征。同時，本研究結果顯示，登革熱患者肝功能指標AST、ALT水平較體檢健康者明顯升高，肝功能異常是登革熱較常見的并發(fā)癥，與文獻[9]報道肝臟是DENV靶細胞的觀點一致。肝功能指標AST、ALT水平的升高可能與免疫激活釋放細胞因子造成免疫損傷有關。研究組Crea水平明顯高于對照組，Urea水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，登革熱患者出現(xiàn)腎功能不全可能誘因是嚴重消化道癥狀導致攝入不足，嚴重血漿滲漏導致有效血容量不足，低血壓所致組織缺氧、溶血等[10]。

此外，近年來研究發(fā)現(xiàn)機體免疫與DENV相互作用是重癥登革熱發(fā)生的主要原因之一，細胞因子在其中起重要作用，有學者將細胞因子作為新的重癥登革熱預警指標并用于臨床研究，取得了一些進展[11]。原發(fā)性病毒感染時，宿主的T細胞及B細胞免疫應答產生的輔助性T細胞(Th)1分泌IL-2、TNF-α、干擾素(INF)-γ等，能清除病毒，促進患者機體恢復；Th2分泌IL-4、IL-6、IL-10等，刺激B細胞產生抗體，輔助體液免疫應答，能促進炎性反應，導致病情惡化。Th1與Th2之間的平衡調節(jié)主要由IL-10、IFN-γ介導[12-13]。本研究發(fā)現(xiàn)，與體檢健康者比較，登革熱患者外周血血清中IL-8、IL-10、IL-6、TNF-α水平明顯升高，說明DENV感染能激活機體免疫，釋放多種細胞因子引起免疫損傷，提示這些細胞因子可能可作為登革熱診斷的輔助診斷指標。

本研究通過分析登革熱患者流行病學特征，同時分析登革熱患者常規(guī)實驗室檢測結果和血清細胞因子的差異，為更好地診治與管控登革熱，以及進一步闡明細胞因子在登革熱中的作用及其機制提供了依據(jù)。