蔡玉，刁海丹

(大連市第三人民醫(yī)院婦科，大連 116033)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是造成育齡女性不孕的常見臨床病因[1-2]。目前PCOS尚無特異性治療方式，疾病致病機(jī)制也尚不清楚[3-4]。有研究數(shù)據(jù)表示，PCOS患者血清炎癥因子水平異常升高，推測(cè)炎癥反應(yīng)可能推動(dòng)PCOS發(fā)展[5-6]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)是常見的炎癥因子，同時(shí)參與了卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育[7]。Apelin是一種多肽物質(zhì)，廣泛分布在人體多種組織及器官內(nèi)，能抑制胰島素分泌[8]。雄性激素分泌水平過高是PCOS的主要病理特征之一，而細(xì)胞色素P450 19A1(aromatase，CYP19A1)參與了雄性激素的分泌及代謝過程[9]。研究PCOS患者血清CYP19A1水平與內(nèi)分泌之間的關(guān)系，有助于疾病機(jī)制的探究。本文就血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1與PCOS的關(guān)系進(jìn)行研究，以期為PCOS的診斷、發(fā)病機(jī)制提供參考依據(jù)。

資料與方法

一、研究對(duì)象

將大連市第三人民醫(yī)院婦科2018年1月至2021年1月期間收治的育齡期PCOS患者納為PCOS組。

PCOS患者符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分會(huì)內(nèi)分泌學(xué)組《多囊卵巢綜合征的診斷和治療專家共識(shí)》[10]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，即：(1)無排卵或稀發(fā)排卵；(2)雄激素水平升高或(和)高雄激素血癥；(3)B超下檢測(cè)提示卵巢多囊性改變。符合以上三條中任意兩條，并排除合并分泌雄性激素腫瘤等其他因素所致的雄性激素升高者，即可確診。

篩選同期健康體檢合格的同齡、月經(jīng)周期規(guī)律、卵巢儲(chǔ)備功能正常、無內(nèi)分泌疾病及自身免疫性疾病的健康育齡女性為對(duì)照組。

兩組排除標(biāo)準(zhǔn)：排除子宮及卵巢器質(zhì)性病變者、卵巢儲(chǔ)備功能下降或卵巢早衰者、輸卵管積水者、合并其他急慢性疾病者。

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，參與者知情且同意(倫理批號(hào)：201706257)。

二、方法

1.內(nèi)分泌及代謝指標(biāo)檢測(cè)：包括血清基礎(chǔ)性激素指標(biāo)[基礎(chǔ)促黃體生成素(bLH)，基礎(chǔ)促卵泡激素(bFSH)，基礎(chǔ)睪酮(bT)，基礎(chǔ)泌乳素(bPRL)和基礎(chǔ)雌二醇(bE2)]，空腹血糖(FPG)、空腹胰島素水平(FINS)，胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、血脂[膽固醇(TG)、三脂甘油(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)]。測(cè)量患者身高體重，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。對(duì)于月經(jīng)規(guī)律以及月經(jīng)稀發(fā)者，血清基礎(chǔ)性激素檢查時(shí)間為孕激素撤退出血第2～5天，閉經(jīng)者可在任意時(shí)間檢查。采集被研究者清晨空腹靜脈血，采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)基礎(chǔ)性激素水平。FPG及FINS水平檢測(cè)分別采用口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)以及胰島素釋放試驗(yàn)(IRT)檢驗(yàn)。HOMA-IR=FPG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5。脂質(zhì)代謝指標(biāo)于月經(jīng)周期任意時(shí)間進(jìn)行，采用化學(xué)免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

2.血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平檢測(cè)：采集外周靜脈血6 ml，3 000 r/min快速離心15 min，分離上層血清，均分為3份，分別用于檢測(cè)血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平。TGF-β1采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自武漢純度生物科技有限公司。Apelin采用發(fā)射免疫法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Phoneix Pharmaceutical公司。CYP19A1采用ELISA法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自武漢華聯(lián)科生物技術(shù)有限公司。

3.分組：根據(jù)PCOS組患者是否滿足血清T水平≥2.64 nmol/L，或滿足雄激素性脫發(fā)、痤瘡、多毛中任何一項(xiàng)分為高雄激素/非高雄激素亞組；根據(jù)2007年中國(guó)成人血脂代謝異常防控指南[11]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，滿足以下4項(xiàng)中任意一項(xiàng)既可診斷為血脂代謝異常：TG≥6.22 mol/L、TC≥2.27 mmol/L、LDL-C≥4.14 mmol/L、HDL-C<1.04 mmol/L，將PCOS組患者分為脂質(zhì)代謝正常/異常亞組；根據(jù)是否滿足BMI≥25 kg/m2，將PCOS組患者分為肥胖/非肥胖亞組；根據(jù)是否滿足HOMA-IR≥2.69，將PCOS組患者分為胰島素抵抗(IR)/非胰島素抵抗(NIR)亞組。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、PCOS組與對(duì)照組一般情況、基礎(chǔ)內(nèi)分泌及代謝情況比較

PCOS組患者年齡為(28.41±3.15)歲，BMI為(22.69±4.03)kg/m2；對(duì)照組年齡為(29.11±3.36)歲，BMI為(22.41±3.37)kg/m2；兩組間年齡及BMI無顯著性差異(P>0.05)。

但PCOS組的bLH、bLH/FSH、bT、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，bFSH水平顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，兩組間bPRL、bE2、FPG以及HDL-C水平無顯著性差異(P>0.05)(表1)。

表1 PCOS組與對(duì)照組基礎(chǔ)內(nèi)分泌及代謝情況比較(-±s)

二、PCOS組與對(duì)照組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較

PCOS組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表2)。

表2 PCOS組與對(duì)照組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較(-±s)

三、PCOS患者各亞組間血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較

1.高雄激素與非高雄激素亞組：高雄激素亞組血清CYP19A1水平顯著高于非高雄激素亞組(P<0.05)；兩組間血清TGF-β1、Apelin水平無顯著性差異(P>0.05)(表3)。

表3 高雄激素與非高雄激素亞組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較(-±s)

2.脂質(zhì)代謝正常與異常亞組：脂質(zhì)代謝異常亞組血清TGF-β1水平顯著高于脂質(zhì)代謝正常亞組(P<0.05)；兩組間血清Apelin、CYP19A1水平無顯著性差異(P>0.05)(表4)。

表4 脂質(zhì)代謝正常與脂質(zhì)代謝異常亞組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較(-±s)

3.肥胖與非肥胖亞組：肥胖亞組血清TGF-β1、Apelin水平均顯著高于非肥胖亞組(P<0.05)；兩組血清CYP19A1水平無顯著性差異(P>0.05)(表5)。

表5 肥胖與非肥胖亞組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較(-±s)

4.IR與NIR亞組：IR亞組血清TGF-β1、Apelin水平均顯著高于NIR亞組(P<0.05)；兩組間血清CYP19A1水平無顯著性差異(P>0.05)(表6)。

表6 IR與NIR亞組血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平比較(-±s)

四、PCOS患者血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平之間的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析提示，PCOS患者血清CYP19A1與TGF-β1、Apelin均呈弱正相關(guān)(P<0.05)，但TGF-β1與Apelin之間無顯著相關(guān)性(P>0.05)(表7)。

表7 PCOS患者血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1水平之間的相關(guān)性分析

討 論

PCOS不僅會(huì)引起排卵障礙、月經(jīng)不調(diào)等生殖問題，患者所存在的內(nèi)分泌障礙也逐漸獲得臨床關(guān)注。本研究將80例PCOS患者與70例健康同齡孕齡女性進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PCOS組bLH、bLH/FSH、bT、FINS、HOMA-OR、TC、TG、LDL-C水平均顯著高于對(duì)照組，bFSH水平顯著低于健康對(duì)照組。提示PCOS患者在性激素、糖代謝、脂代謝、IR等多個(gè)方面呈現(xiàn)異常。有研究表示，PCOS患者出現(xiàn)肥胖、IR、脂代謝紊亂等內(nèi)分泌異常問題的概率遠(yuǎn)高于正常同齡女性[12]。PCOS不僅僅影響到患者的生殖健康，還影響到患者內(nèi)分泌。

TGF-β1主要表達(dá)在初級(jí)卵泡卵母細(xì)胞、顆粒細(xì)胞等，Ewens等[13]研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β1等位基因的表達(dá)情況與PCOS伴IR患者間存在相關(guān)性。同時(shí)TGF-β1也是常見的炎癥因子，參與各種急慢性炎癥疾病的發(fā)展。本文研究發(fā)現(xiàn)，PCOS組患者血清TGF-β1水平顯著高于健康對(duì)照組，且在脂質(zhì)代謝異常、肥胖以及存在IR的PCOS患者中的水平均高于其對(duì)照亞組，提示血清TGF-β1與PCOS患者肥胖、脂質(zhì)代謝紊亂以及IR等內(nèi)分泌紊亂情況具有相關(guān)性。

Apelin是孤獨(dú)G蛋白偶聯(lián)受體APJ受體的內(nèi)源性配體，能調(diào)節(jié)免疫與胰島素分泌，參與了高血壓、心臟病等心血管疾病的發(fā)生與發(fā)展。有研究表示，Apelin與脂聯(lián)素的性質(zhì)相似，能參與脂質(zhì)代謝，并證實(shí)Apelin可通過PKC以及PI3K途徑直接調(diào)節(jié)胰島素[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，PCOS組患者血清Apelin水平顯著高于健康對(duì)照組，且伴有肥胖以及IR的PCOS患者血清Apelin水平也顯著高于其對(duì)照亞組，提示血清Apelin可能參與PCOS患者肥胖以及IR進(jìn)程。

臨床數(shù)據(jù)顯示，大概有50%～70%的PCOS患者存在高雄激素血癥，高雄激素血癥與IR之間關(guān)系緊密，IR可通過多種途徑促進(jìn)高雄激素血癥，而高雄激素血癥又能通過正反饋?zhàn)饔?，增加血清T水平含量，提高雙氫睪酮釋放量，提高LH/FSH比值，加重激素代謝紊亂[15-16]。CYP19A1基因參與雄激素代謝，其多態(tài)性與高雄激素血癥間存在密切聯(lián)系。本研究發(fā)現(xiàn)，PCOS患者血清CYP19A1水平顯著高于健康對(duì)照組，且存在高雄激素血癥的PCOS患者血清CYP19A1含量顯著高于其對(duì)照亞組，提示CYP19A1參與了PCOS高雄激素血癥；但未發(fā)現(xiàn)血清CYP19A1與肥胖、脂質(zhì)代謝紊亂以及IR之間的關(guān)系。

此外，本研究進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，PCOS患者血清CYP19A1與TGF-β1及Apelin均呈弱正相關(guān)，提示CYP19A1與TGF-β1及Apelin之間可能還存在相互作用機(jī)制，共同參與PCOS發(fā)生及進(jìn)展。

綜上所述，我們的研究發(fā)現(xiàn)，血清TGF-β1與PCOS患者肥胖、脂質(zhì)代謝紊亂以及IR之間存在相關(guān)性，血清Apelin與PCOS患者肥胖以及IR之間存在相關(guān)性，血清CYP19A1與PCOS患者高雄激素血癥間存在相關(guān)性。這些結(jié)果表明，血清TGF-β1、Apelin、CYP19A1與PCOS內(nèi)分泌紊亂間存在密切聯(lián)系。限于研究條件，本研究并未對(duì)各指標(biāo)在引起PCOS內(nèi)分泌紊亂中的具體機(jī)制進(jìn)行研究，但可作為下一步研究的方向。